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            • 1． P53基因是正常细胞内重要的抑癌基因，研究表明P53基因突变可导致肝脏细胞癌变，科学家研究发现P53基因对体外培养的肝癌稀薄啊生长有抑制作用，请回答下列问题：
              （1）切下新鲜的肝癌组织，在37℃下用 ______ 消化30-40分钟，用培养液制成细胞悬液在培养箱中培养，培养液是模拟了人体 ______ 的成分配制的，在培养基中加入一定量的抗生素，其目的是 ______ ．
              （2）获取P53基因的方法通常包括化学方法合成和 ______ ．
              （3）将P53基因经过一系列的处理并与脂质体混合，将混合物滴加至肝癌细胞上，轻轻混匀．最后筛选出含有P53基因的肝癌细胞．脂质体在这个操作中的作用是 ______ ．
              （4）为证明P53基因有抑癌作用，需将两种细胞接如多孔板中，并从次日开始检测每孔的细胞总数，绘制如图所示的两条曲线．若P53基因有抑癌作用，则曲线1是 ______ 细胞，曲线2是 ______ 细胞．
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            • 2． 免疫脂质体是将抗体通过聚合物结合在脂质体（双层磷脂分子构成）上构建而成的，它利用抗体特异性靶向作用，与肿瘤细胞表面的抗原结合，将脂质体包裹的药物送达病灶部位．这为乳腺癌的治疗提供了一种新途径．
              （1）人类表皮生长因子受体-2（HER2）基因在乳腺癌发生早期具有高表达现象，提高了乳腺癌细胞的转移潜能．研究人员将HER2作为 ______ 刺激小鼠产生 ______ 免疫反应，获取免疫细胞后，制备单克隆抗体TMAB，其通过阻断 ______ 在HER2上的附着，产生抗肿瘤的效应．
              （2）阿霉素是一种脂溶性小分子，可通过 ______ 方式进入细胞，抑制细胞增殖，但其毒副作用较大，利用脂质体将其包裹，通过缓释可以降低药物对机体的毒副作用．
              （3）研究者将TMAB与包含阿霉素的脂质体融合，制备出新型的抗乳腺癌药物阿霉素免疫脂质体．为确定其作用效果，测定了不同条件下阿霉素进入细胞的量，实验设计及结果如下．
              组别 阿霉素 阿霉素脂质体 阿霉素免疫脂质体 HER2基因高表达的乳腺癌细胞
              a + - - +
              b - + - +
              c - - + +
              注：+表示添加；-表示不添加

              和阿霉素脂质体相比，阿霉素免疫脂质体的药物入胞量 ______ ．但 ______ 组阿霉素进入细胞的量最高，原因是 ______ ．
              （4）为确认阿霉素免疫脂质体的靶向性，研究者设计以下实验，并测定了各组阿霉素进入细胞的量．实验中利用的a是 ______ 细胞，若 ______ ，说明阿霉素免疫脂质体具有靶向性．
              组别 阿霉素脂质体 阿霉素免疫脂质体 HER2基因高表达的乳腺癌细胞 a细胞
               ① + - + -
               ② - + + -
               ③ + - - +
               ④ - + - +
              注：+表示添加；-表示不添加．
              难度：较易
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            • 3． 自噬是细胞维持稳态的一种重要机制，通过自噬可清除细胞内错误折叠或聚集的蛋白质以及受损或老化的细胞器．如图表示细胞内自噬体的产生以及溶酶体参与自噬的过程．

              （1）当细胞中的线粒体受损后，会形成由 ______ 层膜包裹的自噬体，随后与溶酶体融合，最终被降解．
              （2）为研究自噬在肝癌发展不同时期的作用，科学家进行了如下实验．
              ①实验原理
              二乙基亚硝胺（DEN）作为致癌因子，可诱导细胞的 ______ 发生改变，导致肝细胞癌变；氯喹（CQ）是一种自噬抑制剂．
              ②实验方法、现象及分析
              用DEN诱发大鼠肝癌的同时，分别在肝癌起始期和发展期对大鼠进行CQ处理，并且设置相应的对照组．一段时间后观察各组大鼠肿瘤发生的情况．部分组别的实验结果如表所示．
              起始期 发展期
