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            • 1.
              目前已成功利用基因工程技术培育出马铃薯新品种。请根据教材中知识回答下列问题:
              (1)马铃薯易患的多种疾病,可导致其产量下降。通过导入抗病基因,并使该基因表达,可以提高马铃薯产量,基因工程中使用最多的抗病基因是病毒外壳蛋白基因和 ______ 。
              (2)由于受体细胞不同以及将目的基因导入受体细胞的方法不同,因此基因表达载体的构建 ______ (填
              “完全相同”或“有所差别”)。
              (3)马铃薯是双子叶植物,常用 ______ 法将目的基因导入马铃薯体细胞中。将病毒外壳蛋白基因转入普通马铃薯植株细胞内,并成功表达的过程,在基因工程中称为 ______ 。
              (4)科学家还培育出了抗除草剂转基因马铃薯,其设计思路是,修饰除草剂作用的靶蛋白,使其对除草剂, ______ (填“敏感”或“不敏感”)或使靶蛋白过量表达植物吸收除草剂后仍能 ______ 。
              (5)将目的基因导入受体细胞后,还需对转基因植物进行目的基因的检测与鉴定,一般要进行 ______ 水平和个体水平的鉴定。
            • 2.
              阅读以下资料,回答问题:
              多酚氧化酶是引起苹果果肉褐变的主要酶类。研究人员通过转基因技术,将相关目的基因导入苹果细胞内,该目的基因转录的产物RNA能与苹果细胞内源mRNA序列特异性结合,从而减少多酚氧化酶基因的表达,延缓褐变。
              (1)构建基因表达载体需用同种的 ______ 酶对含有目的基因的DNA和运载体进行酶切;基因表达载体包含目的基因、启动子、终止子和 ______ 等;将基因表达载体导入苹果细胞,最常用的方法为 ______ 。
              (2)要将转基因苹果细胞培育成幼苗,常用的细胞工程技术是 ______ ,该技术的原理是 ______ ,使用的培养基中除了含有营养物质外,还必须含有一定比例的 ______ 等植物激素。
              (3)若在个体生物学水平上鉴定转基因苹果是否培育成功,则鉴定的实验思路是 ______ 。
            • 3. 如图表示转基因烟草的培育过程.请据图回答:
              (1)图示过程将外源基因导入受体细胞的方法是 ______ ,若将外源基因导入动物细胞,目前采用最多、最有效的是 ______ 技术.
              (2)为便于鉴别受体细胞中是否含有外源基因,携带外源基因的质粒上应有 ______ ,还应有 ______ ,以利于外源基因的表达.
              (3)该过程中用到的植物细胞工程技术是 ______ ,这项技术应在 ______ 条件下进行,依据的生物学原理是 ______
              (4)外源基因的检测首先要采用DNA分子杂交技术检测 ______ ,其次采用分子杂交技术检测 ______ ,最后通过抗原-抗体杂交检测 ______
            • 4. 植酸酶能提高饲料中磷的利用率,减少磷随畜禽粪便排出量,进而降低环境污染. 科学家试图将黑曲霉植酸酶基因(phyA)转入猪细胞中,以培育出转植酸酶基因猪.如图为实验过程中基因表达载体的构建过程,图中A、A1,B、B1表示引物,NheⅠ(GCTAGC),XhoⅠ(GTCGAG)为限制酶.请问答.

              (1)实验室通用是利用从黑曲霉细胞中提取的RNA,再通过 ______ 等技术形成 phyA对应的cDNA,从基因结构分析,这一cDNA比黑曲霉细胞中的phyA少 ______ 等结构.
              (2)由图可知,科学家首先将黑曲霉植酸酶基因phyA与猪腮腺分泌蛋白基因信号肽基因 (ps)拼接在一起,其目的是 ______ .实验室中,过程②(解链)一般可通过 ______ 的方法完成,利用 ______ 将这两个DNA片段连接起来.
              (3)限制酶X ho I切割DNA形成的黏性末端可以表示为 ______ .过程④中同时利用Nhe I酶和Xho I酶处理目的基因和运载体,其主要优点是 ______
              (4)研究中需要将重组质粒导入 ______ ,再运用胚胎工程技术培育获得转基因猪,选取这类细胞作为目的基因的受体细胞的主要依据是 ______
            • 5. 如图为某转基因小鼠培育过程示意图,①~⑥表示相关过程.请回答:

              (1)过程①注射的A物质是 ______ ,目的是使供体母鼠 ______
              (2)过程③把目的基因和运载体连接需要在 ______  的催化下完成,过程④常用的方法是 ______
              (3)取自公鼠附睾中的精子需放入人工配置的 ______  中培养一段时间后,才可进行体外受精.
              (4)图中过程⑥称为 ______ ,为使代孕母鼠与供体母鼠生殖器官的生理变化相同,此前需对代孕母鼠作 ______  处理.
              (5)蛋白质水平检测目的基因的表达通常采用的方法是 ______ .采用胚胎分割移植的方法可获得较多基因组成相同的转基因小鼠,操作时需选择发育到 ______
              或囊胚期的胚胎进行.若选用囊胚期的胚胎,操作过程需要特别注意是 ______
              (6)若通过上述操作获得的蛋白质,不完全符合人类的需要,则需要通过 ______ 或基因合成,对现有蛋白质进行改造.
            • 6. 如表是几种限制酶识别序列及其切割位点,图1、图2中标注了相关限制酶的酶切位点,其中切割位点相同的而不重复标注.请回答下列问题.
              限制酶 BamHⅠ BclⅠ Sau3AⅠ HindⅢ
              识别序列及切割位点

