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            • 1. 对基因进行编辑是生物学研究的重要手段,如图是对某生物B基因进行定点编辑的过程,该过程中用sgRNA可指引核酸内切酶Cas9结合到特定的切割位点,相关说法正确的是(    )
              A.通过破坏B基因后生物体的功能变化可推测B基因的功能
              B.基因定点编辑前需要设计与靶基因部分序列完全配对的sgRNA
              C.核酸内切酶Cas9可断裂核糖核苷酸之间的化学键
              D.被编辑后的B基因因不能转录而无法表达相关蛋白质
            • 2. 如图表示转基因烟草的培育过程.请据图回答:
              (1)图示过程将外源基因导入受体细胞的方法是 ______ ,若将外源基因导入动物细胞,目前采用最多、最有效的是 ______ 技术.
              (2)为便于鉴别受体细胞中是否含有外源基因,携带外源基因的质粒上应有 ______ ,还应有 ______ ,以利于外源基因的表达.
              (3)该过程中用到的植物细胞工程技术是 ______ ,这项技术应在 ______ 条件下进行,依据的生物学原理是 ______
              (4)外源基因的检测首先要采用DNA分子杂交技术检测 ______ ,其次采用分子杂交技术检测 ______ ,最后通过抗原-抗体杂交检测 ______
            • 3. 植酸酶能提高饲料中磷的利用率,减少磷随畜禽粪便排出量,进而降低环境污染. 科学家试图将黑曲霉植酸酶基因(phyA)转入猪细胞中,以培育出转植酸酶基因猪.如图为实验过程中基因表达载体的构建过程,图中A、A1,B、B1表示引物,NheⅠ(GCTAGC),XhoⅠ(GTCGAG)为限制酶.请问答.

              (1)实验室通用是利用从黑曲霉细胞中提取的RNA,再通过 ______ 等技术形成 phyA对应的cDNA,从基因结构分析,这一cDNA比黑曲霉细胞中的phyA少 ______ 等结构.
              (2)由图可知,科学家首先将黑曲霉植酸酶基因phyA与猪腮腺分泌蛋白基因信号肽基因 (ps)拼接在一起,其目的是 ______ .实验室中,过程②(解链)一般可通过 ______ 的方法完成,利用 ______ 将这两个DNA片段连接起来.
              (3)限制酶X ho I切割DNA形成的黏性末端可以表示为 ______ .过程④中同时利用Nhe I酶和Xho I酶处理目的基因和运载体,其主要优点是 ______
              (4)研究中需要将重组质粒导入 ______ ,再运用胚胎工程技术培育获得转基因猪,选取这类细胞作为目的基因的受体细胞的主要依据是 ______
            • 4. 如图为某转基因小鼠培育过程示意图,①~⑥表示相关过程.请回答:

