高温淀粉酶在大规模工业生产中有很大的实用性。研究者从热泉中筛选了高效产生高温淀粉酶的嗜热菌，其筛选过程如下图所示，请据图回答有关问题：

（1）过程①②合称为______________________。从功能上看，Ⅰ号培养基属于____________；该培养基中必须以_______作为唯一碳源。 Ⅱ号培养基的接种方法为___________________。

（2）对配制的培养基采用的灭菌方法是__________________________________。

（3）在1号培养基上挑出能产生淀粉酶的嗜热菌菌落的鉴别方法是培养基上会出现以该菌的菌落为中心的______________；也可将得到的菌悬液转接于同时含有葡萄糖和淀粉作碳源的固体培养基上培养，得到若干菌落后用碘液作显色处理，看到如下图所示情况，可判断图中周围___

_________的菌落含有所需菌种。

（4）如果高温淀粉酶的产业化需要其活性在固定化处理时不受损失，且在多次重复使用后仍能维持稳定的酶活性，则应选择下图中的______（填写字母）固定化工艺。

回答下列（一）、（二）小题

（一）如图是“分离以尿素为氮源的微生物”实验的基本流程，请回答下列问题：

（1）该实验培养基应该含有_____．

A．尿素       B．氯化钠        C．葡萄糖         D．琼脂

（2）稀释过程中需要用到的仪器是________，尿素溶液可用_______使之无菌．若要检查B过程灭菌是否彻底，可以采用的方法是_________．

（3）图中步骤C为_____．相对于划线分离法，过程D涂布分离法的优点是_________．

（4）如果菌落周围出现_____色环带，说明该菌落能分泌脲酶．

（二）如图是某实验室做的通过动物纤维母细胞等获得单抗的实验研究．据图回答相关问题．

（1）X、Y、Z细胞的名称分别是__________、__________、__________．

（2）与纤维母细胞相比，诱导干细胞的全能性较_____．②过程的实质是____________．

（3）③过程中需用到的生物诱导剂是________．

（4）④处需要筛选，其目的是______________________________________．

下图表示微生物培养与利用的相关实验技术，回答下列问题：

 (1)在培养基的制备过程中，A表示____________，B表示灭菌，对培养基灭菌常用的方法是_________。

（2）D是微生物接种最常用的方法之一，它包括___________和_____________两步操作。

（3）在筛选土壤中分解尿素的细菌时，所用培养基以尿素作为_______________；在统计菌落数目时，一般选择菌落数在 ___________________的平板进行计数。若要对分离的菌种作进一步的鉴定，可在选择培养基中加入___________________指示剂，若指示剂变__________，则可初步鉴定该种细菌能够合成___________，分解尿素。

土壤是“微生物的天然培养基”，下面是有关土壤中分解尿素的细菌分离和计数的实验过程，请根据下图回答相关问题：

(1)能分解尿素的细菌代谢类型为_____________，取样时一般_____（能/不能）从土壤表层取土样。
(2)为分离出土壤中分解尿素的细菌，应该用__________________________________的____体培养基进行分离，并加入________指示剂进行鉴别。为了提高实验结果的可信度，还需设置对照组。若要判断选择培养基是否起到了选择作用，对照组的设置是__________________________________；若要判断选择培养基是否被杂菌污染，对照组的设置是__________________________________。

(3)若取土样5g，应加入___ml的无菌水配制成稀释10倍土壤溶液。因土壤中细菌密度很大，需要不断加以稀释，配制成如图所示的不同浓度的土壤溶液。随后将10³-10⁷倍的稀释液分别吸取0.1mL加入到固体培养基上，用________将菌液铺开。这种接种方法称为_____________。
(4)将接种的培养皿放置在37℃恒温培养箱中培养24h～48h，观察并统计呈_____色的菌落数，结果如下表，其中________倍的稀释比较合适。

