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            • 1. 如图表示含有目的基因D的DNA片段长度(bp即碱基对)和部分碱基序列,图右表示一种质粒的结构和部分碱基序列.现有MspI、BamHI、MboI、SmaI 4种限制性核酸内切酶,它们识别的碱基序列和酶切位点分别为C↓CGG、G↓GATCC、↓GATC、CCC↓GGG.

              (1)图左DNA分子中的一条脱氧核苷酸链中相邻两个脱氧核苷酸之间由 ______ (化学键)连接.
              (2)若用限制酶SmaI完全切割图中含有目的基因D的DNA片段,其产物长度分为 ______
              (3)为了提高试验成功率,需要通过 ______ 技术扩增目的基因,以获得目的基因的大量拷贝.在目的基因进行扩增时,加入的引物有A、B两种,引物的作用是 ______ ,若该目的基因扩增n代,则其中含有A、B引物的DNA分子有 ______ 个.
              (4)若将图右中质粒和目的基因D通过同种限制酶处理后进行连接,形成重组质粒,那么应选用的限制酶是 ______ .经检测,部分含有重组质粒的大肠杆菌菌株中目的基因D不能正确表达,其最有可能的原因是 ______
              (5)导入目的基因的植物细胞,经过植物组织培养技术得到幼苗,该技术利用的原理是 ______
            • 2. 胚胎工程和基因工程目前在生物技术中发展较快,回答下列问题:
              (1)在哺乳动物的核移植实验中,一般通过[    ](物理方法)将受体细胞激活,使其进行细胞分裂并发育,当胚胎发育到[    ]阶段时,将胚胎植入另一雌性(代孕)动物体内.
              (2)在“试管牛”的培育过程中,要使精子和卵母细胞在体外成功结合,需要对精子进行[    ]处理.另外,培养的卵母细胞需要发育至[    ],该时期在显微镜下可观察到次级卵母细胞和第一极体.
              (3)利用体细胞进行核移植技术的难度明显高于利用胚胎细胞进行核移植的原因是[    ].
              (4)若要使获得的转基因牛分泌的乳汁中含有人干扰素,则所构建的基因表达载体必须包括:某种牛乳腺分泌蛋白基因及其启动子、[    ]、终止子、标记基因和复制原点等.目前常用的措施是将该基因表达载体导入牛的[    ](填“受精卵”或“乳腺细胞”),导入方法是[    ].
            • 3. 野生森林草莓是二倍体,其早熟和晚熟由一对等位基因(A、a)控制.研究人员将一个抗除草剂基因(Bar)转入晚熟森林草莓的一条染色体上,培育出一批转基因抗除草剂草莓(染色体上有抗除草剂基因用B+表示,没有用B-表示).他们用抗除草剂晚熟森林草莓与不抗除草剂早熟森林草莓作为亲本进行杂交,从得到的F1中选取植株M进行自交得到F2,F2的结果如下表:
              表现型抗除草剂早熟抗除草剂晚熟不抗除草剂早熟不抗除草剂晚熟
              个体数137484515
              (1)早熟基因和抗除草剂基因位于    (填“同源”、“非同源”)染色体上.植株M的一个细胞中最多含有    个抗除草剂基因.
              (2)抗除草剂基因在表达时,    与DNA分子的某一启动部位相结合,以其中的一条链为模板并通过    聚合成与该片段DNA相对应的RNA分子.
              (3)亲本中不抗除草剂早熟森林草莓的基因型有    种,抗除草剂晚熟森林草莓的基因型是    .F2抗除草剂晚熟中纯合子的概率为    
              (4)让植株M与不抗除草剂晚熟森林草莓进行一次杂交,请预测杂交结果,并用遗传图解说明.
            • 4. 科学家设法将人的生长激素基因导入其他生物体(细胞)内,从而获取大量的人的生长激素,应用于侏儒症的早期治疗,如图所示.请据图回答下列问题.
              (1)过程①采用的方法是 , 过程②之前需用 处理目的基因和质粒.
              (2)过程③需事先对大肠杆菌用 处理,使其处于感受态,接着 ,从而完成转化过程.
            • 5. 下面是将某细菌的基因A导入大肠杆菌内,制备“工程菌”的示意图.

              请据图回答:
              (1)获得A有两条途径:一是以A的mRNA为模板,在 酶的催化下,合成互补的单链DNA,然后在 作用下合成双链DNA,从而获得所需基因;二是根据目标蛋白质的 序列,推测出相应的mRNA序列,然后按照碱基互补配对原则,推测其DNA的 序列,再通过化学方法合成所需基因.
