氟乐灵（C₁₃H₁₆F₃N₃0₄）是播种前封杀棉田中一年生杂草的主要农药之一。氟乐灵残留大多聚集在土壤深度10～20cm，容易造成表层土壤的持续污染。为降低土壤中氟乐灵的残留，某科研团队从连作15年的棉田分离出了对氟乐灵有良好降解作用的菌株D8，并对其降解特性进行了一系列的研究。图1～3是部分研究成果，图中数据均为接种72h后测得，OD₆₀₀表示菌种在波长600nm处的吸光值，代表菌密度。请回答下列问题：

（1）土壤取样时，一般采集深度选择在10～20cm，原因是      。

（2）为分离出氟乐灵降解菌，研究人员配制了选择培养基，该培养基应以氟乐灵为唯一的     以达到分离目的。

（3）对氟乐灵降解菌D8进行分离和计数常用稀释涂布平板法，此方法测得的菌落数往往比活菌的实际数目偏      ，原因是     。

（4）分析图1可知，接种量对菌密度和降解率影响分别是     。

（5）据图2分析，在氟乐灵质量浓度较高的情况下，降解率反而较低，原因是      。

（6）图3研究过程中，为了排除PH对氟乐灵降解的影响，需设置对照，对照组的处理方式是    ，结合图1、2、3分析，菌株D8对氟乐灵进行降解的最佳条件组合是    。

发酵法生产酒精后的废液含有大量有机物，可用于培养、获得白地霉菌体，生产高蛋白饲料。培养、制取白地霉菌体的实验过程示意图：

请据图回答：

（1） 发酵生产酒精的过程中，发酵液会变成酸性，变酸的原因是       。

（2）废液上清液定量分装前，先调节       ，分装后进行高压灭菌处理，请指出下述高压灭菌的不正确的操作，并说明理由       ：

锥形瓶加棉塞，包上牛皮纸，并用皮筋勒紧，放入高压灭菌锅，锥形瓶应尽量靠紧桶壁，防止滑动；加盖时要同时旋紧相对的两个螺栓，使螺栓松紧一致；加热时，打开排气阀，等冷空气完全排尽后，关上排气阀；到灭菌时间后，打开排气阀排气，让灭菌锅内压力、温度快速下降，当压力表的压力降到零时，旋松螺旋，打开盖子，取出锥形瓶。

（3）图中①过程称为       ，从甲到丁的培养过程是为了       。

（4）为确定菌体产量，图中②操作之前，应先称量滤纸的质量。过滤后需反复烘干称量，直至         。所获菌体干重等于         。

废纸主要成分是木质纤维。左下图是工业上利用废纸生产乙醇的基本工作流程。回答下列问题。

（1）自然界中①环节需要的微生物大多分布在        的环境中。②中获得的酶是        酶。
（2）若从土壤中分离出上述微生物,应以        为唯一碳源的培养基进行培养,并加入        形成红色复合物进行筛选,培养基上会出现以该菌的菌落为中心的        。
（3）接种后一个平板经培养后的菌落分布如右上图所示,推测接种时可能的操作失误是        。向试管内分装含琼脂的培养基时,若试管口粘附有培养基,需要用酒精棉球擦净的原因是        。
（4）生产中可以满足④环节的常见菌种是        。玉米秸秆中的纤维素经充分水解后的产物可为该微生物的生长提供        。从玉米胚芽中提取的胚芽油不易挥发,宜选用        法从玉米胚芽中提取。

(1)酵母菌在果酒制作过程中发挥重要的作用，发酵装置需短通气→密封→定时排气等流程，其中通气的目的是________，密封的目的是________。

(2)在果酒的基础上制作果醋时，主要的发酵菌是________，该菌在________条件下能将乙醇间接转化成乙酸。

(3)制备果汁类饮料吋，首先要获取能分泌高活性________酶的微生物，分离该微生物时，向固体培养基上接种微生物的常用方法是________，提取该微生物分泌的此酶可采用的方法有________。为提高该复合酶的利用率，一般不选择________法进行固定。

现在大力提倡无纸化办公，但是每年仍然不可避免地产生大量的废纸，其主要成分是木质纤维，人类正努力将其转化为一种新的资源——乙醇。下图是工业上利用微生物由纤维素生产乙醇的基本工艺流程，请回答相关问题：

（1）自然界中①环节需要的微生物大多分布在 &;         的环境中。将从土壤中获得的微生物培养在以         为碳源，并加入         的培养基上，筛选周围有         的菌落。

（2）在如上所述的筛选过程中获得了三个菌落，对它们分别培养，并完成环节②，且三种等量酶液中酶的浓度相同，则你认为三种酶液的活性               （填“一定相同”、“不一定相同”或“一定不同”），可以通过                                 进行定量测定。

（3）生产中可以满足④环节的常见菌种是          ，为了确保获得产物乙醇，⑤环节要注意                         。

35[生物一现代生物科技专题」(15分)

  回答现代生物科技方面的有关问题:

  (1)单克隆抗体的制备原理和方法如下图所示，这样制得的抗体为鼠源性抗体。

在此过程中，小鼠必须经过          才能获得所需的小鼠细胞，B过程需要用         处理，才能形成杂交瘤细胞。

(2)这种抗体临床应用时，对人是异种抗原，重复注射可使人产生        ，从而减弱或失去疗效，并增加了过敏反应。

(3)在上世纪80年代早期，人们开始利用基因工程制备抗体，以降低鼠源抗体的免疫原性。进行基因改造时，应该把下图的       和        进行连接，以避免如(2)所提到的麻烦;进行改造的过程中要用的工具酶有                 。

(4)将改造好的基因与质粒进行构建，构建好的结构称为             ，扩增构建好的结构采用的方法是                                                                  。

十九世纪中期，法国科学家巴斯德证明食品发酵是由于微生物的作用。如今，形形色色的发酵食品在食品业中占有重要的地位。回答下列与微生物发酵、培养相关的问题：

(1)苹果酒清香、明快，风味清爽，它是由果汁发酵产生的。果汁发酵后是否有酒精产生，可用                     来检验。

(2)严格控制发酵条件是保证发酵正常进行的关键，这直接关系到是否能得到质量高、产量多的理想产物， 通常所指的发酵条件不包括              。

  a温度控制    b溶氧控制    C．pH控制   d酶的控制

(3)苹果酒在         的作用下，经过深层发酵可形成苹果醋；在此过程中要适时向发酵液中充气，原因是                             。

(4)腐乳是用豆腐发酵制成，有多种微生物参与发酵，其中起主要作用的是            。在腐乳的制作过程中，从微生物培养的角度来看，豆腐应该属于            。

(5)在充足的碳源、氮源、无机盐和水的条件下，乳酸菌仍然不能正常生长，还需要在培养基中添加               。应用平板划线法分离乳酸菌时，从第二次划线操作起，每次总是要从上一次划线的末端开始划线，并划线数次，其原因是             。