在生产研究上，常常需要进行微生物的培养和计数。回答下列与微生物的培养与利用有关的问题

（1）下图是利用______________法将微生物接种到固体培养基上，把混合的菌种逐步稀释分散获得______________菌落。接种后培养基应______________放在37℃恒温培养箱中进行培养。

分析下面培养基的配方：NaNO3、KH2PO4、NaH2PO4、MgSO4•7H2O、KCl、H2O。若此培养基用于筛选尿素分解菌，则应除去上述培养基成分中的________，并加入______________和________物质，以补充其生活所需的碳源和氮源。培养基中加入酚红作指示剂的原因是尿素分解菌能合成________将尿素分解为氨，使培养基pH发生改变，酚红由黄变红，使菌落周围呈现红色。

（3）三位同学用稀释涂布平板法测定同一土壤样品中细菌数量。在对应稀释倍数为10⁶的培养基中，取0.2ml稀释液涂布，得到以下统计结果：

甲同学涂布了1个平板，统计的菌落数是260；

乙同学涂布了三个平板，统计的菌落数是210、240和246，取平均值232；

丙同学涂布了三个平板，统计的菌落数是21、212和256，取平均值163；

在三位同学的统计中，____________同学的统计结果是相对准确可信的。按照该同学的结果，每毫升原液中的菌体数是______________。用这种方法测得的菌体数比实际活菌数量______________。

在生产研究上，常常需要进行微生物的培养和计数。回答下列与微生物的培养与利用有关的问题：

（1）下图是利用______________法将微生物接种到固体培养基上，把混合的菌种逐步稀释分散获得单个菌落。接种后培养基应______________放在37℃恒温培养箱中进行培养。

（2）分析下面培养基的配方：NaNO₃、KH₂PO₄、NaH₂PO₄、MgSO₄•7H₂O、KCl、H₂O、琼脂。若此培养基用于筛选尿素分解菌，则应除去上述培养基成分中的________，并加入______________和_____________。培养基中加入酚红作指示剂的原因是尿素分解菌能合成________将尿素分解为氨，使培养基pH发生改变，使菌落周围呈现红色。

（3）三位同学用稀释涂布平板法测定同一土壤样品中细菌数量。在对应稀释倍数为10⁶的培养基中，取0．2ml稀释液涂布，得到以下统计结果：

甲同学涂布了1个平板，统计的菌落数是260；

乙同学涂布了三个平板，统计的菌落数是210、240和246，取平均值232；

丙同学涂布了三个平板，统计的菌落数是21、212和256，取平均值163；

在三位同学的统计中只有一位同学的统计结果是相对准确可信的，按照该同学的结果，每毫升原液中的菌体数是______________。

（4）实验结束后，使用过的培养基应该进行_____________处理后，才能倒掉。

（5）用这种方法测定密度，实际活菌数量要比测得的数量______，因为_______________． 

根据各类微生物的形态结构特点和新陈代谢类型，利用选择培养基和鉴别培养基，结合显微镜镜检以及菌落特征，可以把混杂在一起的大肠杆菌、硝化细菌、乳酸菌、酵母菌、金黄色葡萄球菌、圆褐固氮菌、尿细菌、纤维杆菌分离开来。下面是分离筛选的方法步骤，请根据各个步骤的条件，填写空格中的内容：

首先配制一系列不同性质的固体培养基，然后进行高温灭菌。再将上述微生物的混合液分别接种到各种培养基上培养。

(1)利用无氮培养基可筛选出________________。

(2)用不含有机碳源的选择培养基可筛选出_________________.