              (1)过程①注射的A物质是 ______ ,目的是使供体母鼠 ______
              (2)过程③把目的基因和运载体连接需要在 ______  的催化下完成,过程④常用的方法是 ______
              (3)取自公鼠附睾中的精子需放入人工配置的 ______  中培养一段时间后,才可进行体外受精.
              (4)图中过程⑥称为 ______ ,为使代孕母鼠与供体母鼠生殖器官的生理变化相同,此前需对代孕母鼠作 ______  处理.
              (5)蛋白质水平检测目的基因的表达通常采用的方法是 ______ .采用胚胎分割移植的方法可获得较多基因组成相同的转基因小鼠,操作时需选择发育到 ______
              或囊胚期的胚胎进行.若选用囊胚期的胚胎,操作过程需要特别注意是 ______
              (6)若通过上述操作获得的蛋白质,不完全符合人类的需要,则需要通过 ______ 或基因合成,对现有蛋白质进行改造.
            • 5. 材料一:人类可利用转基因番茄作为生物反应器生产人胰岛素.所用的人胰岛素基因是依据植物“偏爱”的密码子来设计所含的密码子,通过人工合成若干DNA片段,拼接而成,并且在胰岛素﹣COOH端加上KDEL内质网滞留序列,避免胰岛素在植物细胞中的降解.将该基因置于果实专一性启动子的驱动之下通过农杆菌介导的方法转入番茄中,在番茄的果实中表达人胰岛素.
              材料二:T4溶菌酶在温度较高时易失去活性,科学家对编码T4溶菌酶的基因进行改造,使其表达的T4溶菌酶的第3位的异亮氨酸变为半胱氨酸,在该半胱氨酸与第97位的半胱氨酸之间形成了一个二硫键,提高了T4溶菌酶的耐热性.
              (1)材料一中基因工程操作是采用 方法获得目的基因的.获得的人胰岛素基因与人体细胞中胰岛素基因中编码氨基酸的碱基序列不同,但两者所编码的蛋白质中氨基酸序列相同,这是因为密码子具有 .要想在体外获得大量该目的基因的片段,可以采用 技术.
              (2)根据上述描述,转基因操作时所用的载体是 ,载体上的 可以转移至受体细胞,并且整合到受体细胞染色体的DNA上.
              (3)材料二属于工程范畴.该工程是指以分子生物学相关理论为基础,通过基因修饰或基因合成,对 进行改造,或制造一种 的技术.
            • 6. 某研究所利用基因工程、胚胎工程等技术获得能产生人凝血因子的转基因山羊.回答下列问题:
              (1)基因工程的基本操作流程中,当获取目的基因后,在将其中导入受体细胞前需要进行一个重要的操作步骤,即构建 ,该步骤使用的两种工具酶分别是 .
              (2)从公羊体内采集的精子需经过 处理,才能在体外与卵细胞结合形成受精卵.常用 法将目的基因导入受精卵中,受精卵在体外培养至 阶段时再移植到母羊子宫中.
              (3)利用分子杂交技术可检测转基因山羊细胞中的人凝血因子是否转录出了 (填“tRNA”、“mRNA”或“rRNA”);利用针对 的抗体进行抗原﹣抗体杂交,可检测目的基因是否翻译.
            • 7. 基因疫苗指的是DNA疫苗,是将编码外源性抗原的基因插入到含真核表达系统的质粒上,然后将质粒直接导人人或动物体内,让其在宿主细胞中表达抗原蛋白,诱导机体产生免疫应答.回答下列问题:
              (1)要获得编码抗原的基因,首先要提取出病原体的DNA或RNA,并将RNA ,要大量获得表达特异抗原的基因,可采用 方法.
              (2)将抗原基因插入质粒的过程,即构建基因表达载体的过程,通常一个基因表达载体的组成,除了抗原基因(目的基因)外,还有 
              (3)一般将重组质粒利用的方法送人受体细胞,进入细胞核并表达抗原蛋白.
              (4)与传统疫苗相比,基因疫苗不仅能在宿主体内较长时间存在,还可以诱导产生(填“体液免疫”“细胞免疫”或“体液免疫和细胞免疫”).
              (5)一个质粒载体可插人多个抗原基因组成多价疫苗,导人这样的疫苗可达到 的目的.
              (6)基因疫苗是在基因治疗技术的基础上发展而来的.基因治疗是把 导入病人体内,使该基因表达产物发挥功能,从而达到治疗疾病的目的.
            • 8. 2015年,屠呦呦因发现青蒿素治疗疟疾的新疗法获奖.工业上青蒿素一般从青蒿植株中提取,产量低,价格高.基因工程及细胞工程等为培育出高青蒿素含量的青蒿提供了思路.科学家先通过紫外线处理大量青蒿幼苗后,偶然发现一株高产植株.通过基因测序发现该高产植株控制青蒿素合成相关的一种关键酶的基因发生了突变.
              (1)提取了高产植株的全部DNA后,要想快速大量获得该突变基因可以采用PCR技术,该技术的原理是 
              (2)如果用青蒿某个时期mRNA反转录产生的双链cDNA片段,用该双链cDNA进行PCR扩增,进行了30个循环后,理论上可以产生约为 个DNA分子,该双链与载体连接后储存在一个受体菌群中,这个受体菌群就叫做青蒿的 ,获得的cDNA与青蒿细胞中该基因碱基序列 (填“相同”或“不同”).
              (3)将获得的突变基因导入普通青蒿之前,先构建基因表达载体,图l、2中箭头表示相关限制酶的酶切位点.请回答:

              用图中的质粒和外源DNA构建重组质粒,不能使用SmaⅠ切割,原因是 ,构建好的重组质粒在其目的基因前要加上特殊的启动子,启动子是 识别结合位点.
              (4)检测目的基因是否表达出相应蛋白质,应采取 技术.目的基因导入组织细胞后,通过 技术培育出青蒿幼苗.
            • 9. 科学家将含人的α﹣胰蛋白酶基因的DNA片段,注射到羊的受精卵中,该受精卵发育的羊能分泌含α一抗胰蛋白质的奶.这一过程没有涉及(  )
              A.DNA以其一条链为模板合成RNA
              B.DNA按照碱基互补配对原则自我复制
              C.RNA以自身为模板自我复制
              D.按照RNA密码子的排列顺序合成蛋白质
            • 10. 如图表示用胸苷(TdR)双阻断法使细胞周期同步化,其中A表示正常的细胞周期,G1 , S,G2 , M期依次分别为10h,7h,3.5h,1.5h;B表示经第一次阻断,细胞都停留在S期;C表示洗去TdR恢复正常的细胞周期;D表示经第二次阻断,细胞均停留在G1/S交界处.下列说法正确的是(    )
              A.实验中需要对细胞解离,漂洗,染色,制片,以便于显微镜下观察
              B.胸苷(TdR)很可能是通过阻碍核糖体与mRNA结合发挥作用的
              C.第二次阻断应该在第一次洗去TdR之后的7h到15h之间
              D.若改用秋水仙素处理,则细胞会停留在G2/M交界处
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