玉米自交系（遗传稳定的育种材料）B具有高产、抗病等优良性质，但难以直接培育成转基因植株，为使其获得抗除草剂性状，需依次进行步骤 I、II试验．
Ⅰ．获得抗除草剂转基因玉米自交系A，技术路线如图．
（1）为防止酶切产物自身环化，构建表达载体需用2种限制酶，选择的原则是 ______ （单选）．
①Ti质粒内，每种限制酶只有一个切割位点
②G基因编码蛋白质的序列中，每种限制酶只有一个切割位点
③酶切后，G基因形成的两个黏性末端序列不相同
④酶切后，Ti质粒形成的两个黏性末端序列相同
A．①③B．①④C．②③D．②④
（2）如表是4种玉米自交系幼胚组织培养不同阶段的结果．据表可知，细胞脱分化时使用的激素是 ______ ，自交系 ______ 的幼胚最适合培养成愈伤组织作为转化受体．
激素
结果
自交系 | 2，4-D（2.0mg/L） | 6-BA（0.5mg/L） | IBA（2.0mg/L） |
| 愈伤组织形成率（%） | 芽的分化率（%） | 根的诱导率（%） |
| 甲 | 99 | 13 | 90 |
| 乙 | 85 | 80 | 87 |
| 丙 | 88 | 83 | 12 |
| 丁 | 16 | 85 | 83 |
（3）农杆菌转化愈伤组织时，T-DNA携带插入其内的片段转移到受体细胞．筛选转化的愈伤组织，需使用含 ______ 的选择培养基．
（4）转化过程中，愈伤组织表面常残留农杆菌，导致未转化愈伤组织也可能在选择培养基上生长．含有内含子的报告基因只能在真核生物中正确表达，其产物能催化无色物质K呈现蓝色．用K分别处理以下愈伤组织，出现蓝色的是 ______ （多选）．
A．无农杆菌附着的未转化愈伤组织
B．无农杆菌附着的转化愈伤组织
C．农杆菌附着的未转化愈伤组织
D．农杆菌附着的转化愈伤组织
（5）组织培养获得的转基因植株（核DNA中仅插入一个G基因）进行自交，在子代含G基因的植株中，纯合子占 ______ ．继续筛选，最终选育出抗除草剂纯合自交系A．
II．通过回交使自交系B获得抗除草剂性状
（6）抗除草剂自交系A（GG）与自交系B杂交产生F
1，然后进行多轮回交（如图）．自交系B作为亲本多次回交的目的是使后代 ______ ．
（7）假设子代生活力一致，请计算上图育种过程F
1、H
1、H
2、H
3各代中含G基因植株的比例，并在图1中画出对应的折线图．若回交后每代不进行鉴定筛选，直接回交，请在图2中画出相应的折线图．
______
（8）如表是鉴定含G基因植株的4种方法．请预测同一后代群体中，4种方法检出的含G基因植株的比例，从小到大依次是 ______ ．
| 方法 | 检测对象 | 检测目标 | 检出的含G基因植株的比例 |
| PCR扩增 | 基因组DNA | G基因 | x1 |
| 分子杂交 | 总mRNA | G基因转录产物 | x2 |
| 抗原-抗体杂交 | 总蛋白质 | G基因编码的蛋白质 | x3 |
| 喷洒除草剂 | 幼苗 | 抗除草剂幼苗 | x4 |
对H
n继续筛选，最终选育出高产、抗病、抗除草剂等优良性状的玉米自交系．