8．
丹参酮是从中药丹参中提取的具有抗肿瘤活性的脂溶性菲醌化合物，其作用机制之一是诱导细胞凋亡．以下是相关的实验研究过程及结果：
实验材料：人肝癌细胞（HepG2），培养液，W溶液（作为溶剂），用W溶液溶解的0.5ug/mL、1ug/mL、1.5ug/mL的丹参酮溶液，培养瓶等．
步骤如下：
①将等量的人肝癌细胞（HepG2）悬液，分别接种于若干含有等量培养液的培养瓶中；将培养瓶放于适宜条件下培养24h，静置、去掉上清液；
②_ _ _，再加入等量的培养液，于相同且适宜的条件下继续培养；
③培养72h，每24h 用细胞计数仪检测癌细胞数．
请完善上述实验步骤中相关内容：
（1）本实验的自变量是
．实验验中，每组细胞培养瓶不止一个，统计后
，目的是减小误差．
（2）设对照组癌细胞增殖率为 100%，用下面公式计算各给药组癌细胞增殖率：
增殖率（% ）=[（给药组各时段癌细胞数-给药组开始癌细胞数）：（对照组各时段癌细胞数-对照组开始癌细胞数）]×100．得到如表数据：
表1 丹参酮 对HepG2细胞增殖率的影响%
组别
| 培养时间/h |
| 24 | 48 | 72 |
| 对照组 | 100 | 100 | 100 |
| 100给药组ug/mL | 0.5
1.0
1.5 | 78
68
48 | 62
26
12 | 48
21
5 |
通过数据分析可以得出丹参酮对HepG2细胞的作用效果的特点是：
和
（3）将培养48h的培养液离心，去除上清液后经过一系列的处理及分析，得到对照组和给药组48h细胞周期变化、凋亡率及凋亡蛋白Bax和Bcl-2的表达量如表所示：
| 组别 | G1 | S | G2+M | 凋亡率 | bax | Bcl-2 |
| 对照组 | 55% | 36% | 9% | 5.6% | 28% | 53% |
| 实验组 | 67% | 24% | 9% | 32.6% | 37% | 38% |
据此推测，丹参酮使HepG2细胞周期阻滞于
期．丹参酮可能通过促进HepG2内
的表达来诱导细胞凋亡从而抑制肿瘤的生长．
（4）顺铂（DDP）是一种DNA损伤药物，也是目前临床上多种癌症化疗的首选药物．若要探究丹参酮联合顺铂对HepG2细胞生长的影响，应还需设置
和
给药组才能得出结论．