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            • 1. 将“DNA粗提取与鉴定”实验中提取获得的含DNA的黏稠物(还含有较多杂质)分别处理如下:

              第一,放入0.14mol/L氯化钠溶液中,搅拌后过滤,得滤液甲和黏稠物a。 第二,放入2mol/L氯化钠溶液中,搅拌后过滤,得滤液乙和黏稠物b。
              第三,放入冷却的95%的酒精溶液中,搅拌后过滤,得滤液丙和黏稠物c。

              以上过程获得的滤液和黏稠物中,因含DNA很少可以舍弃的是

              A.甲、乙、丙      
              B.甲、b、丙      
              C.a、b、c      
              D.甲、b、c
            • 2.

              [生物——选修1:生物技术实践]

              某生物兴趣小组开展DNA粗提取的相关探究活动。具体步骤如下:

              材料处理:称取新鲜的花菜、辣椒和蒜黄各2份,每份10 g。剪碎后分成两组,一组置于20 ℃、另一组置于﹣20 ℃条件下保存24 h。DNA粗提取:

              步骤一:将上述材料分别放入研钵中,各加入15mL研磨液(含洗涤剂和食盐),充分研磨。用两层纱布过滤,取滤液备用。

              步骤二:先向6只小烧杯中分别注入10 mL滤液,再加入20 mL体积分数为95%的冷酒精溶液,然后用玻璃棒缓缓地向一个方向搅拌,使絮状物缠绕在玻璃棒上。

              步骤三:取6支试管,分别加入等量的__________(填溶液名称及浓度)溶液溶解上述絮状物。

              步骤四::在上述试管中各加入4 mL__________试剂。混合均匀后,置于沸水中加热5 min,待试管冷却后比较溶液的颜色深浅,结果如下表:

              分析上述实验过程,回答下列问题:

              (1)该探究性实验课题的名称是__________________________________________。

              (2)步骤一中研磨液中洗涤剂的作用是_________________,食盐的作用是_________________。

              (3)步骤二中“缓缓地”搅拌,这是为了_________________,所加酒精溶液需冷却的原因之一是低温抑制_________________的活性,可以防止DNA降解。

              (4)上述实验中步骤三、步骤四的空缺依次分别为______________、______________。
              (5)根据实验结果,得出结论
              结论1:与20 ℃相比,相同实验材料在—20 ℃条件下保存,DNA的提取量较多。

              结论2:_____________________________________________________________。 

            • 3.

              关于DNA的实验,叙述正确的是( )

              A.DNA溶液与二苯胺试剂混合,沸水浴后生成蓝色产物
              B.PCR的每个循环一般依次经过变性—延伸—复性三步
              C.用兔的成熟红细胞可提取DNA
              D.用甲基绿、吡罗红将细胞染色,细胞质呈绿色,细胞核呈红色
            • 4. 下列是“肝脏细胞DNA粗提取”实验的两个关键操作步骤,相关叙述错误的是( )

              A.步骤1中,加入柠檬酸钠缓冲液的目的是维持pH的稳定
              B.步骤1中,冰浴处理的主要原理是低温下DNA水解酶容易变性
              C.步骤2中,异戊醇的作用可能是使与DNA结合的蛋白质因变性而沉淀
              D.步骤2中,离心后应取上清液,因为DNA在2 mol·L-1NaCl溶液中溶解度比较大
            • 5.

              了获得较多、较纯、较完整的甜菜总DNA,科研人员比较了A方法(通过CTAB裂解细胞,并与蛋白质形成复合物)、B方法(通过SDS裂解细胞释放核DNA,使蛋白质变性)、C方法(通过高盐沉淀蛋白质)从嫩叶、块根中提取总DNA的效果,主要实验步骤和相关检测结果如下,其中氯仿-异戊醇不溶于水且密度均大于水,DNA不溶于氯仿-异戊醇,蛋白质等溶于氯仿-异戊醇。分析回答:

              ①将液氮冷冻的组织研磨成粉末

                          ↓

              ②分别用A、B、C三种不同方法处理

                          ↓

              ③DNA粗提液在65℃水浴保温60min,搅拌均匀

                          ↓

              ④加氯仿-异戊醇,离心取____________?,加冷酒精,收集沉淀

                          ↓

              ⑤加入RNA酶,37℃水浴保温20min,重复步骤④

                          ↓

              ⑥将沉淀室温干燥后,溶于超纯水中,-20℃保存备用


              结果检测

              组织

              方法

              组别

              OD260/OD230

              OD260/OD280

              得率/μg·mg-1

              嫩叶

              A方法

              A1

              1.970

              1.821

              0.105

              B方法

              B1

              1.973

              1.719

              0.096

              C方法

              Cl

              1.647

              1.568

              0.082

              块根

              A方法

              A2

              1.888

              1.888

              0.029

              B方法

              B2

              1.811

              1.682

              0.030

              C方法

              C2

              1.376

              1.320

              0.020


              注:①纯净的DNA样品OD260/OD230值约为2.0,过低表明小分子物质残留较多;
              ②纯净的DNA样品OD260/OD280值约为1.8,若比值大于1.8表示存在RNA残留,若小于1.8表示存在蛋白质残留。

              ③得率是指每毫克组织所提取的DNA量。

              (1)本实验不选择哺乳动物血液为实验材料的原因是_________________________.

