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            • 1.

              下表是某公司研发的一种培养大肠杆菌菌群的培养基配方,请根据表格和所学知识回答下列相关问题。

              成分

              蛋白胨

              乳糖

              蔗糖

              K2HPO4

              指示剂

              琼脂

              含量(g)

              10.0

              5.0

              5.0

              2.0

              0.2

              12.0

              将上述物质溶解后,用蒸馏水定容到1 000 mL

              (1)从生态系统的成分上看,大肠杆菌属于____________。

              (2)若根据用途划分,该培养基属于________(填“选择”或“鉴别”)培养基。若要用上述培养基来筛选出土壤中的尿素分解菌,培养基的营养成分必需怎样更改?_____________。

              (3)在微生物培养的过程中,为防止杂菌污染,需要对培养基进行________。

              (4)图1和图2是培养某细菌的结果图,其对应的接种方法分别是:________和_________,




              (5)以下过程中所利用的主要微生物的细胞结构与大肠杆菌较相似的有________。

              A.制作果酒  B.由果酒制作果醋    C.制作泡菜     D.制作腐乳

            • 2.

              (I)大肠杆菌是与我们日常生活联系非常密切的细菌,请回答有关检测饮用水中大肠杆菌的问题:

              (1)检测饮用水中大肠杆菌的含量时,通常将样品进行一系列的梯度稀释,将不同稀释度的水样用涂布器分别涂布到琼脂固体培养基的表面进行培养,然后记录菌落数量,这种方法称为_____________。判断下面所示的4个菌落分布图中,不可能是用该方法得到的是__________________。


              (2)用上述方法统计样本中菌落数时是否需要设置对照组?__________(填“需要”或“不需要”),其原因是需要判断培养基___________,对于固体培养基应采用的检测方法是将________________的培养基在适宜的温度下放置一段时间,观察培养基上是否有菌落产生。

              (3)在微生物培养操作过程中,为防止杂菌污染,需对培养基和培养器皿进行________(填“消毒”或“灭菌”)处理;操作者的双手需要进行清洗和________________;静止空气中的细菌可用紫外线杀灭,其原因是紫外线能使其内蛋白质变性,还能损伤它的____________的结构。

              (4)检测大肠杆菌实验结束后,使用过的培养基及其培养物必须经过________________处理才能丢弃,以防止培养物的扩散。

              35.(II)   根据基因工程的有关知识,回答下列问题:

              (1)限制性核酸内切酶切割DNA分子后产生的片段,其末端类型有________和________。

              (2)质粒载体用EcoRⅠ切割后产生的片段如下:

              AATTC……G

              G……CTTAA

              为使载体与目的基因相连,含有目的基因的DNA除可用EcoRⅠ切割外,还可用另一种限制性核酸内切酶切割,该酶必须具有的特点是________。

              (3)反转录作用的模板是____________,产物是__________。若要在体外获得大量反转录产物,常采用________技术。

              (4)基因工程中除质粒外,________和______也可作为载体。

              (5)若用重组质粒转化大肠杆菌,一般情况下,不能直接用未处理的大肠杆菌作为受体细胞,原因是_________________________。

            • 3.

              某化工厂的污水池中含有一种有害的难以降解的有机化合物 A 。研究人员用化合物 A 、磷酸盐、镁盐以及微量元素配制的培养基,成功筛选到能高效降解化合物 A 的细菌(目的菌)。实验的主要步骤如下图所示。请分析回答下列问题。



              (1)培养基中加入化合物 A 的目的是             ,这种培养基属于       培养基。 

              (2)“目的菌”生长所需的氮源和碳源是来自培养基中的           。实验需要振荡培养,由此推测“目的菌”的代谢类型是               

              (3)在上述实验操作过程中,获得纯净“目的菌”的关键是                 。 

              (4)转为固体培养基时,常采用平板划线的方法进行接种,此过程中所用的接种工具是__________,操作时采用       灭菌的方法。 

              (5)某同学计划统计污水池中 “ 目的菌 ” 的活菌总数,应用             方法统计,他选用 10-4 、 10-5 、 10-6 稀释液进行平板划线,每种稀释液都设置了 3 个培养皿。从设计实验的角度看,还应设置的一组对照实验是                ,此对照实验的目的是                              

            • 4.

              有些细菌可分解原油,从而消除由原油泄漏造成的土壤污染。某同学欲从受原油污染的土壤中筛选出能高效降解原油的菌株。回答问题:

              (1)在筛选过程中,应将土壤样品稀释液接种于以________________为唯一碳源的固体培养基土,从功能上讲,该培养基属于___________培养基。

              (2)纯化菌种时,为了得到单菌落,常采用的接种方法有两种,即_________和________。

              (3)为了筛选出高效菌株,可比较单菌落周围分解圈的大小,分解圈说明该菌株的降解能力___________。

              (4)通常情况下,在微生物培养过程中实验室常用的灭菌方法有灼烧灭菌、____________和_________。无菌技术要求试验操作应在酒精灯______________附近进行,以避免周围环境中微生物的污染。

            • 5.

