(1)图甲是利用__________法进行微生物接种，图乙是利用________法进行微生物接种。这两种方法所用的接种工具分别是______和_________；对这两种接种工具进行灭菌和消毒的方法依次是________和酒精消毒。

(2)接种操作为什么一定要在火焰附近进行？___________________。

(3)接种后，在固体培养基上培养细菌时为什么进行倒置培养？__________________。

为研究“某品牌酸奶中乳酸菌数量及其对抗生素耐药性情况”，某同学进行了如下实验：

请分析回答下列问题：

(1)配制的细菌培养基除了含有水、碳源、氮源和无机盐等主要营养成分外，还应加如适量的________和琼脂。在培养基各成分溶化与灭菌之间，要进行的操作是________。

(2)接种微生物的方法有很多，图1中过程③所示的方法为________。用该方法统计样本菌落数时，同时需要做A、B、C三个培养皿，原因是________。用该方法统计样本菌落数后，

所得数据需要乘以10ⁿ后，才可表示乳酸菌的数量(单位：个／ml)，这里的n＝________。

(3)请完善“检测乳酸菌对青霉素、四环素耐药性”的实验操作步骤：

步骤1：分别取________加入三组无菌培养皿中，再加入灭菌并冷却到________℃左右的培养基，立即混匀，静置凝固成平板。

步骤2：向三组培养基中分别接种待检测的乳酸菌菌种。

步骤3：将接种后的三组培养基和一个________都置于适宜温度等条件下培养一定时间，观察比较培养基中菌落生长情况。

如下图为微生物的实验培养和纯化醋酸菌的部分操作步骤。请回答下列问题：

（1）微生物生长繁殖所需的主要营养物质有无机盐、水、________四类。①是制备培养基时________中的主要操作，该操作需使锥形瓶的瓶口通过火焰，目的是通过灼烧灭菌防止瓶口的微生物污染培养基，实验操作中的灭菌方法还有_________。

（2）该纯化醋酸菌的接种方法是______________；完成步骤④的操作，接种共需要________次灼烧处理。如果需要统计醋酸菌液中活菌的数目可以采用______________法进行接种；培养过程中，常选择菌落数在__________的平板统计计数。

（3）食草动物能够消化食物的关键是体内存在能合成__________酶的微生物能够降解纤维素，该酶是一种复合酶，它至少包括__________________。为检测纤维素分解菌的存在与否，还应加入__________染料，形成________色复合物，若产生__________，则证明有纤维素分解菌存在。

③统计原生质体数量，结果如下。

分析回答：

（1）步骤②中，加酶液的目的是_______________________，洗涤时选用渗透压稳定剂的理由是______________________________________。

（2）结果表明，制备红豆杉内生真菌原生质体的适宜条件是__________、________、_______。

（3）检验原生质体再生能力，需要配制再生固体培养基，培养基灭菌常采用___________ 法，灭菌后需要冷却到_______℃左右才能用来倒平板。

（4）实验中将收集到的原生质体浓度为30×10⁶个/mL培养液先稀释10⁴倍，再各取0.1mL稀释液分别均匀涂布在3个再生固体培养基上培养。一段时间后，统计得到的菌落数分别为：27、21、24。则原生质体再生率（能再生的原生质体数占全体部原生质体的比例）约为________________。

果蝇肠道中有包括醋酸杆菌在内的多种微生物，对其进行了分离、研究。

（1）分离醋酸杆菌：培养基中加入一定浓度甘露醇既可为醋酸杆菌提供________，又能抑制其它肠道微生物的生长，因此可作为___________培养基用于分离醋酸杆菌。实验中剥取果蝇肠道并用__________（蒸馏水/无菌水/生理盐水）冲洗，将所得液体涂布于已制备的培养基中，分离得到醋酸杆菌。

（2）为研究醋酸杆菌对果蝇生长发育的影响，研究者分别使用含肠道微生物（A组）、无菌（B组）、醋酸杆菌（C组）的培养基喂养无菌果蝇，测定蛹形成的平均时间，结果如图。

据图可知，醋酸杆菌对果蝇蛹形成具有_________作用，酵母粉含量为_________时作用最显著。若研究者利用此实验证实醋酸杆菌在肠道微生物中起主要作用，则需补充D组的实验处理为_____________。

（3）从细胞结构来看，醋酸杆菌属于_________生物，可在细胞的_________中将醇类、糖类分解为乙酸。醋酸杆菌可降解纤维素，有助于果蝇消化吸收营养物质，果蝇采食时携带醋酸杆菌，利于其传播，二者形成了__________关系。