              DEN+CQ处理组 DEN处理组 DEN+CQ处理组 DEN处理组
              肿瘤发生率（%） 90 30 60 90
              最大肿瘤体积（mm3） 17.1±5.6 3.5±2.5 8.3±6.0 312.0±132.9
              肿瘤数量（个） 2.5±0.6 0.6±0.4 1.6±0.6 3.6±0.7
              上述实验除设置表中已有的单独用DEN处理作为对照组外，还应另外设置对照组．其中一组是相应时间段 ______ 组，另一组是用 ______ 作为对照，表中未列出的这些对照组的肿瘤发生率均为0．由表中结果可知，在DEN 诱发的肝癌的起始期自噬会 ______ 肿瘤的发生，在肝癌的发展期自噬会 ______ 肿瘤的发生．结合图中自噬的过程，推测在肝癌发展期出现上述现象的原因可能是 ______ ．结合此实验，关于自噬对于机体的作用，你的认识是 ______ ．
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            • 4． 人参皂苷Rg3是存在于中药人参中的一种四环三萜皂苷，近年来，对其抗肿瘤作用的研究备受重视．

              （1）肿瘤的体积和重量不断增大的原因是肿瘤细胞因 ______ 发生突变，从而能够 ______ ．
              （2）为研究人参皂苷Rg3对小鼠体内肿瘤细胞凋亡的影响，科研人员取小鼠的Lewis瘤细胞悬液，接种于40只昆明小鼠右前肢腋皮下，每只小鼠接种0.2mL．将接种后的小鼠 ______ 分为4组，自接种后3日起，给予等量的、单位体重不同浓度的Rg3溶液灌胃，10天后取出移植瘤称取瘤重并计算抑瘤率、统计肿瘤细胞凋亡率，实验处理和结果如图．根据实验结果推测，人参皂苷Rg3可以通过 ______ 对小鼠肿瘤的生长起 ______ 作用．
              （3）研究表明，细胞凋亡可能与内质网应激过度引起caspase-12基因表达有关，内质网应激过程中，内质网伴侣蛋白GRP78会显著升高．为研究人参皂苷Rg3是否能诱导小鼠体内肿瘤细胞内质网应激过度，实验组应选择的实验材料和检测指标应该包括 ______ ．（填选项前序号）
              a．昆明小鼠                b．生理盐水            c．人参皂苷Rg3溶液
              d．Lewis瘤细胞            e．caspase-12基因敲除型Lewis瘤细胞
              f．GRP78的相对表达量      g．caspase-12的相对表达量
              （4）人参、西洋参是人参皂苷Rg3的主要来源，但其需要4-15年的生长栽培时间，同时具有独特药理活性的人参皂苷Rg3含量很少．请你为获得大量的人参皂苷Rg3提供一种思路： ______ ．
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            • 5． 我国宫颈癌发病率已高居世界第二位且发病年轻化趋势明显，宫颈癌与HPV（人乳头瘤病毒，一种DNA病毒）的病毒感染密切相关．雷公藤红素是一种具有良好的抗癌效果的新型抗癌药物，水溶性差（必须用DMSO作为溶剂溶解）．
              （1）宫颈癌的早期检查包括宫颈细胞学检查（TCT）和HPV病毒感染检查．TCT检查即在显微镜下观察是否出现角化细胞或凹空细胞，因为癌细胞具有 ______  特点；HPV病毒感染检查即利用核酸分子杂交方法，观察是否 ______ ，确定是否感染HPV病毒；
              （2）为了探究雷公藤红素的抗癌效果，研究人员进行了实验：将人宫颈癌HeLa细胞系接种于动物细胞培养液后置于 ______ 中进行培养，用 ______ 处理，得到细胞悬浮液用于实验．用不同浓度的雷公藤红素处理HeLa细胞，对照组添加等量的 ______ ，其他条件相同且适宜．定期取样并测定细胞数量的相对值，结果如图1所示，由图可知 ______ ．
              （3）研究人员进一步研究雷公藤红素的作用机理，进行了如下实验．
              ①由图2可知，经雷公藤红素处理后，HeLa细胞处于 ______ 期的含量明显增多，说明雷公藤红素的作用可能是 ______ ；

              ②测定HeLa细胞在不同浓度雷公藤红素处理后的凋亡情况，结果如表：
              雷公藤浓度（µM） 0 2.5 5 10
              凋亡率（%） 4.28 7.22 37.3 34.8
              Bax蛋白含量 + ++ ++++ ++++
              Bcl-2蛋白含量 ++++ ++ + +
