“创卫”是创建卫生城市的简称。“卫生城市”是一个城市综合功能和文明程度的重要标志。某同学欲利用所学习的微生物培养知识，通过实验证明痰液中含有细菌，来倡导同学们不要随地吐痰，为“创卫”添一份力。请回答下列问题：

(1)欲培养细菌必须先制备可供细菌生长的培养基。实验室中常用牛肉膏蛋白胨固体培养基来培养微生物，该培养基的组成成分包括牛肉膏、蛋白胨、NaCl________、H₂O等；该培养基中微生物所需的氮源来自________，制备该培养基的步骤是：计算→称量→溶化→灭菌→倒平板，其中灭菌常用的方法是_______________________________________________；培养基灭菌后，需要冷却到________ ℃左右才能倒平板，等平板冷凝后，还需要将平板倒置，主要目的是___________________________________________。

(2)为了使实验更有说服力，某同学设置空白对照组和若干实验组，其中对照组的作用是____________________________________________________________。若在某次调查中，某一实验组平板上的平均菌落数为39个，而空白对照组的平板上出现了9个菌落，这种结果说明在此次调查中出现了________现象。

(3)某同学利用稀释涂布平板法来统计样品中细菌的数目，统计结果往往比实际细菌的数目要低，主要原因是：____________________________________。

下面的图甲表示硝化细菌、酵母菌和乳酸菌在半固体培养基中的生长情况，图乙表示这三种菌的增殖速度与氧气浓度之间的关系，请据图回答：

(1)图乙中a、b、c三条曲线依次表示图甲中__________号试管中微生物在不同氧气浓度中的增殖速度。

(2)研究发现，青霉素能破坏细菌的细胞壁并在细菌细胞的繁殖期起杀菌作用。如果培养基中混杂了这三类微生物，请设计实验，利用改变培养基成分等培养条件，将酵母菌和硝化细菌分离出来。

①主要步骤：

A．分别配制不含__________的培养基(A)和加入________的培养基(B)，分别灭菌。

B．分别接种混合液放在适宜条件下培养。

C．观察结果。

②结果：在A培养基上生存的是____________，在B培养基上生存的是____________。

(3)微生物培养过程中，获得纯净培养物的关键是________________。

石油是人类重要的化工原料之一，其在给人类生产生活带来便利的同时也对陆地和海洋造成污染，下图是科研工作者分离能分解石油污染物的假单孢杆菌的过程。请根据流程图回答下列问题：

土壤取样→A→梯度稀释→涂布到培养基上→筛选目的菌株（假单孢杆菌）

（1）A过程为___________，目的是增加假单孢杆菌的浓度，该培养基中应当以___________为唯一碳源。该实验过程中需要设置完全培养液对照组，将菌液稀释相同的倍数，对照组培养基上生长的菌落数目应明显___________（填“多于”或“少于”）选择培养基上的菌落数目，从而说明选择培养基具有筛选作用。

（2）实验中需要用___________对菌液进行一系列的梯度稀释，然后将不同浓度的菌液分别滴加到固体培养基的表面，用___________（器具）涂布均匀并进行培养，以便获得单个菌落。

（3）若实验中用10³倍的0.1mL的稀释液分别涂布三个平板，培养后分别形成了98、100和102个菌落，则每毫升原样液中含有假单胞杆菌___________个，实际值一般要比该测量值偏大的原因是___________。

如图表示微生物的接种实验中的一些步骤。请回答下列有关问题：

（1）步骤①前的一步操作是________。，该操作用到的主要仪器是________。

（2）实验步骤②的目的是________，步骤②、③之间还需要将接种环________。

（3）指出步骤④操作不当的地方________。

（4）分别用三个平板培养三种细菌（E.coli、S.albus、B.subtilis），然后在培养基上打出直径为3mm的孔，并在孔中加入一定浓度的甲抗生素，经过一定时间培养后，可以在孔的周围观察到一圈清晰区，此乃抑制细菌生长所致。测量清晰区的直径（如图所示），数据如下表。

①s.albus和B.subtilis对甲抗生素敏感的区别是________。

②有人感染E.eoli而患病，医生使用20μg／mL甲抗生素给予治疗，试用生物进化理论解释这种不明智的做法________。

③采养殖池中的水样1mL稀释100倍，吸取稀释后的水样1mL，接种于E.coli选择性培养基上培养。一段时间后观察菌落并计数，重复三次实验结果如图。该养殖池每mL水含有E.coli________个。

根据下面的实验装置图（图甲、乙）和果酒的生产工艺流程简图（图丙）回答问题：

（1） 图甲所示装置可用于提取________（填“橘皮精油”、“玫瑰精油”或“胡萝卜素”）。

（2） 制作果酒时可选用图乙的装置。为适当提高果酒的生产速率，进气口应_________；排气口要通过一个长而弯曲的胶管与瓶身相连，这样做的原因是_____________。

