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            • 1. 金黄色葡萄球菌是一种具有高度耐盐性的微生物,可引起人类肺炎、肠炎等疾病。金黄色葡萄球菌在血平板(培养基中添加适量血液)上生长时,可破坏菌落周围的红细胞,使其褪色。下图为定性检测鲜牛奶中是否存在金黄色葡萄球菌的操作流程,请回答相关问题。

              (1)按细胞结构分类,金黄色葡萄球菌属于______生物,从培养过程分析,金黄色葡萄球菌可进行_______呼吸。

              (2)7.5%NaCl肉汤培养基可为微生物提供的营养成分包括________________,用7.5%NaCl肉汤培养基进行选择培养的主要目的是______________________。

              (3)操作中在血平板上的接种方法是____________,接种操作前后需要对接种工具进行___________灭菌。

              (4)在制备血平板时需将pH调节至________(“微酸性”或“微碱性”)后灭菌,待培养基冷却后,再加入适量血液。经多次规范操作、重复实验,血平板上均出现_____________________的菌落,初步证明鲜牛奶中存在金黄色葡萄球菌,但鲜牛奶供应商仍认为此菌并非鲜牛奶所携带,因此要对本操作进行完善,完善的方案是_______________________________。

            • 2.

              苯酚及其衍生物广泛存在于工业废水中,对环境有严重危害。某同学准备依据如图操作步骤,从处理废水的活性污泥中分离筛选苯酚降解高效菌株。请回答下列问题:

              (1)苯酚降解菌富集培养基含有蛋白胨、K2HPO4、MgSO4、苯酚和水,其中可作为碳源的有___________。

              (2)将采集到的样品接种培养,苯酚用量应随转接次数增加而逐渐_______,以达到富集酚降解菌的目的。若上图平板中菌落过于密集,应进一步__________,以便于菌落计数与分离。制备平板培养基时除了需要水、营养物质外,还必须添加_________。

              (3)下图为连续划线法示意图,在图中________(填图中序号)区域更易获得单菌落。

              (4)采用比色测定法(使用苯酚显色剂)检测降解后的废水中苯酚残留量。先制作系列浓度梯度并进行显色反应,下表中1~5号比色管的苯酚浓度应分别为______。

              试管号

              1

              2

              3

              4

              5

              6

              苯酚浓度(mg/L)

               

               

               

               

               

              1

              如果废水为50 mg/L苯酚溶液,降解后约有21%的苯酚残留,则需将残留液稀释_____(填序号:①5 ②10 ③20)倍后,再进行比色。

            • 3.

              下表是筛选异养型细菌的培养基配方。回答下列问题:

              KH2PO

              1.4 g

              Na2HPO4

              2.1 g

              MgSO4·7H2O

              0.2 g

              FeCl3

              0.1 g

              X

              1 g

              维生素

              微量

              琼脂

              15 g

              将上述物质溶解后,用蒸馏水定容到1 000 mL

              (1)苯胺是致癌物质,土壤中有分解苯胺的异养型细菌,若要筛选此异养型细菌,则此培养基中的成分X除了为目的菌提供能源外,还能提供_________,该培养基从物理性质看属于________培养基。中学实验室中对培养基进行灭菌的常用方法是____________。接种前,用灭菌后未接种的培养基培养一段时间,观察是否形成菌落,目的是________________________________________________________________________。

              (2)如图是采用纯化微生物培养的两种接种方法接种后培养的效果图,获得图A效果的接种方法是____________________。运用获得图B效果的方法接种时,操作上应注意每次划线前要灼烧________。

              (3)在以尿素为唯一氮源的培养基中加______________可初步鉴定该种细菌能否分解尿素;在筛选能够分解纤维素的微生物过程中,常用到________染色法。

            • 4.

