知识点挑题 - 高中生物 - 优优班--学霸训练营

1．刚果红能够与纤维素形成红色复合物，可用其鉴定纤维素分解菌。某研究小组将滤纸埋在土壤中，30天后从滤纸上取6g土壤样品加入30mL生理盐水中溶解，得到了富有纤维素分解菌的菌原液，并进行如下实验，回答下列问题：
（1）稀释菌原液：为确定合适的稀释倍数，小组成员取1mL菌原液进行如图1所示的操作，在统计菌落时，发现平板上的平均菌落数为40个，则每毫升菌原液中的细菌数大约为______个。
（2）培养基的准备：在对培养基进行高压蒸汽灭菌的过程中，完成加水、装锅、加热排气、保温保压适当时间后，切断热源，让灭菌锅内温度自然下降，______，打开排气阀，旋开固定螺栓，开盖，才可以取出灭菌的培养基等物品。待培养基冷却至50℃左右时倒平板，在培养基凝固之前加入灭菌的刚果红，从功能上来看，该培养基属于______培养基，培养基中碳源主要是______。
（3）接种与观察：在无菌条件下，用______取0.1mL稀释后的菌悬液进行图2中______所示的操作，室温放置2～3分钟后倒置于恒温箱中培养，室温放置2～3分钟的目的是______。培养过程中定期观察菌落特征和透明圈的大小，图3中D/d的值越______，表示该菌对纤维素分解能力越强。

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2．某研究小组利用“滤膜法”对受污染的河流水体进行了大肠杆菌活菌数目的测定。回答下列问题：
（1）研究人员向葡萄糖蛋白胨培养液中加入适量的溴麝香草酚蓝水溶液后，装人图甲所示的试管中，再将污水样滴加进去振荡摇匀，一段时间后，若观察到溶液颜色变化情况为______，说明微生物在培养过程中产生了CO₂．若要用重铬酸钾检测微生物在培养过程中是否产生了酒精，具体做法是______。
（2）利用图乙所示的“滤膜法”测定大肠杆菌的数目时，应先制备牛肉膏蛋白胨固体培养基，该培养基的灭菌方法是______，灭菌后待培养基冷却至______℃左右时，在______附近倒平板。
（3）图乙中滤膜的孔径应______（填“大于”“小于”或“等于”）大肠杆菌。若将滤膜转移到伊红美蓝培养基上培养一段时间，然后统计______色的菌落数目，就可估算出单位体积样品中大肠杆菌的数目，但这样得到的统计值往往要比实际值低，原因是______。

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3．苹果除可直接食用外，还可将其制成饮品，如苹果汁、苹果酒、苹果酯等。回答下列问题：
（1）在制作苹果汁时，为了提高出汁率和澄清度，常添加果胶酶，这是分解果胶的一类酶的总称，包括______、______和果胶酯酶等。
（2）从微生物培养的角度分析，苹果汁能够为酵母菌的生长提供的成分有______。苹果汁发酵产生苹果酒的过程不需要严格的消毒处理，原因是______。
（3）醋酸菌常用于苹果醋的制作，在分离优质醋酸菌时，若想对醋酸菌进行计数，则应用稀释涂布平板法在培养基上进行接种，平板划线法一般不用于活菌计数的原因是______。计数时，通常以菌落数在30～300的稀释度来计算细菌含量，原因是______。

