石油是人类重要的化工原料之一，其在给人类生产生活带来便利的同时也对陆地和海洋造成污染，下图是科研工作者分离能分解石油污染物的假单孢杆菌的过程。请根据流程图回答下列问题：

土壤取样→A→梯度稀释→涂布到培养基上→筛选目的菌株（假单孢杆菌）

（1）A过程为___________，目的是增加假单孢杆菌的浓度，该培养基中应当以___________为唯一碳源。该实验过程中需要设置完全培养液对照组，将菌液稀释相同的倍数，对照组培养基上生长的菌落数目应明显___________（填“多于”或“少于”）选择培养基上的菌落数目，从而说明选择培养基具有筛选作用。

（2）实验中需要用___________对菌液进行一系列的梯度稀释，然后将不同浓度的菌液分别滴加到固体培养基的表面，用___________（器具）涂布均匀并进行培养，以便获得单个菌落。

（3）若实验中用10³倍的0.1mL的稀释液分别涂布三个平板，培养后分别形成了98、100和102个菌落，则每毫升原样液中含有假单胞杆菌___________个，实际值一般要比该测量值偏大的原因是___________。

下列是与微生物培养有关的问题，请回答：

⑴某细菌固体培养基的组成成分是、、、葡萄糖、尿素、琼脂和蒸馏水，其中碳源是＿＿＿＿＿，氮源是＿＿＿＿＿。已知只有能合成脲酶的细菌才能在该培养基上生长，该培养基属于＿＿＿＿＿培养基。按照化学成分分类，该培养基属于＿＿＿＿＿培养基。从同化作用类型看，用该培养的细菌属于＿＿＿＿＿。

（1）按细胞结构分类，金黄色葡萄球菌属于______生物，从培养过程分析，金黄色葡萄球菌可进行_______呼吸。

（2）7.5％NaCl肉汤培养基可为微生物提供的营养成分包括________________，用7.5％NaCl肉汤培养基进行选择培养的主要目的是______________________。

（3）操作中在血平板上的接种方法是____________，接种操作前后需要对接种工具进行___________灭菌。

（4）在制备血平板时需将pH调节至________（“微酸性”或“微碱性”）后灭菌，待培养基冷却后，再加入适量血液。经多次规范操作、重复实验，血平板上均出现_____________________的菌落，初步证明鲜牛奶中存在金黄色葡萄球菌，但鲜牛奶供应商仍认为此菌并非鲜牛奶所携带，因此要对本操作进行完善，完善的方案是_______________________________。

土壤中含有大量的难溶性磷酸盐，为了从土壤中筛选出能够将难溶性磷酸盐转化为植物能吸收的可溶性磷的优良解磷菌株，以便将其添加到有机肥中，改善植物磷元素供应。科研人员进行如下实验：

                               图1                                                               图2

实验原理：固体培养基中难溶性磷酸盐在微生物的作用下溶解，会在菌落周围形成透明圈(如图)，透明圈直径(D)与菌落直径(d)的比值(D/d)代表微生物溶解磷的能力大小。实验步骤：

    步骤1　取某地区土样5 g制得土壤溶液后稀释，取稀释液1 mL接种到基础培养基A上，在适宜温度下培养72 h。                  

    步骤2　在基础培养基A上用接种环挑取代表性菌落再次接种，培养3～4 d后观察菌落特征和透明圈的大小。

(1)从物理形态看，培养基A属于________培养基。培养基中磷源应该是_____________。

(2)步骤1中接种方法是________，步骤2中接种环的灭菌方法是________。

(3)根据实验结果可以确定溶解磷能力最强的菌株是________。

(4)为进一步测定初步筛选的三种菌株实际溶解磷的能力，研究人员将它们接种到基础培养基B中，并在37 ℃、200 r·min－1摇床培养，定期取上清液，测定溶液中可溶性磷含量，得到图2所示曲线。

①用摇床进行培养的好处是____________________、___________________。

②结果表明最优良的解磷菌株是________________________________________。

牛奶富含蛋白质长期饮用有助于增强体质，但牛奶同时也是多种疾病的传播载体。国家标准是每毫升牛奶中细菌数小于30000个。以下是牛奶消毒及细菌检测实验。

（1）图中步骤①称为_______消毒法。步骤②是_______________。

（2）培养基中的蛋白胨可以为微生物提供_________________。进行步骤③操作时，应选用下列中的哪种工具？______。为了避免杂菌污染，此步骤应在____________附近进行。

