治疗性克隆对解决供体器官缺乏和器官移植后免疫排斥反应具有重要意义。流程如下：

（1）过程①采用的是细胞工程中的__________技术，过程②采用的是胚胎工程中的_____技术。

（4）胚胎干细胞可以来自于囊胚中的___________。在一定条件下，胚胎干细胞可以分化形成不同的组织器官。若将图中获得的组织器官移植给个体_____（填“A”或“B”），则不会发生免疫排斥反应。

为了加快优良种牛的繁殖速度，科学家采用了以下两种方法，请根据图示回答下列问题。

(3)在受精的过程中，精子入卵后会立即发生一种反应叫_______反应，以防止多精入卵受精。判断卵子是否受精的标志通常是______________________。

(4)要培育高产奶率的转基因牛，如建立生产生长激素的乳腺生物反应器，科学家要将___________和乳腺蛋白基因的启动子、终止子重组在一起，通过显微注射等方法导入牛的受精卵中。受体对移入子宫的外来胚胎基本上不发生免疫排斥反应，这为胚胎在受体内的存活提供了可能。

(5)“试管牛”的形成用到的生物技术有____ (填序号)

①早期胚胎培养   ②体外受精   ③胚胎移植   ④核移植

(6)早期胚胎中的胚胎干细胞，不仅可以应用于哺乳动物胚胎性别鉴定，还可应用于治疗人类的某些疾病，如老年痴呆症、糖尿病等； ES细胞体外诱导分化培育出人造组织器官用于_______、研究体外细胞分化等领域。 

【选修3-现代生物科技专题】

为治疗糖尿病，研究人员提出了如下图的方法。

（1）一般选用的图中①都是_____________的供体细胞。

（2）核移植的受体细胞一般选用MⅡ期卵母细胞。进行相关显微操作时，一般用微型吸管一并吸出_____________。  

（3）细胞在体外培养时，除培养液提供必需的营养条件、适宜的温度、pH和气体环境外，还需要有_____。上图所获的胚胎干细胞可由________中分离出来，在功能上具有________。

（4）利用PCR技术扩增正常胰岛素基因的前提条件是___________。将正常胰岛素基因导入胚胎干细胞并维持稳定和表达的过程，称为_____。

（5）“定向诱导”的目的是使重组细胞B发生_________，从而形成功能专一的胰岛类似细胞。

（6）该治疗糖尿病的方法与相比异体移植，突出的优点是________。

    图3

（1）微载体的直径很小，其培养原理是将对细胞无害的颗粒——微载体加入到培养液中，使细胞在其表面____生长，而且操作中需要通过搅动使微载体始终保持悬浮状态，从而让细胞与培养液充分接触，这样细胞就可以在载体表面繁殖成 ______（“单层”、“多层”）细胞。

（2）培养罐中培养细胞时，要注意保持适宜的温度和pH，还需要提供细胞所需的营养、气体环境等，为维持培养液的pH，应在培养液中加入95%空气和___的混合气体。图3是某科研小组培养的细胞，由于培养用具灭菌不严格，结果出现曲线2的情况，为了避免这种情况通常可以在培养液中加入抗生素，其作用是______。

（3）在生产单克隆抗体的过程中，杂交瘤细胞在加入培养罐前，需筛选出符合条件的细胞群，还要对选出的杂交瘤细胞进行克隆化培养和_________方能加入培养罐培养。单克隆抗体作为诊断试剂，具有________________的优点。

（4）科研人员利用明胶微载体培养出了胚胎干细胞，并在培养液中加入______因子，成功构建了骨组织。

（5）在试管动物的培育中，涉及的关键技术是体外受精和___________的培养，再将这些胚胎进行移植，就可以实现良种动物的大量繁殖。移植中要求受体母牛要具有健康的体质和____________的能力。

如图是利用现代生物工程技术治疗遗传性糖尿病（基因缺陷导致胰岛B细胞不能正常合成胰岛素）的过程设计图解，请据图回答：

（1）图中①所示的结构是细胞核；②所示的细胞是______________，图中③所示的生物工程技术是________________；④所示的生物工程技术是转基因技术．

（2）在图中④所示的生物工程技术中，健康胰岛B细胞基因在导入②之前要构建基因表达载体，构建出的分子除含目的基因外，还必须含有_______________________________。

（3）重组细胞b在一定的__________________如牛磺酸、丁酰环腺苷酸等的作用下，可以定向分化形成膜岛B细胞．培养重组细胞b的培养液中除加入各种营养物质外，还必须加入________________等一些天然成分，放在含O₂和CO₂的环境中培养，其中CO₂的作用是________________________。

（4）图示方法与一般的异体移植相比最大的优点是____________________________。

下图是利用现代生物工程技术治疗遗传性糖尿病（基因缺陷导致胰岛B细胞不能正常合成胰岛素）的过程设计图解。请据图回答：

（1）细胞②是囊胚的_________________中分离得到的，在功能上具有_________________，对该细胞进行定向诱导分化，通常需要加入_________________，例如牛磺酸等。

（2）步骤④常用的方法是_________________，这一步骤的操作对象如果是植物细胞，我国科学家独创的一种方法是_________________。

（3）上述治疗方法在基因工程的水平上可以称为_________________。

【加试题】（一）蓝莓富含花青素，含有丰富的营养成分，是世界粮农组织推荐的五大健康水果之一，蓝莓的深加工产品也深受人们的喜爱，下图是某实验室利用蓝莓酒制作蓝莓醋的实验装置，回答以下问题：

（1）果醋发酵需要的菌种是__________，实验前需将该菌种在______上进行扩大培养。

（2）甲中是蓝莓酒和蒸馏水的混合物，其比例是_____

   A.1：2 B.1：4 C. 2：1 D.4：1

（3）乙中是经_________灭菌过的锯末，采用_________法将发酵菌株固定在锯末上制成固定化菌株，可大幅缩短生产周期，降低生产成本和提高生产效率，并增强果醋的风味。

（4）若该菌种在杂菌污染，欲消除污染的杂菌，最简单的方法是____________________。

（二）2014年7月，FDA批准了利用转基因兔生产的新药Rucones（重组人C1酯酶抑制剂），该药物可用于治疗成人及青少年遗传性血管性水肿患者的急性发作，其部分技术路线如图：

（1）由过程①得到的A为_____________ 。

（2）过程②常用的方法是______________。

________细胞作为饲养层细胞，用以___________________。

（4）兔的胚胎干细胞不能发育成完整个体，但可以通过___技术形成重组细胞，然后利用____技术，通过代孕母兔分娩出转基因兔，从转基因兔的乳汁中提取Rucones药物。

Rag2基因缺失小鼠不能产生成熟的淋巴细胞．科研人员利用胚胎干细胞（ES细胞）对Rag2基因缺失小鼠进行基因治疗．其技术流程如图：

2012年诺贝尔生理学奖获得者发现，利用逆转录病毒将Oct4等4个关键基因导入已分化的体细胞中并表达，可使这个细胞成为类似干细胞的诱导多能干细胞（iPS细胞）．如图为该技术在人体细胞中的实验示意图．请回答：

（1）iPS细胞具有全能性的根本原因__________________,由iPS细胞产生其他种类细胞的过程称为________________，其实质是________________．

（2）利用患者的iPS细胞对其自身受损器官进行修复，与传统器官移植相比成功率更高的原因是其可避免________________．

（3）目前iPS细胞在实际应用中还存在许多问题，例如有研究发现iPS细胞的增殖难以控制，即iPS细胞具有癌细胞的特征．结合题干信息分析，产生这种变化的最可能的原因是___________________．