（1）按细胞结构分类，金黄色葡萄球菌属于_________生物，从培养过程分析，金黄色葡萄球菌可进行____________呼吸。

（2）用质量分数为7.5%的NaCl肉汤培养基进行选择培养的主要目的是_________________。

（3）操作中在血平板上的接种方法是______________，接种操作前后需要对接种工具进行_____灭菌。

（4）在制备血平板时需将pH调节至________（填“微酸性”或“微碱性”）后灭菌，待培养基____________后，再加入适量血液。按培养基功能分类，血平板属于________培养基。

（5）经多次规范操作、重复实验，血平板上均出现______________________的菌落，初步证明鲜牛奶中存在金黄色葡萄球菌，但鲜牛奶供应商仍认为此菌并非鲜牛奶所携带，因此，要对本操作进行完善，完善的方案是________________________________________________。

下列是与微生物培养有关的问题，请回答：

⑴某细菌固体培养基的组成成分是、、、葡萄糖、尿素、琼脂和蒸馏水，其中碳源是＿＿＿＿＿，氮源是＿＿＿＿＿。已知只有能合成脲酶的细菌才能在该培养基上生长，该培养基属于＿＿＿＿＿培养基。按照化学成分分类，该培养基属于＿＿＿＿＿培养基。从同化作用类型看，用该培养的细菌属于＿＿＿＿＿。

研究发现柚皮精油和乳酸菌素(小分子蛋白质)均有抑菌作用，两者的提取及应用如图所示。请回答下列问题：

(1)通常采用压榨法提取柚皮精油，该过程得到的糊状液体可通过布袋________除去其中的固体杂质。为了提高出油率，需要将新鲜的柚皮进行________处理，并用石灰水浸泡，作用是________________________________________________________________________。

(2)筛选乳酸菌A时可选用________________________法接种。对新配制的培养基灭菌时常用的灭菌方法是________________。培养乳酸菌A的培养基中通常含有________、________、水和无机盐。

(3)抑菌实验时，在长满致病菌的平板上，会出现以抑菌物质为中心的透明圈。可通过测定透明圈的________来比较柚皮精油和乳酸菌素的抑菌效果。

回答下列（一）、（二）小题。

(一）某研究小组欲用苹果汁为原料，利用发酵瓶制作果酒和果醋，请分析回答：

(1)将苹果汁放入发酵瓶，要预留约________的空间。为得到酒精和糖含量较高的果酒，可在果汁中加入一定比例的______。若发酵瓶内持续无气泡产生，则需加入更多的_______，使发酵作用尽快发生。

(2)变酸的果酒表面有一层醋杆菌形成的菌膜，若要在该菌膜中筛选高表达量的醋杆菌菌株，可通过获得_______的方法来分离筛选。若要统计获得菌种的数目，则常采用_________法。对获得的优质醋杆菌菌种常用划线法接种在固体培养基______上低温保存。

(3)下图是果酒和果醋的发酵装置，关于果醋发酵叙述错误的是_______

A.发酵前，瓶内酒—冰混合物的pH需调至7.0

B.发酵过程中，充气口要适时适量充气

C.发酵过程中，排气口排出醋酸发酵产生的CO₂

D.发酵完成后，出料口的pH值不再减少

 (二）请回答杂交瘤技术和单克隆抗体制备的有关问题。

(1)杂交瘤技术制备单克隆抗体时，利用一定的物质，如生物诱  导剂_____作介导，使经免疫的小鼠脾细胞与________细胞融合，筛选出融合的细胞再进行细胞的______培养，获得纯系细胞，同时还要进行________检验，以保证获得的是所需的特定杂交瘤细胞。

(2)有关杂交瘤细胞体外培养的叙述，正确的是________

A.用固体培养基培养          B.用滋养层细胞支持生长

C.能进行传代培养            D.需要对细胞进行研磨破碎获得产物

(3)现在欲利用基因工程技术生产单克隆抗体，科研小组将与抗体形成有关的关键基因通过噬菌体导人到受体细胞，该技术的核心步骤是______________,噬菌体是这些关键基因的___________。

下表所示配方的培养基可筛选某种细菌，该细菌可以在该培养基上生长，进而形成菌落。回答下列问题：

（1）该培养基可筛选的细菌是_________________，判断的依据是_________________________________________。

（2）如果从土壤中获取的样本含该细菌的数量较少，需要对样本中的细菌进行扩大培养，请判断能否用表格中的培养基来扩大培养___________（填“能”或“不能”），理由是____________________________________________________________。

（3）如果需要对该细菌进行计数，则应用_________________法接种。为了确定该细菌确实属于所要分离的细菌，需要在培养基中加入_________指示剂。另一种接种细菌的常用方法是_______________________。