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          50条信息

            • 1.

              [选修3:现代科学技术专题]

              基因编辑技术指对目标基因进行“编辑”,实现对特定DNA 片段的敲除、加入等.

              CRSPRI/Cas9 系统基因编辑技术风靡全球实验至后,我国韩春雨研究团队提出NgAgo-gDNA 基因编辑工具,但却引起了科学界的质疑.为了探究NgAgo-gDNA 系统能否引发斑马鱼的Fabplla基因发生突变导致其眼睛发育缺陷,复旦大学和南通大学联合进行了研究.请回答下列问题.
              (1)探究一:NgAgo-gDNA 系统能否使斑马鱼眼睛缺陷?
              方法:首先推测构成NgAgo 蛋白的 ____________,在试管中合成mRNA,并将其与单链gDNA 混合后注射到斑马鱼胚胎细胞中,进行胚胎培养.培养液需含有葡萄糖、氨基酸、核苷酸、无机盐、有机盐、维生素和 ________等.小斑马鱼的形成 _____(填“需要”或“不需要”)进行胚胎移植.单链gDNA 与Fabplla 基因的碱基互补配对与Fabplla 基因转录时的碱基互补配对相比,区别是 ______
              结果:实验组斑马鱼胚胎出现了严重的眼睛缺陷.
              (2)探究二:斑马鱼眼睛缺陷是否是由Fabplla 基因发生突变引起的?
              方法:从异常眼部表现型的斑马鱼胚胎细胞中提取Fabplla 基因,对其使用PCR 技术进行扩增,并研究该基因在斑马鱼胚胎发育中的功能.PCR 技术扩增Fabplla 基因时,需要提供模板、原料、 __________、引物等条件.将模板DNA 加热至90~95℃,该处理的目的是 ____________________________.
              结果:NgAgo-gDNA 系统引发的眼睛缺陷可通过外源添加Fabplla 基因的mRNA 来恢复,而且对Fabplla 基因测序结果发现其序列与对照组相同.
              初步结论: ____________________________________.
              (3)转基因技术是一把双刃剑,它既可以造福人类,也可能在使用不当时给人类带来灾难.面对转基因技术可能产生的负面影响,公众不可避免地产生了疑虑,引发了人们在食物安全、生物安全和 ____________三个方面发生激烈的争论.
            • 2.
              以重组DNA技术为核心的基因工程正在改变着人类的生活.请回答下列问题.
              (1)基因工程又称为 ______ 或 ______ .
              (2)切割和连接DNA分子所使用的酶分别是 ______ 和 ______ .
              (3)运送目的基因进入受体细胞的载体一般选用病毒或 ______ .后者的化学本质为 ______ .
            • 3.
              内皮素(ET)是一种含21个氨基酸的多肽,具有强烈的血管收缩和促进平滑肌细胞增殖等作用,其功能异常与高血压、糖尿病、癌症等有着密切联系.内皮素(ET)主要通过与靶细胞膜上的ET受体(ETA)结合而发挥生物学效应.科研人员通过构建表达载体,实现ETA基因在大肠杆菌细胞中的高效表达,其过程如图所示,图中SNAP基因是一种荧光蛋白基因,限制酶Apa I的识别序列为CCC↓GGG,限制酶XhoI的识别序列为C↓TCGAG (识别序列均只写出单链).请据图分析回答:

              (1)进行过程①时,需要加入缓冲液、引物、脱氧核苷酸和 ______ 酶等.完成过程①②③的目的是 ______ .
              (2)过程③和⑤中,限制酶XhoI切割DNA,使 ______ 键断开,形成的黏性末端是 ______ .用两种限制酶切割,获得不同的黏性末端,其主要目的是 ______ .
              (3)构建的重组表达载体,目的基因上游的启动子是 ______  识别和结合的部位,进而可驱动基因的转录.除图中已标出的结构外,基因表达载体还应具有的结构有复制原点和 ______ .
              (4)过程⑥要用 ______ 预先处理大肠杆菌,使其成为容易吸收外界DNA的感受态细胞.
              (5)将SNAP基因与ETA基因结合构成融合基因,其目的是有利于检测 ______ .该融合基因进入受体大肠杆菌内,并且在其中维持稳定和表达的过程,称为 ______ .
              (6)基因工程操作时可将外源基因整合到叶绿体基因组中,不仅能有效改良植物的品质,还由于叶绿体转基因 ______ ,从而在一定程度上避免转基因作物中的外源基因能扩散到其他同类作物.
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