（4）研究表明果蝇大脑分泌的一种蛋白类激素——促胸腺激素（PTTH）在果蝇生长发育过程中可促进蛹形成，预测醋酸杆菌可___________（提前/延迟/不影响）果蝇PTTH峰值出现的时间。

（5）综上所述，醋酸杆菌影响果蝇生长发育的原因是：___________________________________

葡萄种植基地为解决葡萄滞销易腐烂问题，引进果酒、果醋生产线进行葡萄的深加工，获得了较好效益，其菌种筛选和生产流程如图所示。其中在纯化菌种A时，共接种了甲、乙、丙、丁、戊五个平板，每个平板接种量均为O.lmL。纯化菌种B釆用的是划线接种。请回答下列问题：

（1）候选菌种A和B在细胞结构上的最大差别是菌种A有              。图中筛选菌种所用的培养基在灭菌时温度为                。

（2）纯化菌种A时，乙平板的菌落分布如上图所示，则纯化菌种A的接种方法为                    ，接种乙平板时的操作失误是                  。

（3）纯化菌种A的过程中，除乙平板外，其余的甲、丙、丁、戊平板的菌落数分别是180、 200、420、190，则样品中菌种A的密度为       个/mL，此方法计数的结果常常低于实际值，原因是                           。

（4）果醋发酵与果酒发酵相比，提供的不同条件有                          。

普通酵母菌直接利用淀粉的能力很弱，有人将地衣芽孢杆菌的α－淀粉酶基因转入酵母菌中，经筛选得到了可高效利用淀粉的工程酵母菌菌种(过程如图甲所示)。

(1)图甲中，过程①需要的酶有____________________________________。为达到筛选目的，平板内的固体培养基应以________作为唯一碳源。②、③过程需重复几次，目的是________________________________________。

(2)某同学尝试过程③的操作，其中一个平板经培养后的菌落分布如图乙所示。该同学的接种方法是______________________；推测该同学接种时可能的操作失误是_________________________。

(3)以淀粉为原料，用工程酵母菌和普通酵母菌在相同的适宜条件下密闭发酵，接种__________________菌的发酵罐需要先排气，其原因是_______________________________。

回答下题：

(一） 酿酒、造醋是我国的传统技艺，为了探究与改进制造工艺，进行了相关研究。请回答有关问题：

（1）目的菌株筛选后应该利用     培养基进行扩大培养，       是消除污染杂菌的通用方法。

 (2)制作葡萄酒过程中，为了酵母菌迅速发生作用，可加少量      混匀。将葡萄浆放入发酵瓶，装量不超过      （A.1/2 B.2/3 C.3/4 D.100%）,当发酵瓶       表示发酵完毕。

 (3)醋的制作中发酵瓶中装锯末至       ，将适量的醋化醋杆菌培养物加在酒-水混合物中，混匀，并调PH至       后，倒入发酵瓶。

（二）毛角蛋白Ⅱ型中间丝(KIF Ⅱ)基因与绒山羊的羊绒质量密切相关。获得转KIF Ⅱ基因的高绒质绒山羊的简单流程如图。请回答相关问题：

(1)过程①中构建重组表达载体所需要的酶是限制性核酸内切酶和      。（A.DNA聚合酶B.DNA连接酶C.逆转录酶D.解旋酶）

(2)在过程②中，用       处理将皮肤组织块分散成单个成纤维细胞，置于    中培养。

(3)在过程③中，一般用     激素处理供体母牛，使其超数排卵；对供体母牛和代孕母牛进行           处理。

 (4)从重组细胞到早期胚胎过程中所用的胚胎工程技术是          。在胚胎移植前，通过                技术可获得较多胚胎。

在农业生产中发现一种广泛使用的除草剂(含氮有机化合物)在土壤中不易降解，长期使用可污染土壤。为修复被该除草剂污染的土壤，可按下面程序选育能降解该除草剂的细菌(已知该除草剂在水中溶解度低，含一定量该除草剂的培养基不透明)。

(1)制备土壤浸出液时，为避免菌体浓度过高，需将浸出液进行________处理。

(2)要从长期使用该除草剂的土壤中分离目的菌，上述培养皿中培养基为               培养基（按物理状态分类）。

(3)在第2次及其后每次划线前需对接种环进行          ，并且从上次划线______端开始。

(4)培养后发现，只有很少菌落出现 ，大部分细菌在此培养基上不能生长的主要原因是

                                           或有氧条件抑制了这些细菌的生长。

(5)在固体培养基上形成的菌落中，无透明带菌落利用的氮源主要是            ，有透明带菌落利用的氮源主要是                   ，据此可筛选出目的菌。