              (1)用图中质粒和目的基因构建重组质粒,应选用限制酶为 ______ ,酶切后的载体和目的基因片段通过 ______ 酶作用后获得重组质粒.
              (2)若BamHⅠ酶切的DNA末端与BclⅠ酶切的DNA末端可直接被DNA连接酶连接,原因是 ______ ,这两种酶 ______ (选填“都能”“都不能”或“只有一种能”)切开连接的部位,原因是 ______
              (3)若用Sau3AⅠ切图1质粒最多可能获得 ______ 种大小不同的DNA片段.
              (4)为了筛选出转入了重组质粒的大肠杆菌,应在筛选平板培养基中添加 ______ ,平板上长出的菌落,常用PCR鉴定,所用的引物组成为图2中 ______
            • 7. 预防乙肝最有效的途径是接种疫苗.将乙肝表面抗原基因转移到植物细胞内可生产乙肝疫苗.回答下列问题.
              (1)欲在短时间内大量扩增乙肝表面抗原基因.通过 ______ (填写中文名称)技术,其原理是 ______ ,利用该技术扩增乙肝表面抗原基因的前提是 ______
              (2)将目的基因导入植物细胞常用农杆菌转化法,此外采用 ______ 法十分简便经济.用抗原--抗体杂交技术检测植物细胞是否成功合成乙肝表面抗原蛋白,若有 ______ 出现,表明目的基因已形成蛋白质产品.
              (3)将乙肝表面抗原基因导入植物细胞后,采用 ______ 技术获得愈伤组织,该技术需在 ______ 条件下进行.
              (4)乙肝疫苗在2~8℃条件下保存,其不宜在常温下保存最可能的原因 ______
            • 8. 回答下列与基因工程相关的问题:
              (1)科学家利用基因工程手段培育抗干旱的转基因烟草.获得大量抗干旱基因可用PCR技术来扩增,需要用到的酶有 ______ .在培育转基因抗干旱烟草过程中,常需将重组质粒导入土壤农杆菌,该操作过程中首先必须用 ______ ;然后将 ______ 在缓冲液中混合培养完成转化过程.
              (2)该抗干旱的转基因烟草中含有抗除草剂基因,作为标记基因的抗除草剂基因用于检测目的基因是否导入成功的原理是 ______ .经检测成功后,抗除草剂基因已经没有用途,若继续留在植物体内,则可能会造成的安全性问题是 ______
              (3)科学家尝试使用Cre/loxP位点特异性重组系统,在检测目的基因导入成功后,删除转基因植物细胞内的抗除草剂基因,有关过程如图所示:

              可通过Cre酶处理,质粒中的两段loxP序列被切开,可得到如上图右侧的两个DNA分子.抗除草剂基因不再表达的原因是 ______ .删除除草剂基因,所以Cre酶可改变质粒产生的结果就相当于可遗传变异中的 ______
            • 9. 2014年埃博拉病在非洲蔓延,我国派出医疗队首次在境外组建医院,帮助非洲防控埃博拉疫情.
              (1)研究表明,埃博拉病毒侵入机体后,通过靶向感染,破坏吞噬细胞等,使其不能暴露该病毒的 ______ ,以致感染信息不能呈递给 ______ ,从而无法正常激活细胞免疫和体液免疫应答过程,导致机体对该病毒的 ______ 免疫功能下降.因此,病毒在体内快速增殖、致病.
              (2)用大肠杆菌生产埃博拉病毒的某蛋白(目的蛋白)时,因埃博拉病毒不是逆转录病毒,可先将埃博拉病毒的RNA与逆转率病毒的RNA重组,在 ______ 的作用下合成 ______ .再用 ______  切取该目的蛋白的基因,与质粒构建 ______ ,同时用 ______ 处理大肠杆菌使其成为感受态细胞.
              (3)用埃博拉病毒的某种蛋白免疫小鼠,通过 ______ 技术获得杂交瘤细胞,用于生产单克隆抗体治疗该病.单克隆抗体的优点是 ______
            • 10. 如图为吉林大学农学部培育出世界首例赖氨酸转基因克隆奶牛“织女”的大致过程,请回答:

              (1)实施基因工程的核心操作步骤是 ______ ,实现②过程的常用方法是 ______
              (2)获得黑白花奶牛成纤维细胞后,利用 ______ 技术扩增细胞,培养液中除了提供必要的营养物质之外,还需要添加 ______ 等天然成分.
              (3)获得重组细胞④时,以去核卵细胞为受体细胞的原因是 ______
              (4)将早期胚胎移入代孕母牛体内之前,需要对代孕母牛进行 ______ 处理,目的是 ______
              (5)要通过⑤过程获得较多的遗传同质早期胚胎,应采用 ______ 技术,操作时应选择发育至 ______ 期的胚胎,并将内细胞团 ______ .“织女”牛⑦进入泌乳期后,可以通过分泌乳汁来生产人类所需的赖氨酸,因而称为 ______
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