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4．酸奶因营养丰富和口感美味而深受大众喜爱，且含有活性乳酸菌，对身体大有益处。常见的乳酸菌主要为乳杆菌属、双歧杆菌属和嗜热链球菌属。现采用如下步骤对酸奶中的乳酸菌进行筛选、分离：
酸奶→选择适宜稀释度→涂布MRS琼脂培养基→适宜温度培养→挑取单个菌落→接种于MRS琼脂平板或MC琼脂平板→菌种鉴定→接种MRS液体培养基→菌种保藏
请回答下列有关问题：
（1）制备MRS琼脂培养基时，采用______法灭菌15～20min。
（2）倒平板操作时，应在______附近进行，待平板冷凝后将平板倒置的目的是______。
（3）制备稀释液时，先将酸奶样品充分摇匀，以无菌吸管吸取样品______ mL放入装有225mL无菌水锥形瓶中，充分振荡，制成1：10的样品液。
（4）培养一段时间后，从MRS固体培养基上挑多个单菌落，使用______法接种于MC琼脂平板或MRS琼脂平板上，于36℃±1℃______（填“厌氧”或“好氧”）条件下倒置培养48h后，再挑取单个菌落进行菌种鉴定。
（5）菌种鉴定后将其接种至MRS液体培养基的目的是______。将得到的纯菌株进行长期保藏，可采用______的方法。

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5．青霉素酰化酶，又称为青霉素酰胺酶或青霉素氨基水解酶。该酶主要从大肠埃希菌胞内酶和巨大芽孢杆菌胞外酶中获得，该酶已大规模应用于工业生产头孢类抗生素。某制药厂致力开发新产品，生产头孢类抗生素药物。欲通过人工诱变的方法获得高产青霉素酰化酶的微生物，制备并固定化青霉素酰化酶。根据相关信息回答问题：
（1）在获得髙产青霉素酰化酶的微生物时，从理论上分析选择对______进行诱变处理后，筛选出的髙产菌株更有利于生产，原因是______，而菌体可以继续进行发酵培养。
（2）在研究中发现，髙产菌株会产生多种分子量不同的酶，且均不会被RNA酶降解。在分离纯化青霉素酰化酶时，适合采用______法；之后需要对其纯度进一步鉴定，使用最多的方法是______。
（3）除显微镜直接计数法外，还常用______法进行活菌计数，其原理是______。为防止人员感染和污染环境，实验人员离开实验室时，一定要做的事情是______。

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6．科研人员利用腐烂的水果筛选产果胶酶的细菌，并对果胶酶进行分离纯化请回答：
（1）通过以______为唯一碳源的选择培养基，筛选出可降解果胶的细菌。观察筛选菌株的菌落的______（回答两点）等特征进行物种鉴定由于野生细菌自身产酶能力有限，可通过______（回答两点）等育种方式，得到酶活力较高的优良菌株。
（2）将含有高产果胶酶的分解菌培养液进行适度离心后，______即为产果胶酶菌株发酵产生的粗酶液。经初步纯化后，可通过凝胶色谱法进一步去除杂蛋白，在层析柱中相对分子质量较大的蛋白质移动速度______（填“较快”或“较慢”）。
（3）将纯化后的果胶酶固定化，用于果汁工业生产，与游离酶相比，具有的优点是______（回答两点）。

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7．生活饮用水已经过沉淀、过滤、加氯消毒等处理，含微生物很少，但当其水源水不洁或处理达不到要求时，仍然会含相当量的微生物甚至含有致病性微生物。供水管道破损及二次供水等环节也可能导致生活饮用水的污染。因此生活饮用水的微生物安全性日常检测是很重要的。我国生活饮用水水质标准（GB5749-85）中规定生活饮用水中细菌总数不得大于100个/mL，总大肠菌群不得大于3个/L。
（1）检验大肠杆菌的含量时，通常将水样进行一系列的梯度稀释，然后将不同稀释度的水样用涂布器分别涂布到琼脂固体培养基的表面进行培养，记录菌落数量，这种方法称为______。
（2）用该方法统计样本菌落数时是否需要设置对照组？______。为什么？______。
（3）如分别取0.1 mL已稀释10²倍的水样分别涂布到四个琼脂固体培养基的表面进行培养，培养基记录到大肠杆菌的菌落数分别为161、155、158、170，则每升原水样中大肠杆菌数为______。
（4）纯化大肠杆菌时使用的培养基一般用______法灭菌，______（可/不可）用加入抗生素的方法防止杂菌感染。
（5）如果要用滤膜法测定大肠杆菌的数目，将已知体积的水过滤后，将滤膜放在______培养基上培养。在该培养基上，大肠杆菌的菌落呈现______色，可以根据菌落数目，计算出水样中大肠杆菌的数量。