              已有研究证实,在体外培养条件下耐药基因能够在不同种属的乳酸菌菌株中发生转移。鉴于此,科研小组对市售酸奶中的乳酸菌进行分离和鉴定,通过药物敏感性实验确定菌株的耐药谱,同时调查环丙沙星、庆大霉素、四环素等耐药基因在这些菌株中的分布情况,为乳酸菌的安全评价提供参考依据。请分析回答下列有关乳酸菌培养过程中的相关问题:

              (1) 本研究使用的细菌培养基中特别加入了一定量的碳酸钙,乳酸菌产生的乳酸能与不溶性的碳酸钙生成可溶性的乳酸钙,从而在菌落周围形成溶钙圈。从功能角度分析,本研究使用的培养基属于______。 

              (2) 在利用高压蒸汽灭菌锅对培养基灭菌时,锅内水加热煮沸后,必须____,以保证锅内气压上升、温度升至121 ℃,灭菌后的培养基应适当冷却后,在____附近倒平板。 

              (3) 在酸奶制作过程中要严格控制发酵条件是保证发酵正常进行的关键,通常所指的发酵条件包括_____________(至少写出两项)。一般情况下含抗生素牛奶不宜制作酸奶,原因是_______________。 

              (4) “检测乳酸菌对环丙沙星、庆大霉素、四环素耐药性”实验中,____(选填“需要”或“不需要”)设置对照实验,培养基配制好后再分别接种____。 

              (5) 在统计菌落时,发现0.1 mL稀释倍数为105的稀释液在平板上的平均菌落数为40个,则每毫升样液中的乳酸菌数大约为____个。用此法测定的乳酸菌数量比实际活菌数量____,原因是______________。 

            • 5.

              [生物——选修1:生物技术实践]

              牛奶是微生物生长的良好培养基。生鲜牛奶中的微生物情况反映了奶牛的健康状况,也影响奶制品的运输和贮藏。牛奶在饮用前都要经过巴氏消毒,以杀死有害微生物。为检测消毒前后牛奶中细菌含量变化情况,做如下图所示操作。用无菌吸管从锥形瓶中吸取1mL生牛奶稀释液至盛有9mL无菌水的试管中,混合均匀,如此再重复2次。请回答下列有关问题:



              (1)巴氏消毒的方法是_______________,使用这种方法对生鲜牛奶进行消毒的好处是______________________________。

              (2)取最终的牛奶稀释液0.1mL滴在培养基上进行涂布,应选择的涂布工具是下图中的_______________。

              (3)图中所示方法为稀释培养法,理想情况下,培养一段时间后可在培养基表面形成菌落。若用该方法培养设置了3个培养皿,菌落数分别为35个、33个、34个,则可以推测生牛奶中每毫升含细菌数为_______________个。运用这种方法统计的结果往往较实际值_______________(填“偏大”或“偏小”),原因是_______________。

              (4)消毒后的牛奶中绝大部分细菌被杀死,若继续用该方法检测消毒后的牛奶中细菌的数量,则在操作步骤上应做什么改动? _______________。

              (5)从生牛奶取样培养得到的菌落中,混有各种杂菌,从中检测出大肠杆菌的方法是在培养基中加人_______________,菌落具有_____________特征的可以认定为大肠杆菌。

            • 6.

              [生物—选修1:生物技术实践]

              某实验小组欲从土壤中筛选出能高效分解纤维素的微生物,设计了下列实验流程。请回答相关问题

              (1)上述流程中,选择培养________(能或不能)省略,选择培养使用的培养基是________(固体或液体)培养基。

              (2)实验中对接种环的灭菌方法是________。

              (3)鉴别纤维素分解菌的培养基中应加入________染料。它可以与纤维素形成________色复合物,最终应挑选透明圈________(大或小)的菌落进行纯化培养。

              (4)某同学在鉴定细菌时,发现培养基上的菌落连成一片,最可能的原因是________。

            • 7. 酵母菌是常用的实验材料,以下是某校生物兴趣小组同学围绕酵母菌进行的系列探究实验.请根据所学知识回答有关问题:

