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            • 1． 酵母菌是发酵酿酒中常用到的菌种．回答下列问题：
              （1）酵母细胞中蛋白质的提取和分离一般分为样品处理、粗分离、纯化和 ______ 四步．为了准确模拟生物体内的过程，保持细胞内外的PH一致，在样品处理的透析阶段，应将酵母蛋白溶液放入PH较低的 ______ 中．在装填凝胶柱时，不得有气泡存在，原因是 ______ ．
              （2）用酵母菌酿制果酒时，温度应该控制在 ______ ℃；若所用果汁中混入了醋酸菌，在发酵过程中仍不会出现醋酸，其原因是 ______ ．果酒制作是否成功，需发酵后在酸性条件下用 ______ 溶液来鉴定．
              （3）获得纯净的酵母菌菌种是发酵酿酒的关键环节．为了筛选出酵母菌，一般在培养基中添加了青霉素，其目的是 ______ ．为了将分离到的菌株进一步纯化，挑取了菌落在3块相同平板上划线．结果其中一块平板的各划线区均未见菌生长，最可能的原因是 ______ ．
              难度：较易
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            • 2． 啤酒酵母是啤酒工业发酵菌种，对啤酒的品质、风味有很大影响．请回答：
              （1）若实验室中啤酒酵母菌种被杂菌污染，可采用 ______ 进行纯化培养：接种时，先将接种环在酒精灯火焰上灼烧，待其 ______  后，蘸取带菌培养物放到新的培养基中．倒置培养皿恒温培养直到出现 ______ ，再进行菌种鉴定．
              （2）为实现啤酒发酵连续生产，酵母细胞固定化技术已在啤酒工业中广泛应用．例如，将啤酒酵母和海藻酸钠混合均匀，经CaCl2处理形成凝胶颗粒，而酵母细胞则被固定在其内部．这种固定化方法称为 ______ （A．吸附法   B．包埋法   C．交联法   D．共价偶联法）．
              （3）科研人员将表达乙肝病毒表面抗原的基因构建在重组质粒中，进而转入 ______ ，发酵生产转基因酵母乙肝疫苗．在构建重组质粒过程中，通过同种限制性核酸内切酶（-G↓AATTC-）切割得到的一个目的基因和一个开环质粒，共有 ______ （A．1 个    B．2 个    C．3个D．4 个）粘性末端．将重组质粒导入受体细胞的操作步骤完成以后，需要对所有受体细胞进行筛选，这是因为 ______ ．该转基因技术实践应用的成功标志是 ______ ．
              （4）转基因技术结合胚胎工程在高等动物育种中也有成熟应用．人们将经过基因改造的胚胎干细胞与 ______ 融合，得到 ______ ，并促使其在体外分裂发育成 ______ ，再通过胚胎移植获得后代．目前胚胎移植是胚胎工程中获得后代的唯一方法，其原因是 ______ ．
              （5）胚胎干细胞具有重要的生产和临床医学价值．在培养胚胎干细胞时，首先要在培养皿底部制备一层细胞，称为 ______ ，其作用是 ______ ．
              难度：较易
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            • 3． 甲、乙、丙三个生物兴趣小组按如下三个流程进行课外探究活动，请回答：
              兴趣小组甲：

              兴趣小组乙：挑选豆腐→豆腐长毛→加盐腌制→加卤装瓶→密封腌制
              兴趣小组丙：土壤取样→梯度稀释→接种于培养基→计数
              （1）甲组由果酒的制作转变成果醋的制作时，需要改变的环境条件是 ______ ，请完善酒精发酵的反应式：C6H12O6→ ______ ．
              （2）乙组在制作腐乳过程中，先将切好的豆腐块放置在笼屉内，为使毛霉发酵充分，必须提供适宜的温度和 ______ 等条件．豆腐块上生长的毛霉丝来自于 ______ ．密封腌制时添加卤汤，卤汤中酒精的含量应控制在12%左右，酒精含量过低会导致 ______ ．
              （3）丙组欲按以上方法统计土壤中能降解苯酚的某菌株的数量，其流程中土壤样品稀释后，应该接种于以
              ______ 为唯一碳源的培养基上．该组同学在稀释倍数为104的培养基中测得平板上菌落数的平均值为60，则每毫升样品中的菌株数是 ______ 个（涂布平板时所用稀释液的体积为0.2毫升）．实验结束后，使用过的培养基应该进行 ______ 处理后，才能倒掉．
              难度：较易
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            • 4． 有关生物学实验的叙述不正确的是
              A．制作果酒的容器需适时进行排气
              B．筛选特定微生物时需要配制选择培养基
              C．MS培养基需要考虑植物激素用量
              D．平板划线法可用于微生物的分离和计数
              难度：中等
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            • 5． 葡萄是“四大水果”之一，其皮中红色素是一种重要的食用色素，籽中胶原蛋白有美容养颜、抗衰老的功效，果酒制作中也常以葡萄为重要材料．以下相关说法错误的是（　　）
              A．为了纯化并计数葡萄皮上的酵母菌，最好采用平板划线法进行接种
              B．用凝胶色谱法分离葡萄籽中的胶原蛋白时，比其分子量小的蛋白质后洗脱出来
              C．在制作葡萄酒的发酵后期接种醋酸杆菌后改变温度和氧气条件，可能会产生果醋
              D．可采用萃取法提取葡萄皮中红色素，萃取液过滤后滤液一般用蒸馏装置进行浓缩
              难度：较易
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            • 6． 下列相关生物技术的实验操作，能达到相应实验目的是（　　）
              A．将新鲜胡萝卜烘干后萃取，可提高胡萝卜素的提取效率
              B．向发酵瓶中持续通入空气，可提高酿制果酒的产酒效率
              C．向培养基中添加蛋白胨，可提高分解尿素细菌的筛选效率
              D．增加菊花愈伤组织培养基中2，4-D 浓度，可提高芽的诱导效率
              难度：较易
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            • 7．