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8．常见的酿酒酵母只能利用葡萄糖而不能利用木糖来进行酒精发酵，而自然界中某些酵母菌能利用酶A分解木糖产生酒精。回答下列问题：
（1）在制备含琼脂的培养基和倒平板的过程中，下列选项需要的是______（填序号）。
①酒精灯　②接种环　③高压蒸汽灭菌锅　④培养皿
（2）将自然界收集的酵母菌菌株转接到仅以______为碳源的培养基中，在______（填“有氧”或“无氧”）条件下培养一周后，有些酵母菌死亡，说明这些酵母菌不能利用木糖发酵。
（3）测定微生物数量常用的方法有活菌计数法和______，前者的统计结果一般用______而不是用活菌数来表示。
（4）纯化后的酶A可以用电泳法检测其分子量大小。在相同条件下，带电荷相同的蛋白质电泳速度越快，说明______。
（5）生产上常将酶A固定化以反复利用。部分操作如下：将酶A固定在______（填“溶于水”或“不溶于水”）的载体上，将其装入反应柱内后，需用蒸馏水充分洗涤固定化酶柱，以除去未吸附的酶A．一般来说，酶不适合采用______法固定化。

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9．分离筛选降解纤维素能力强的微生物，对于解决秸秆等废弃物资源的再利用和环境污染问题具有重要意义。研究人员用纤维素、硝酸盐、磷酸盐、硫酸盐、KCl、酵母膏以及水解酪素配制的培养基，成功筛选出能产生纤维素酶的微生物。回答下列问题：
（1）有些微生物能降解纤维素，有些微生物则不能，原因是前者能产生______，一般认为它至少包括三种组分，即______。
（2）配制培养基时，按照培养基配方准确称量各组分，将其溶解、定容后，调节培养基的______，及时对培养基进行分装，并进行______灭菌法灭菌。
（3）用来筛选降解纤维素的微生物的培养基含有硝酸盐、磷酸盐、硫酸盐、其作用是______、______。（答出两点即可）
（4）为在培养基表面形成单个菌落，若用稀释涂布平板法进行接种，在涂布平板时，滴加到培养基表面的菌悬液量不宜过多，原因是______。若用平板划线法进行接种，在第二次以及其后的划线操作时，需要从上一次划线的末端开始划线，原因是______。

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10．某种产脂肪酶菌常被用作饲料添加剂，如表是从土壤中初筛该菌的培养基配方，请回答下列问题：

（NH₄）₂SO₄ NaCl MgSO₄•7H₂O K₂HPO₄ 1%橄榄油蒸馏水 pH

0.1g 0.05g 0.01g 10g 4ml 定容至100ml 7.0g

（1）在上述培养基中，榄油能为产脂肪酶菌提供______。为增大产脂肪酶菌的浓度，需用该培养基进行富集培养，富集培养基宜选用液体培养基的原因是______。
（2）用涂布平板法分离产脂肪酶菌时，在上述培养基的基础上，还应加入______和溴甲酚紫（碱性条件下呈紫色，在酸性条件下为黄色）。在平板上产脂肪酶菌菌落的周围会出现黄色圈，原理是______。筛选时常选择菌落大黄色圈直径大的菌落，这说明此菌落______。
（3）菌落是指由一个细胞繁殖而来的肉眼可见的子细胞群体。在平板上，有的菌落较小，呈乳白色，表面光滑，无丝状物，这些菌落可能为______（填“细菌”或“霉菌”）。有的菌落连成一片，形成原因最可能是______。
（4）研究发现在饲料中添加产脂肪酶菌剂后，动物的体重明显增加，这说明______。

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（NH₄）₂SO₄	NaCl	MgSO₄•7H₂O	K₂HPO₄	1%橄榄油	蒸馏水	pH
0.1g	0.05g	0.01g	10g	4ml	定容至100ml	7.0g