              (1)实验一:酵母菌活力的鉴定.配制50mL质量分数为50%葡萄糖溶液,并向其中加入适量的酵母细胞悬液,用玻棒搅匀后,将装置置于37℃恒温条件下培养,一段时间后观察发酵液中气泡产生的速度和产生量.上述实验设计中有两处明显错误:
              错误一:    ;错误二:    
              (2)实验二:酵母菌种群数量的测定.研究小组在适宜条件下培养酵母菌,定期取样,并对相同样品液中的酵母菌分别利用血球计数板计数和稀释涂布平板法计数,发现获得的数据前者比后者    (填“大”或“小”).图l是使用血球计数板对酵母菌进行计数时某一中方格的示意图,则计数时应选取的中方格有    个.
              (3)实验三:固定化酵母细胞及应用.某同学制备的凝胶珠在氯化钙溶液中浸泡时间过短,结果造成凝胶珠容易    ;在利用固定化酵母细胞按发酵要求进行酒精发酵时,发现发酵液中酸味较重,试分析可能的原因:    
              (4)实验四:采用平板划线法分离酵母菌.实验过程如图2所示完成划线操作,至少需灼烧接种环    次,接种环灼烧后进行下一次划线前需    处理.
            • 8.

              利用微生物分解淀粉生产糖浆具广阔的应用前景。某同学为了从长期种植马铃薯的土壤中分离出能够高效分解淀粉的细菌,进行如下实验:

              (1)实验步骤:

              ①配制以           为碳源的固体培养基,为了使培养基凝固成固体,应该向培养基中加入的物质是               

              ②将土壤样品接种到已灭菌的培养基上,在恒温培养箱中培养一段时间后,培养基上出现        

              ③将接种针用                   法灭菌后,从②中的培养基上挑取一定量细菌,接种入          (固体、液体)培养基,在恒温摇床上培养24h,使细菌大量繁殖。

              ④配制与①相同的培养基,并加入少量碘液,使培养基呈蓝紫色。用                  法将上一步大量繁殖后的细菌接种到已灭菌的培养基上。

              ⑤培养一段时间后,观察菌落周围培养基的颜色变化和变化范围的大小。周围出现较大的          现象的菌落即为初选菌落,经进一步分离、纯化后即可达到实验目的。

              (2)上述实验步骤中,从用途看,①所用培养基属于             培养基,⑤所用培养基属于             培养基。

            • 9. 请回答下列有关微生物相关的问题:

              (1)微生物的分布:微生物主要分布在富含                 的土壤表层;不同微生物对pH值的要求不同,细菌常生活在                 性的环境中。

              (2)微生物的消毒和灭菌:在菊花组织培养中,对外植体常用                        和氯化汞进行消毒;在微生物培养中,对培养基常用                   方法进行灭菌。

              (3)微生物的接种:微生物接种的方法很多,最常用的是                           

              (4)微生物的计数:运用活菌计数法统计的菌落数往往比活菌的实际数目低,原因是                                                              

              (5)微生物的鉴定:为筛选出纤维素分解菌,应向培养基中加入                染料,将呈           反应,再依据培养基中是否产生                   来筛选纤维素分解菌;为检测尿素分解菌的存在与否,在以尿素为唯一氮源的              (选择、鉴别)培养基中加入              指示剂,如果存在尿素分解菌,则指示剂将变红色。

            • 10.

              [生物—选修1:生物技术实践]

              下表为培养某种微生物的培养基配方,请回答有关间题:

              KH2PO4

              Na2HPO4

              MgSO4•7H2O

              葡萄糖

              尿素

              蒸馏水

              1.4g

              2.1g

              0.2g

              10.0g

              1.0g

              定容至1000mL

              (1)该培养基只允许分解尿素的细菌生长,这种培养基称为    培养基。该培养基会抑制其它种类微生物生长,其原因是该培养基    

              (2)若要通过统计培养基中菌落数来估计样品中的细菌数,上述培养基中还需要添加的成分是    ,接种时应采用    法,该方法接种培养后的菌落,不可能是下图中的    (单选)。


               (3)从土壤中分离出分解尿素的细菌后,要对其作进一步的鉴定,可在上述培养基中加入    指示剂,培养该菌后,如果指示剂变    ,可初步鉴定该种细菌能够分解尿素。

               (4)某同学用0.1mL稀释液在稀释倍数为106的平板中测得菌落数的平均值为163,则每mL样品中的细菌数是    

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