              皮肤作为人体最大的器官,拥有达1.8m2的表面积,其主要功能是作为物理屏障,保护机体免受外来生物或有毒物质的侵害。同时,皮肤也是人体与外界环境接触的部位,因此常驻有各类微生物,包括细菌、真菌和病毒等。通过微生物培养技术能了解我们皮肤表面的微生物分布情况。回答下列问题:

              (1)微生物生长繁殖所需要的营养物质有碳源、水、_________、_________四大类。由于不同种类微生物的菌落特征表现不同,因此可以利用_________(填“固体”或“液体”)培养基来培养,通过观察菌落特征对微生物进行初步的鉴定和分类。

              (2)有同学通过制备牛肉膏蛋白胨固体培养基来培养附着在皮肤表面的细菌。制备该培养基的操作步骤是:计算→称量→溶化→灭菌→倒平板。在溶化之后、灭菌之前需要调节______;灭菌后,待培养基冷却至______℃左右时,在酒精灯火焰旁倒平板;待平板冷却凝固后,需要将平板____________。

              (3)利用平板划线法分离纯化某细菌的操作中,使用________法对接种环进行灭菌。第二次及其后的划线都要从上一次划线的末端开始,目的是____________。

            • 6.

              (1)微生物的消毒和灭菌:在微生物培养中,对培养基常用              法进行灭菌;如果要检测培养基灭菌是否彻底,可以采用的方法是                       观察培养基上是否有菌落产生。

              (2)微生物的应用:在葡萄酒的自然发酵过程中,运用吸附在葡萄皮上的野生酵母菌发酵产生酒精,请写出该过程的化学反应式:                    。在果醋制作时,运用醋酸菌在         和糖源充足时,将葡萄糖分解成醋酸。

              (3)微生物的接种:微生物的接种方法很多,最常见的是                      

            • 7. 在农业用地中发现一种广泛使用的除草剂(含氮有机化合物 )在土壤中不易降解,长期使用可污染土壤。为修复被该除草剂污染的土壤,可按下面程序选育能降解该除草剂的细菌(已知该除草剂在水中溶解度一定,该除草剂的培养基不透明)。



              (1)在固体培养基上形成的菌落中,无透明带菌落利用的氮源主要是________,有透明带菌落利用的氮源主要是________,据此可筛选出目的菌。

              (2)若要统计某土壤样品中该活菌数目,宜采用__________________法。一同学在稀释倍数为105的培养基中测得平板上菌落数的平均值为234,那么每毫升样品中的菌落数是__________个(涂布平板时所用稀释液的体积为0.1mL)。用这种方法测定的大肠杆菌菌落数比实际活菌数量_________,因为_                 _。

              (3)要鉴定分离得到的微生物,常需要借助生物化学的方法.如在以尿素为唯一碳源的培养基中加入______ ,可用来鉴定分解尿素的细菌;在以纤维素为唯一碳源的培养基中加入______ ,可用来鉴定纤维素分解菌.如果观察到产生______ 的菌落,说明可能获得了纤维素分解菌.为了确定是纤维素分解菌,还需要进行_____ 的实验.

            • 8.

              急性肠胃炎、手足口病分别是由细菌、病毒通过消化道进入人体导致的。因此检验饮用水的细菌含量和病毒含量是有效监控疾病发生的必要措施,请回答下列与检验饮用水有关的问题:

              (1)检验大肠杆菌的含量时,通常将水样进行一系列的梯度稀释,然后将不同稀释度的水样用涂布器分别涂布到琼脂固体培养基的表面进行培养,记录菌落数量,这种方法称为 。下面四种菌落分布图中,不可能是由该方法得到的是            

              (2)用该方法统计样本菌落数时是否需要设置对照组? 。为什么?

              (3)如果各取0.1 mL已稀释103倍的水样分别涂布到3个琼脂固体培养基的表面进行培养,培养基记录到大肠杆菌的菌落数分别为55、56、57,则每升原水样中大肠杆菌数为

              (4)已知大肠杆菌能发酵乳糖并产酸产气,现提供足量的已灭菌的乳糖蛋白胨培养液和具塞试管,应如何判断待检水样中是否含有大肠杆菌? 

            • 9. (2016春•遵义期中)某化工厂的污水池中,含有一种有害的、难于降解的有机化合物A.研究人员用化合物A、磷酸盐、镁盐以及微量元素配制的培养基,成功地筛选到能高效降解化合物A的细菌(目的菌).实验的主要步骤如图所示.请分析回答问题.
              (1)接种前需要对培养基及培养皿等进行灭菌,常用的灭菌方法是    .培养基中加入化合物A的目的是筛选    
              (2)实验需要振荡培养,由此推测“目的菌”的代谢类型是    
              (3)培养若干天后,应选择培养瓶中化合物A含量    的培养液,接入新的培养液中连续培养,使“目的菌”的数量    
              (4)转为固体培养时,为获得单菌落进行继续筛选,常采用平板划线法或    法,接种后,应将培养皿    (填“正放”或“倒置”).
              (5)实验结束时,使用过的培养基应该进行    处理后,才能倒掉.
            • 10. 细菌对各种抗生素的药敏程度实验方法如下:在固体培养基中培养着状况相同的某种细菌,将含有一定浓度不同抗生素的滤纸片放置在不同固体培养基的表面,抗生素向周围扩散,如果抑制生长,则在滤纸片周围出现抑菌圈(图中里面的圈),结果如图所示.

              (1)衡量本实验结果的指标是    
              (2)上述图中最有效的是    培养皿中的抗生素.
              (3)用上述最有效的抗生素对细菌进行处理,并测定细菌数量变化,如图所示:
              ①向培养基中加抗生素的时刻为    点.
              ②细菌种群进化是定向的,而变异是    ,细菌的抗药性产生于环境变化之    (填“前”“中”或“后”),抗生素对细菌变异的作用不是“诱导”,而是    
              ③尽管有抗药性基因存在,但使用抗生素仍然能治疗由细菌引起的感染,原因在于细菌种群中    
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