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            • 1． 炭疽杆菌能使人畜患炭疽病，主要引起皮肤炭疽和肺炭疽等．对炭疽病疑似患者，可通过甲图所示鉴定炭疽杆菌的实验进行确诊，其中实验组中的噬菌体能特异性地侵染炭疽杆菌．

              （1）炭疽杆菌在细胞结构上 ______ （“有”或“无”）成形细胞核，根据炭疽病的发病部位，你猜测炭疽杆菌的代谢方式应为 ______ ．
              （2）若要从炭疽病疑似患者体内分离出炭疽杆菌，可将患者皮肤脓胞渗出物接种于特定的固体培养基表面，如乙图所示．图中A和D所示的接种方法分别叫： ______ 和 ______ ．
              （3）甲图中制备的液体培养基时需采取 ______ 法灭菌．甲乙两图中的各组培养基中都必须含有的营养成分有水、无机盐、 ______ ．接种可疑菌后，需将三角瓶置于35℃下的摇床上振荡培养24小时，可疑菌会大量繁殖，液体培养基变浑浊．
              （4）甲图中，对照组与实验组试管同时培养6小时后，若实验组液体培养基的浑浊度比对照组 ______ （高/低），则可明确疑似患者被炭疽杆菌感染；反之则排除．此判断的依据是 ______ ．
              难度：较易
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            • 2． 如表为两种微生物的培养基配方：
              A组
              KH2PO4 Na2HPO4 MgSO4•7H2O 葡萄糖 尿素 琼脂
              1.4g 2.1g 0.2g 10.0g 1.0g 15.0g
              B组
              纤维素粉 NaNO3 Na2HPO4•7H2O KH2PO4 MgSO4•7H2O KCl 酵母膏 水解
              酪素
              5g 1g 1.2g 0.9g 0.5g 0.5g 0.5g 0.5g
              注：上述两种培养基中的物质溶解后，均用蒸馏水定容至1 000mL．
              （1）从功能上来看，上述两种培养基均属于 ______ 培养基．
              （2）如果要对土壤中分解尿素的细菌进行分离，则需要选择 ______ 培养基（填“A”或“B”），该培养基中的碳源是 ______ ．另一组培养基能够分离何种微生物 ______ ．
              （3）在分离尿素分解菌所用的培养基中可加入 ______ 指示剂，若有分解尿素的细菌，培养基将会呈现 ______ ．鉴定某种微生物能够分解纤维素，用 ______ 法．
              难度：较易
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            • 3． 如图甲、乙是微生物接种常用的两种方法，请回答相关问题．