（5）某同学尝试自己利用图2装置制果醋，制作过程中进气口应_____________，排气口要通过一个长而弯曲的胶管与瓶身相连，这样做的原因是_________________________________________。

某生物兴趣小组通过测定土壤中的微生物的种类、含量等来了解其土质情况，并做了相关微生物的分离工作。回答相关问题。

⑴获得纯净培养物的关键是___________________________，这是研究和应用微生物的前提。

⑵从土壤中分离纤维素分解菌时，常从公园里、街道旁、花盆中的土壤或是农田、菜园土选取土壤时，原因是___________________________。

⑶该小组对某种菌进行扩大培养时等分为两组，A组静置培养，B组振荡培养。结果发现B组比A组的细菌要多得多，原因是_______________________________（答两点）。

⑷小组进一步发现，该土壤中只有一种真菌，欲使其从土壤中与其它细菌分离开，可在牛肉膏-蛋白胨培养液中加入___________。分离纯化后提取DNA测序发现含有产脲酶的基

因序列，请设计实验证明该种真菌可合成脲酶（简要说明实验步骤，结果，结论。相关试剂、仪器、菌种等都可提供）____________________

苯酚及其衍生物广泛存在于工业废水中，对环境有严重危害。某同学准备依据如图操作步骤，从处理废水的活性污泥中分离筛选苯酚降解高效菌株。请回答下列问题：

（1）苯酚降解菌富集培养基含有蛋白胨、K₂HPO₄、MgSO₄、苯酚和水，其中可作为碳源的有___________。

（2）将采集到的样品接种培养，苯酚用量应随转接次数增加而逐渐_______，以达到富集酚降解菌的目的。若上图平板中菌落过于密集，应进一步__________，以便于菌落计数与分离。制备平板培养基时除了需要水、营养物质外，还必须添加_________。

（3）下图为连续划线法示意图，在图中________（填图中序号）区域更易获得单菌落。

（4）采用比色测定法（使用苯酚显色剂）检测降解后的废水中苯酚残留量。先制作系列浓度梯度并进行显色反应，下表中1～5号比色管的苯酚浓度应分别为______。

如果废水为50 mg/L苯酚溶液，降解后约有21%的苯酚残留，则需将残留液稀释_____（填序号：①5　②10　③20）倍后，再进行比色。

如下表所示为某微生物培养基的配方，请回答：

(1)依物理性质，该培养基属于__________培养基。依用途划分，则属于_________培养基。

(2)根据培养基原料，所培养微生物的同化作用类型是______________，培养的微生物可能是_______________。

(3)该培养基中的碳源是_____________。不论何种培养基，在各成分都溶化后分装前，要进行灭菌。

(4)若用该培养基培养尿素分解菌,应除去的物质是________________,加入的物质是_____________。

(5)为检测尿素分解菌的存在与否,还应加入________________,将呈___________反应。

请回答下列与微生物培养相关的问题：

（1）土壤中具有分解尿素的细菌，此类细菌能产生________酶，该酶能将尿素分解成____________。

（2）某同学要分离土壤中能分解尿素的细菌，并统计每克土壤样品中活菌数目，培养基配方如下。将各种物质溶解后，用蒸馏水定容到1000ml，再经高温灭菌，制成固体培养基备用。

根据培养基的成分判断，该同学能否分离出土壤中能分解尿素的细菌？__________（填“能”或“不能”），原因是__________________。

（3）某小组采用平板划线法分离某样品的细菌时，在第二次及以后的划线时，总是从上一次划线的末端开始划线，这样做的目的是_______________________________。使用稀释涂布平板法检测土样中细菌含量时，在接种前，随机取若干灭菌后的空白平板培养基先行培养一段时间，这样做的目的是_________________。

（4）在分离尿素分解菌的实验中，大部分同学从培养基上筛选出大约50个菌落，而有一个同学从培养基上筛选出大约150个菌落，这种实验结果差异产生的原因可能是________________、_______________。