              由表格数据可知，雷公藤红素可以 ______ 细胞凋亡，这种作用可能是通过 ______ 实现．
              （4）研究还发现经雷公藤红素处理后，癌细胞中产生更多的乳酸，导致对丙酮酸的消耗增加，相应地进入 ______ （细胞结构）的丙酮酸减少．处理后HeLa细胞的相关结构受损，所以 ______ 作用增强，有助于弥补能量供应的不足，进一步验证了上述实验结论．
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            • 6． 人类各种癌症中的关键基因之一是原癌基因．研究发现，蛋白X是细胞膜上的一种受体，由原癌基因X 编码，在一些肿瘤细胞中，原癌基因 X过量表达会持续激活细胞内的信号传导，启动细胞DNA的复制，导致细胞异常增殖．
              （1）同一个体各种体细胞来源于受精卵的分裂与分化．正常情况下，体细胞核遗传信息相同的原因是 ______ ．
              （2）通过检测原癌基因X的 ______ 和 ______ 可判断其是否转录和翻译．检测成人多种正常组织后，发现原癌基因X只在乳腺、呼吸道等上皮细胞中有微弱表达，这说明 ______ ．
              （3）根据以上信息，可推测原癌基因的主要功能是 ______ ．
              （4）苦马豆素（SW）因从灰苦马豆中分离出来而得名，被认为是“未来的肿瘤治疗药物”．以下是相关的实验研究过程及结果．
              a．将等量的小鼠肝癌Hepal-6细胞悬液，分别接种于若干个含有等量培养液的培养瓶中；
              b．将培养瓶放于37℃、5% CO2培养箱中培养24h，静置、去除上清液；
              c．分别加入等量但含不同浓度SW的培养液，于37℃、5% CO2培养箱中继续培养；
              d．分别在24h、48h、72h时吸取培养液，观察结果，得到不同浓度SW对细胞存活率影响曲线如图所示．请回答下列问题：
              步骤c中需要设置对照组，对照组的处理方法应为 ______ ．步骤c中每个实验组设置5个培养瓶同时进行培养，计数后统计平均值，这是为了 ______ ，使实验结果更准确．
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            • 7． 目前临床上治疗癌症的方法，一般是手术切除肿瘤，为防止体内残留癌细胞，在手术后进行化疗．某生物兴趣小组的同学从资料上获知：二氯二乙胺能够阻止参与DNA复制的酶与DNA相互作用．他们推测：二氯二乙胺能抑制癌细胞的增殖，能作为一种癌症的化疗药物．就此问题他们设计实验进行了探究．
              实验材料：肝部长有肿瘤的小鼠，二氯二乙胺溶液，蒸馏水，生理盐水，含有全部营养物质的细胞培养液，显微镜，血球计数板，试管，吸管等．
              （1）其中某位同学的实验操作如下：（请将实验内容补充完整）
              ①取洁净的培养皿一个，加入适量的培养液，从小鼠肝部切取肿瘤组织，剪碎，并用 ______
              ______ 处理，使其分散开来，置于培养皿中培养．
              ②取洁净的试管5支，加入等量的培养液，编号1、2、3、4、5，并在1～4号试管中加入等量的不同浓度的二氯二乙胺溶液，5号试管中加入 ______ ．
              ③从培养皿中吸取等量的培养液置于1-5号试管中，振荡后，在冰箱中培养一段时间．
              ④从静置的5支试管中吸取适量的培养液置于血球计数板内，在显微镜下计数，记录数据．
              （2）请你纠正上面这位同学操作上的错误① ______ ；
              ② ______ ．
              （3）另一位同学按照正确的方法进行实验，得到的结果如下：
               实验组别  1  2  3  4  5
               二氯二乙胺浓度（mg/mL）  0.1  0.2  0.3  0.4  0
               细胞数目（个/mL） 320  275  186  96  560 
              根据实验结果，你能得出的结论是 ______ ．
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            • 8． 蜂毒素是工蜂毒腺分泌的多肽，具有抗菌、抗病毒及抗肿瘤等广泛的生物学效应． 体外研究发现，蜂毒素对多种癌细胞具有强烈的杀伤作用．请回答：
              （1）在工蜂毒腺细胞的核糖体上，蜂毒素是以 ______ 为模板合成的．
