下表是基因工程中有关基因操作的名词及对应的内容，正确的组合是

现有一长度为1000碱基对（bp）的DNA分子，用限制性核酸内切酶EcoRI酶切后得到的DNA分子仍是1000bp，用KpnI单独酶切得到400bp和600bp两种长度的DNA分子，用EcoRI、KpnI同时酶切后得到200bp和600bp两种长度的DNA分子。该DNA分子的酶切图谱正确的是

29、正确表示基因操作“四步曲”的是(    ) 

15、能够使植物表达动物蛋白的育种方法是（　　）

将抗虫基因导入玉米的体细胞中，培育成抗虫玉米新品种，该育种方法属于（    ）

已知硅酸盐细菌在无氮培养基、钾细菌培养基及硅酸盐细菌培养基上均能生长。表1为无氮培养基的配方，表2是每种培养基上每个稀释度的菌落数及菌落直径。请回答下列问题：

(1)表1从物理性质上看属于________培养基，按用途划分，属于________培养基。

(2)硅酸盐细菌能在无氮培养基上生长，推测该细菌具有________功能。

(3)为统计硅酸盐细菌的数目，应采用________法进行接种，该方法的所有操作都应在________附近进行。表2中，稀释度为________时，统计的结果较为可靠。

(4)为检测培养基灭菌是否彻底，应进行的操作是________。由表2中的数据得出，用________培养基分离硅酸盐细菌的效果最好。

   [生物——选修3：现代生物科技专题]

如图所示为培育二倍体转基因抗虫棉的两种思路，其中EcoRⅠ、SmaⅠ、BamHⅠ为三种限制酶，EcoRⅠ和BamHⅠ切割DNA形成黏性末端，SmaⅠ形成平末端。(箭头指向为对应的酶切位点。)回答下列问题：

(1)与思路2相比，思路1的最大优点是________。

(2)分析图可知，不宜选择SmaⅠ获取目的基因，理由是________；选择________酶，可避免目的基因和质粒的自身环化。

(3)基因工程获得抗虫棉的核心步骤是________。

(4)图①过程得到的重组质粒，除了图中标出的特殊DNA片段外，还应有________；将重组质粒导入植物细胞采用最多的方法是________，如采用该方法，则图中所用的质粒应为________。

(5)检测目的基因是否翻译的方法是________。

请根据以上图表回答下列问题。

（1）在采用常规PCR方法扩增目的基因的过程中，使用的DNA聚合酶不同于一般生物体内的DNA聚合酶，其最主要的特点是                          。

（2）PCR过程中退火（复性）温度必须根据引物的碱基数量和种类来设定。表1为根据模板设计的两对引物序列，图2为引物对与模板结合示意图。请判断哪一对引物可采用较高的退火温度？_______________。

（3）图1步骤③所用的DNA连接酶对所连接的DNA两端碱基序列是否有专一性要求？     。

（4）为将外源基因转入马铃薯，图1步骤⑥转基因所用的细菌B通常为               。

（5）对符合设计要求的重组质粒T进行酶切，假设所用的酶均可将识别位点完全切开，请根据图1中标示的酶切位点和表2所列的识别序列，对以下酶切结果作出判断。

①采用EcoRⅠ和PstⅠ酶切，得到________种DNA片断。

②采用EcoRⅠ和SmaⅠ酶切，得到________种DNA片断。

（1）图中②所示的生物技术的供体细胞一般都选用传代10代以内的细胞，这是因为________。

（2）重组细胞培养成囊胚过程所用的培养液与植物组织的培养基在成分上的主要区别是前者必须含有________。重组细胞培养过程中所需要的基本条件包括充足的营养、________、________、气体环境。

（3）④所示的生物技术名称是________，若想得到大量健康的胰岛B细胞的胰岛素基因，可利用________技术。

（4）图示方法与一般的异体移植相比最大的优点是________。该种基因治疗所属类型为________。