              54.（每空2分，共16分）请分析回答下列问题：

              (1)无菌技术主要通过消毒和灭菌来避免杂菌的污染。常用的灭菌方法有____________灭菌、干热灭菌和________灭菌。

              (2)稀释涂布平板法分离纯化土壤中微生物的正确操作步骤是        (        )

              ①土壤取样  ②称取10 g土壤加入盛有90 mL无菌水的锥形瓶中制备土壤提取液 

              ③吸取0.1 mL溶液进行平板涂布  ④依次稀释至101、102、103、104、105 、106、107稀释度

              A．①②③④         B．①③②④     C．①②④③         D．①④②③

              (3)利用酵母菌将葡萄汁发酵后是否有酒精产生，可以用重铬酸钾来检验，在酸性条件下，重铬酸钾与酒精反应呈______色。在发酵过程中，随着酒精度的提高，发酵液逐渐呈现深红色，原因是______________________．

              (4)酵母菌适合生活在偏酸性环境，而放线菌则适合生活在偏碱性环境中，分离二者所用的培养基称为____________。

              (5)在腐乳制作的过程中，起主要作用的微生物是____________。

              (6)腐乳制作过程中影响其风味和品质的因素有哪些 (        )

              ①盐的用量  ②酒的种类和用量③发酵温度  ④发酵时间  ⑤香辛料的用量

              A．①②③④⑤     B．①②③     C．①②⑤       D．③④

              难度：易
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            • 8． 下列相关生物技术的实验操作，能达到相应实验目的的是
              A．将新鲜胡萝卜烘干后萃取，可提高胡萝卜素的提取效率
              B．向发酵瓶中持续通入空气，可提高酿制果酒的产酒效率
              C．向培养基中添加蛋白胨，可提高分解尿素细菌的筛选效率
              D．增加菊花愈伤组织培养基中2，4-D浓度，可提高芽的诱导效率
              难度：较易
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            • 9． 下列关子«生物实践技术»中有关实验操作或说法的叙述中，不正确的是（　　）
              A．用果胶酶处理苹果泥时，为了提高出汁率，可釆取用玻璃棒进行搅拌的措施
              B．实验室制作葡萄酒时，葡萄浆不装满发酵瓶，留有空间，密闭发酵时要适时排气
              C．用平板划线法或稀释涂布平板法接种都需要在火焰旁进行
              D．愈伤组织可作为植物体细胞诱变的材料是因为细胞全能性高
              难度：较易
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            • 10． 我省气候适宜，适合葡萄的生长，甜美的葡萄除供人们食用外，还可做成葡萄汁饮料和葡萄酒．人们常利用酵母菌发酵葡萄生产葡萄酒，回答下列问题：
              （1）酵母菌异化作用的类型是 ______ ；在酿制葡萄酒时，加入果胶酶将果胶分解成可溶性的 ______ ，瓦解植物的细胞壁和胞间层，可以提高果汁的出汁率，并使果汁澄清，提高葡萄酒的品质．
              （2）在酿制葡萄酒时，葡萄汁需要经过消毒灭菌．但有人在葡萄酒的制作过程中，加入的新鲜葡萄汁没有经过灭菌处理，可是在制出的葡萄酒中基本检测不出酵母菌以外的杂菌，从生态学角度分析：一是大量的酵母菌在与杂菌之间的竞争中取得优势，二是果酒中的 ______ ，从而淘汰掉杂菌．检验酒精常用的方法是在酸性条件下，酒精和 ______ 反应，显示灰绿色．
              （3）为提高果酒的生产效率，做了对比实验．甲发酵罐中保留一定量的氧气，乙发酵罐中没有氧气，其余条件相同且适宜，定期测得的数据如图所示：

              甲发酵罐提供氧气的目的是 ______ ，实验结束时（12h），甲、乙两发酵罐消耗的葡萄糖量之比为 ______ ．实验后检测发现，尽管酵母菌菌种合适、原料充足、操作正确、发酵温度和pH值适宜，但酒精含量比预期低，可能的原因是 ______ ．
              （4）某同学用三种不同的果胶酶进行三组实验，各组实验除酶的来源不同外，其他条件都相同，测定各组的出汁量，据此计算各组果胶酶的活性的平均值并进行比较．这一实验的目的是 ______ ．
              （5）工业生产中可用酵母菌发酵生产果胶酶，生产过程中需将发酵液中的果胶酶用凝胶色谱法分离纯化，其原理根据 ______ 分离蛋白质．分离出的果胶酶还需进行酶活性的测定，以单位时间内果汁的 ______ 表示酶活性的高低．
              难度：较易
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