              (2)步骤③将DNA粗提液在65℃水浴保温60min的目的是_________________。步骤④“? ”表示__________________________。步骤⑤中加RNA酶的作用是_______________。

              (3)影响DNA纯度的物质主要有______________。提取的DNA中RNA残留较多的方法是______________。以嫩叶为材料提取DNA的得率较高,原因是______________。

            • 6.
              下列有关实验及显色结果的叙述,正确的是(  )
              A.水浴加热条件下,蔗糖与斐林试剂发生作用生成砖红色沉淀
              B.沸水浴条件下,脱氧核苷酸与二苯胺发生作用呈现蓝色
              C.常温条件下,蛋白质与双缩脲试剂发生作用呈现紫色
              D.常温条件下,核糖核酸与甲基绿作用呈现绿色
            • 7.
              再利用鸡血进行“DNA的粗提取与鉴定”的实验中,下列相关叙述正确的是(  )
              A.洗涤剂能瓦解细胞膜并增加DNA在NaCl溶液中的溶解度
              B.用蒸馏水将NaCl溶液浓度调至0.14mol/L,除去析出物
              C.将丝状物溶解在2mol/LNaCl溶液中,加入二苯胺试剂即成蓝色
              D.通过调节NaCl溶液的浓度或加入木瓜蛋白酶,都可以去除部分杂质
            • 8.
              下列有关生物技术实践应用的叙述,正确的是(  )
              A.固定化酶技术在多步连续催化反应方面优势明显
              B.牛肉膏蛋白胨培养基是常用的细菌基础培养基,可用高压蒸汽灭菌法灭菌
              C.相同pH时,加酶洗衣粉洗涤效果好于普通洗衣粉
              D.向鸡血细胞中加入冷却的95%的酒精,可以获得无杂质的DNA
            • 9. 下列可以鉴定出分解尿素的细菌的方法是
              A.培养基中加入酚红指示剂   
              B.培养基中加入二苯胺试剂
              C.培养基中加入苏丹Ⅲ试剂   
              D.培养基中加入双缩脲试剂
            • 10.

              某生物兴趣小组在学习了DNA的粗提取和鉴定实验后,尝试开展RNA的粗提取和鉴定实验。通过查阅资料,制订了以下的实验方案:

              【实验课题】酵母RNA的提取和鉴定

              【实验目的】1.从酵母中提取RNA;2.鉴定RNA。

              【实验原理】微生物是工业上大量生产RNA的原料,其中以酵母尤为理想,因为酵母核酸中主要是RNA,DNA很少,菌体易收集,RNA易分离。RNA不溶于乙醇和无水乙醚。利用稀碱法(稀碱能使细胞壁溶解)或高盐法(高浓度的盐改变细胞膜的通透性)来释放RNA。RNA水解液(加硫酸、加热)+苔黑酚-FeCl3试剂加热直到沸腾1分钟,会呈现墨绿色。

              【实验材料】干酵母粉、离心机、烧杯、试管、玻璃棒等;0.2%氢氧化钠、95%乙醇、无水乙醚、乙酸、10%硫酸溶液、苔黑酚-FeCl3试剂等。

              【实验步骤】

              ①称6克干酵母

              ②加0.2%氢氧化钠45mL,沸水加热20分钟,搅拌,后加乙酸7滴

              ③离心10分钟后取上清液

              ④边搅拌边缓慢加95%乙醇并静置10分钟

              ⑤离心后先用95%乙醇洗两次,再用无水乙醚洗两次

              ⑥获得RNA粗制品

              ⑦RNA鉴定

              请根据实验方案,思考并回答下列问题:

              (1)酵母菌细胞中含有RNA的结构有细胞核、                   。酵母菌也是便于用来研究细胞呼吸不同方式的好材料,理由是             

              (2)实验步骤⑤中,离心后取     用乙醇、无水乙醚进行洗涤。

              (3)RNA提取过程要注意温度的控制,在20~70℃的温度范围内停留的时间不能太长,其原因是     

              (4)稀碱法提取RNA须在沸水浴中进行的目的,一是     ,二是     ,以便获得更多更纯净的RNA。

              (5)若用花椰菜来提取DNA,可用       瓦解细胞膜,然后充分研磨,实验中研磨速度要     

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