(3)酵母菌的筛选需要在常规培养基中另加人_______________。

(4)用含较高浓度NaCl的培养基可选择出________________。

(5)利用伊红一美蓝培养基培养混合菌，菌落呈黑色是____________，挑取该菌落单独培养，结合显微镜镜检和进一步用伊红——美蓝鉴别培养基来确定。

(6)在无氧环境下培养混合菌，同时加入一定浓度的乳酸，使培养基pH充分降低，利用菌落特征，结合显微镜镜检，选取生长优势的菌落，即可分离出________________。

(7)利用碳源为纤维素的液体培养基可筛选______________________。

(8)若筛选尿细菌，则配制的培养基特点是________________________。初步筛选后为了进一步验证分解尿素的细菌是否存在，常用的方法是        。

(9)在上述实验接种时可采用平板划线法，操作结束为什么仍需要灼烧接种环？                                                           。

蓝色牛仔裤常选用质地较粗的棉布料，为了美观和穿着舒适，以往采用“石洗”法，把成捆的布料和浮石放在机器中翻滚，使它变得柔软。现在改用“生物石洗”法，用含有纤维素酶和蓝靛染料的溶液水洗布料，当达到一定柔软度时，冲洗掉纤维素酶。

（1）自然界中纤维素的来源是___________________。它是_______________的基本组成成分。纤维素酶能使布料柔软的原因是_______________。

（2）某研究性学习小组同学，为了从土壤中筛选纤维素分解菌，利用下列材料和用具进行了实验，请完善下列实验步骤。

   提示：刚果红能与纤维素形成红色复合物，纤维素分解菌在含有刚果红和纤维素的培养基上形成有透明圈的菌落。

   材料用具：采集的土样，研钵，配制纤维素分解菌培养基的各种原料，琼脂，纤维素粉，刚果红溶液，培养箱，无菌水。

   实验步骤：

   ①利用培养纤维素分解菌培养基的各种原料、琼脂及________________配制固体培养基，灭菌。

   ②将采集的土壤样品在研钵中研碎后_____________________________，制成土壤匀浆。

   ③利用无菌操作方法把土壤匀浆___________到培养基上，放在培养箱内培养一段时间。

④用显微镜观察纤维素分解菌时，要从____________________挑取材料制成临时装片。

（3）在用平板计数法纤维素分解菌数目统计时，统计的菌落数往往比活菌的实际数低，这是因为                        。

（4）如果探究温度对纤维素酶活性的影响，自变量是                ，应该保持                               等不变（至少答两项）。

土壤中微生物种类繁多，功能强大。比如：最显著的作用是分解有机质：把植物的残根败叶和施入土壤中的有机肥料分解，改善土壤的结构和供给植物吸收。若利用其中某种微生物，则需要进行菌种的分离和纯化。以下示意图是从土壤中分离出分解尿素的微生物流程图。请分析相关问题：

（1）②过程所使用的接种方法对微生物进行计数时，统计的菌落数往往比活菌的实际数目________，原因是________。

（2）从用途上来说，1号培养基属于________培养基，制备该培养基的步骤是：计算→称量→________→________→倒平板。

（3）该实验中酶活性鉴定是鉴定________酶的活性，可以加入________指示剂，如果指示剂变为________色，说明该酶的检测为阳性。

某生物兴趣小组为了探究土壤中的微生物对尿素是否有分解作用，设计了以下实验，并成功筛选到能高效降解尿素的细菌（目的菌）。培养基成分如下表所示。请分析回答问题：

(1)简述土壤中可分解尿素的细菌的鉴定方法及原理：在以尿素为唯一氮源的培养基中加入         指示剂，细菌合成的        将尿素分解为         ，pH升高，使指示剂变为红色。

(2)培养基中加入尿素的目的是筛选目的菌，这种培养基属于        培养基。

(3)“目的菌”生长所需的氮源和碳源分别来自培养基中的        和       ，实验中需要振荡培养，原因是                                      。

(4)下图是利用            法进行微生物接种，把聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面。通常还可以           方法分离到一个细胞繁殖形成的菌落。

(5)关于图中的操作方法和结果，叙述正确的是             。

 A．操作时要将接种环放在火焰上灼烧灭菌

 B．划线操作须在火焰旁进行

 C．多次划线后培养才可以分离到一个细胞繁殖形成的菌落

 D．在1、2、3、4、5区域中划线前后都要对接种环灭菌