              (2)利用PCR技术扩增DNA时,需要在反应体系中添加的有机物质有 、 、4种脱氧核苷酸三磷酸和耐热性的DNA聚合酶,扩增过程可以在PCR扩增仪中完成.
              (3)由A和载体B拼接形成的C通常称为 .
              (4)在基因工程中,常用Ca2+处理D,其目的是 .
            • 6. 回答下列有关基因工程的问题.
              (1)用限制酶HindⅢ、BamH I同时切割目的基因,可得到 个DNA片段.
              (2)用限制酶HindⅢ和BamH I切割Ti质粒,可得到 个DNA片段.
              (3)过程①需要用到 酶.
              (4)切割目的基因和质粒的酶与①过程的酶作用的化学键都是 
              (5)如果把目的基因直接注入植株细胞,一般会被植株细胞 .
              (6)构建重组质粒时,常用Ti质粒作为载体,是因为Ti质粒上具有 ,它能把目的基因整合到受体细胞(植株细胞)的 上.
              (7)将目的基因导人植物细胞,除采用图中的方法外,还可采用 法和花粉管通道法.
            • 7. 苏云金芽孢杆菌能产生具有杀虫能力的毒素蛋白.如图是培育转毒素蛋白基因植物及转基因植物中两种生物大分子合成的部分过程示意图.请据图回答问题:
              (1)将图中①处的DNA用HindⅢ、BamH l完全酶切后,反应管中有 种DNA片段.过程②需要用到 酶.
              (2)假设图中质粒原来BamHl的识别序列变为BclI的识别序列,现用BclI和HindⅢ切割质粒,再经过程②能否获得所需重组质粒  , 理由是 
              (3)若上述假设成立,并成功形成重组质粒,则重组质粒可被限制酶 切割.
              (4)图中α链是 .不同组织细胞的相同DNA进行过程③时启用的起始点 (填“都相同”或“都不同”或“不完全相同”),原因是 
            • 8. 图是基因工程示意图,请据图回答:
              (1)从基因文库中提取的目的基因通过PCR进行扩增时,需使用一种特殊的酶是 .
              (2)进行过程①时,需用 酶切开载体以插入目的基因.载体应有RNA聚合酶识别和结合的部位,以驱动目的基因转录,该部位称为 
              (3)构建基因表达载体的目的是使 .
              (4)若用重组质粒转入大肠杆菌,一般情况下,不能直接用未处理的大肠杆菌作为受体细胞,原因是 
              (5)在抗虫作物的培育过程中,将Bt毒蛋白基因导入作物受体细胞时,常用的方法是 .
              (6)检测细菌的目的基因是否转录出mRNA时,需要用 做探针,再与相应的物质杂交.
            • 9. 如图1表示含有目的基因D的DNA片段长度(bp即碱基对)和部分碱基序列,图2表示一种质粒的结构和部分碱基序列.现有MspⅠ、BamHⅠ、MboⅠ、SmaⅠ4种限制性核酸内切酶切割的碱基序列和酶切位点分别为C↓CGG、G↓GATCC、↓GATC、CCC↓GGG.请回答下列问题:
              (1)图1的一条脱氧核苷酸链中相邻两个碱基之间依次由 连接.
              (2)若用限制酶SmaⅠ完全切割图1中DNA片段,产生的末端是 末端,其产物长度为 .
              (3)若图1中虚线方框内的碱基对被T﹣A碱基对替换,那么基因D就突变为基因d.从杂合子分离出图1及其对应的DNA片段,用限制酶SmaⅠ完全切割,产物中共有 种不同DNA片段.
              (4)若将图2中质粒和目的基因D通过同种限制酶处理后进行,形成重组质粒,那么应选用的限制酶是 .在导入重组质粒后,为了筛选出含重组质粒的大肠杆菌,一般需要用添加 的培养基进行培养.经检测,部分含有重组质粒的大肠杆菌菌株中目的基因D不能正确表达,其最可能的原因是 
            • 10. 苏云金芽孢杆菌能产生具有杀虫能力的毒素蛋白.如图是培育转毒素蛋白基因植物及转基因植物中两种生物大分子合成的部分过程示意图.请据图回答问题:
              (1)将图中①处的DNA用HindⅢ、BamH l完全酶切后,反应管中有 种DNA片段.过程②需要用到 酶.
              (2)假设图中质粒原来BamHl的识别序列变为BclI的识别序列,现用BclI和HindⅢ切割质粒,再经过程②能否获得所需重组质粒 ,理由是 
              (3)若上述假设成立,并成功形成重组质粒,则重组质粒可被限制酶 切割.
              (4)图中α链是 .不同组织细胞的相同DNA进行过程③时启用的起始点(填“都相同”或“都不同”或“不完全相同”),原因是 
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