              （1）图甲是利用 ______ 法进行微生物接种，图乙是利用 ______ 法进行微生物接种．这两种方法所用的接种工具分别是 ______ 和 ______ ；对这两种接种工具进行灭菌和消毒的方法依次是 ______ 和酒精消毒．
              （2）接种操作为什么一定要在火焰附近进行？ ______ ．
              （3）接种后，在固体培养基上培养细菌时为什么进行倒置培养？ ______ ．
              难度：较易
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            • 4． 为了调查赣江的水质状况，某研究小组测定了该河流水样中的细菌含量，并进行了细菌的分离等工作．回答下列问题：
              （1）制备实验所需的培养基时，在各成分都溶化后和分装前，要进行的是 ______ 和灭菌，对培养基进行灭菌的常用方法是 ______ ．倒平板时要待平板冷凝后，将平板倒置，其主要原因是 ______
              （2）该小组可采用上图②所示的 ______ （方法）检测水样中的细菌含量．在接种前，随机取若干灭菌后的空平板先行培养了一段时间，这样做的目的是 ______ ；然后，将1mL水样稀释100倍，在3个平板上用涂布法分别接入0.1mL稀释液；经适当培养后，3个平板上的菌落数分别为39、38和37．据此可得出每升水样中的活菌数为 ______ ．
              （3）该小组采用平板划线法分离水样中的细菌．操作时，接种环通过灼烧灭菌，在第二次及以后划线时，总是从上一次的末端开始划线．这样做的目的是 ______ ．
              （4）在纯化过程中，在固体培养基上划线分离过程中，正确的操作是 ______
              A．每次划线时，接种环都需要蘸菌液一次
              B．划线分离时，需要把接种环深入到培养基中进行接种
              C．划线时要将最后一区的划线与第一区的划线相连
              D．在超净平台中进行接种时，不能关闭过滤风．
              难度：较易
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            • 5． 为获得果胶酶高产菌株，科研人员进行了下列分离、筛选、鉴定工作．
              （1）为分离果胶酶产生菌，科研人员配制了下表所示成分的培养基，该表空白处的两种成分是 ______ ．制备的培养基常用 ______ 法进行灭菌．
              K2HPO4 MgSO4 NaNO3 FeSO4 琼脂
              0.1g 0.5g 3g 0.01g 2g 15g 加至1L
              （2）科研人员将采集的果园土壤放入无菌水中，震荡混匀，制成悬液．为获得较均匀分布的单菌落，还需要将悬液进行 ______ ，用 ______ 法接种于固体培养基上．接种后的培养基 ______ 状态放入培养箱．
              （3）选择单菌落数目适宜的培养基，加入一定浓度的刚果红溶液（果胶与刚果红结合后显红色），一段时间后洗去培养基表面的刚果红溶液，观察并比较菌落和 ______ 直径的比值，筛选果胶酶高产菌株．
              （4）将获得的菌株进行液体培养后，从培养液的 ______ （填“上清液”或“沉淀物”）获得粗提的果胶酶．将一定量的粗提果胶酶与适量果胶溶液混合，一定时间后测定吸光值来测定酶活性．进行吸光值测定时，需将 ______ 与等量果胶溶液混合，作为实验的对照．
              难度：中等
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            • 6．
              细菌在自然界中数量多少是环境污染程度的重要指标之一．某校生物兴趣小组为了调查当地一条河流中细菌的污染情况而进行了实验．请回答与此实验相关的问题：
              （1）牛肉膏蛋白胨培养基是常用的细菌基础培养基，该小组同学打算配制固态培养，在配制时需添加 ______ 作凝固剂．培养基中含有的蛋白胨、淀粉分别为细菌培养提供了 ______ 和 ______ ．除此之外，培养基还必须含有的基本成分是 ______ 和 ______ ．
              （2）下列材料或用具中，需要灭菌的是 ______ ；需要消毒的是 ______ ．（填序号）
              ①培养皿      ②玻璃棒、试管、锥形瓶       ③实验者的双手
              （3）实验室最常用的灭菌方法是利用高温处理达到灭菌效果．高温灭菌可分为 ______ 和 ______ 两大类，其中 ______ 灭菌效果好．
              （4）若要统计每毫升河水样品中活菌数目，可以根据河水样品的稀释倍数和接种稀释液的体积，统计平板上的 ______ 就能大约推测出样品中活菌数．
              难度：较易
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            • 7．
              生活饮用水巳经过沉淀、过滤、加氯消毒等处理，含微生物很少，但当其水源水不洁或处理达不到要求时，仍然会含相当量的微生物甚至含有致病性微生物．供水管道破损及二次供水等环节也可能导致生活饮用水的污染．因此生活饮用水的微生物安全性日常检测是很重要的．我国生活饮用水水质标准（GB5749-85）中规定生活饮用水中细菌总数不得大于100个/mL，总大肠菌群不得大于3个/L．
              （1）检验大肠杆菌的含量时，通常将水样进行一系列的梯度稀释，然后将不同稀释度的水样用涂布器分别涂布到琼脂固体培养基的表面进行培养，记录菌落数量，这种方法称为 ______ ．
              （2）用该方法统计样本菌落数时是否需要设置对照组？为什么？ ______
              （3）如分别取0.1mL已稀释103倍的水样分别涂布到四个琼脂固体培养基的表面进行培养，培养基记录到大肠杆菌的菌落数分别为161、155、158、170，则每升原水样中大肠杆菌数为 ______ ．
              （4）纯化大肠杆菌时使用的培养基一般用 ______ 法灭菌， ______ （可/不可）用加入抗生素的方法防止杂菌感染．
              （5）如果要测定水中的病毒种类，可以用 ______ 技术使其遗传物质扩增，然后用 ______ 技术进行鉴定．
              难度：中等
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            • 8． （1）在农业生产中发现一种广泛使用的除草剂（含氮有机化合物）在土壤中不易降解，长期使用可污染土壤．为修复被该除草剂污染的土壤，需要选育能高效降解该除草剂的细菌．
              请完成下列选育的实验方案：
              步骤一：菌种浸出液的制备：
              从 ______ 中获取一定量的样本，然后置于无菌水中，震荡一定时间，备用．
              步骤二：配置菌种选育培养基并灭菌：
              所配制的培养基的特点是 ______  和 ______ ．
              步骤三：
              ①划线接种
              ② ______ ．
              ③ ______ ．
              （2）某同学在纯化菌株时，划线接种后一段时间后，平板的第一划线区域长满致密的菌苔，第二划线区域无菌落，造成划线无菌落可能的操作失误是 ______ ．
              难度：较易
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            • 9． （1）为了检测大肠杆菌对抗生素的敏感性，在37℃培养箱中培养24h，使其均匀生长，布满平板．将分别含有A，B，C三种抗生素的滤纸片均匀置于该平板上的不同位置，培养一段时间后，结果见图根据上述实验结果，为达到抗菌目的，最好选择的抗生素是 ______ ．
              （2）治疗肺结核的常用抗生素是利福平，写出其抑菌机理： ______ ．
              难度：较易
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            • 10． （1）利用 ______ 法进行微生物接种，把聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面．在进行细菌纯化培养过程中，经过培养之后，可以观察到在 ______ （填图1中编号）区域出现单个菌落，产生该菌落的最初细菌数目有 ______ 个细菌．将乳酸菌接种到彻底灭菌的固体培养基上，要使其正常生长必须给予的条件是 ______ ．

              （2）该接种法使用的工具是（图2） ______ ．
              （3）该工具最合适的灭菌方法是 ______ ．
              A．火焰灼烧   B．高温高压灭菌   C．酒精擦拭    D．紫外线照射．
              难度：较易
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