              （2）在适宜的条件下进行体外培养，癌细胞能够 ______ ，在此过程中细胞内的DNA含量将持续出现周期性的 变化．图甲表示，癌细胞在一定浓度的蜂毒素培养液 中培养几小时后，DNA含量不同的细胞数．据此推测，蜂毒素能将癌细胞阻断在有丝分裂的 ______ 期．
              （3）研究表明，阻断癌细胞增殖周期可引起细胞凋亡．科研人员为研究蜂毒素对人胃癌细胞的影响及作用机制，进行了以下实验．请完善实验 并回答问题．
              ①方法步骤
              a．取4只相同的培养瓶，编号，分别加入等量的完全培养液并接种等量离体胃癌细胞．
              b．I号培养瓶为空白对照，向2～4号培养瓶中分别加入 ______ μg/mL蜂毒素溶液．
              c．培养48小时后，检测并统计 ______ ，结果如图乙-1所示．
              d．重复a、b步骤，检测凋亡基因（Bax、Bel-2）的表达，结果如图乙-2所示．
              ②分析讨论：
              a．图乙1表明 ______ ．
              b．图乙1、图2表明：从基因水平上看，蜂毒素诱导胃癌细胞凋亡与 ______ 有关．
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            • 9． 蜂毒素是工蜂毒腺分泌的多肽，具有抗菌、抗病毒及抗肿瘤等广泛的生物学效应．体外研究发现，蜂毒素对多种癌细胞具有强烈的杀伤作用．请回答：
              （1）在工蜂毒腺细胞的核糖体上，蜂毒素是以 ______ 为模板合成的．
              （2）在适宜条件下进行体外培养，癌细胞能够 ______ ，在此过程中细胞内的DNA含量将持续出现周期性的变化．图-1表示癌细胞在一定浓度的蜂毒素培养液中培养一定时间后，DNA含量不同的细胞数．据此推测，蜂毒素能将癌细胞阻断在有丝分裂的 ______ 期．当 ______ 突变时，细胞由正常细胞变为癌细胞．

              （3）研究表明，阻断癌细胞增殖周期可引起细胞凋亡．科研人员为研究蜂毒素对人胃癌细胞的影响及作用机制，进行了以下实验．请完善实验并回答问题．
              方法步骤：
              A．取4只相同的培养瓶，编号，分别加入等量的完全培养液并接种等量离体胃癌细胞．
              B．1号培养瓶为空白对照，向2-4号培养瓶中分别加入 2、4、8 μg/mL蜂毒素溶液．
              C．培养48h后，检测并统计 ______ ，结果如图-2所示．
              D．重复A、B步骤，检测凋亡基因（Bax、Bel-2）的表达，结果如图-3所示．
              分析讨论：
              a．图-2表明一定浓度的蜂毒素能诱导胃癌细胞凋亡，并随浓度增大诱导效应 ______ ．
              b．图-2、图-3表明：从基因水平上看，蜂毒素诱导胃癌细胞凋亡与 ______ 有关．当Bel-2蛋白/Bax蛋白的比值出现 ______ 趋势时，将会诱导胃癌细胞凋亡．
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            • 10． 胰腺癌是一种常见的消化道恶性肿瘤，近年来其发病率呈上升趋势，已成为我国常见十大恶性肿瘤之一．
              （1）癌细胞表面 ______ 减少，导致极易在体内扩散．
              （2）葡萄、花生中富含一种化合物白藜芦醇，有人认为白藜芦醇对癌细胞有一定的影响，某科研组欲探究白藜芦醇对胰腺癌的影响，做了如下相关实验．取人胰腺癌细胞接种到多孔细胞培养板，在实验组中加入不同浓度的白藜芦醇，其余处理与对照组相同．培养一段时间后，结果如图1，实验结果表明 ______ ．当白藜芦浓度为 ______ ，处理72小时，约可影响细胞增殖能力的50%．

              （3）在探究白藜芦醇的作用机理时，科研人员对胰腺癌细胞进行超声破碎，提取细胞中蛋白质，通过电泳，将不同质量的蛋白质分离．再鉴定蛋白质种类，可选用 ______ 技术．分离并鉴定结果如图2．EGFR、ERK、AKT在 ______ 合成，并通过 ______ 和 ______ 加工、修饰和运输．
              （4）综上所述，一定浓度的白藜芦醇可以 ______ 细胞中EGFR、ERK、AKT三种蛋白质的合成，从而影响胰腺癌细胞的增殖．
              难度：较易
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