[生物——选修3：现代生物技术专题]

  （1）若甲细胞的膜蛋白用红色荧光染料标记，乙细胞的膜蛋白用绿色荧光染料标记，结果丁细胞两种颜色荧光均匀分布，说明了               。

  （2）若上图表示植物体细胞杂交的部分过程，欲将丁细胞培育成植株，可选用          技术，这一技术的两个关键步骤是              。丁细胞经脱分化可产生胚状体，胚状体与愈伤组织在结构上的主要区别在于愈伤组织的细胞排列疏松无规则，是一种高度液泡化的薄壁细胞，胚状体与

      发育形成的胚有类似的结构，即具有胚芽、胚轴和胚根。

  （3）若上图表示制备单克隆抗体的部分过程，甲细胞为小鼠的骨髓瘤细胞，则乙细胞为            。在分离乙细胞之前，应对小鼠进行的处理是         。过程①区别于植物细胞常用的诱导剂是            ，细胞融合实验完成后，融合体系中除含有未融合的细胞和杂交瘤细胞外，可能还有                                ，体系中出现多种类型细胞的原因是                                   。过程②可利用特定的选择性培养基进行筛选，筛选得到的丁细胞还需进行               和抗体检测，经多次筛选，就可获得足够数量的能分泌所需抗体的细胞。

如图为细胞融合的简略过程，请据图回答：

( 1)若A、B是植物细胞，在细胞融合之前已用___________________处理，除去_____________；A、B到细胞C的过程中，常用的物理方法是__________________________。融合完成的标志是_______________.

(2)若A、B是植物细胞，则形成的D细胞还应用______________技术把D培养成植株。

(3)若A、B是动物细胞，一般用___________________（酶）使其分散开来，A、B到C的过程中，常用的不同于植物细胞的手段是____________________，所形成的D称为____________________。

(4)若该过程是制备单克隆抗体，A为小鼠B淋巴细胞，那么，在获得此细胞之前，小鼠已被注射了___________，注射后小鼠身体产生了相应的____________生成了___________。图中B为_________________。

(5)若该过程仍是制备单克隆抗体，在A、B到C的过程中，所形成的C有______种，（只考虑细胞两两融合）用来培养的D的细胞应该是_____________，它有什么特点？________________________________________________________________，获得D后，常用的培养方法是______________和________________。

科研人员利用野生型二倍体马铃薯（2n=24）和抗青枯病的二倍体茄子（2n=24）进行体细胞杂交，培育抗青枯病马铃薯。

（1）自然界中马铃薯和茄子间存在___________，难以通过有性生殖产生后代。

（2）科研人员从PCR鉴定为阳性的杂种植株中选出杂种植株B，用流式细胞仪进一步测定二倍体马铃薯、二倍体茄子和杂种植株B的DNA相对含量结果如下图。

依据上述结果预测，马铃薯—茄子四倍体融合细胞的DNA相对含量约为___________。据图中结果推测，杂种植株B应为___________倍体，判断依据是______________________。

（3）取杂种植株B的根尖制成临时装片，进一步从染色体水平进行鉴定。在显微镜下找到有丝分裂_________期的细胞，观察并统计来自茄子和马铃薯的染色体数目，若________  _          __，则支持上述推测。

（4）为确定杂种植株是否符合育种要求，还需对其进行___________检测。

⑴图中①过程用到的酶是______，所形成的B叫做 ______。

⑵②过程常用______处理农杆菌，使之成为______细胞，利于完成转化过程．

⑶图中③过程需要用到的激素是______。

⑷在分子水平上，可采用______的方法来检测转基因草莓果实提取液中有无相应的抗原．

B、野生马铃薯品种的植株具有较强的抗病、抗虫、抗盐碱、抗寒能力，但块茎不能食用．俄、德、芬兰专家共同做实验研究，用野生马铃薯与马铃薯的体细胞进行杂交，培育出了生活能力强的杂交系马铃薯．

⑴专家在实验中，需用到的酶主要有______和______等。

⑵专家在实验中，用于诱导融合使用的化学试剂是______。

⑶对于农民，种植杂交系马铃薯除可获得较高的收成外，还有什么优点？(要求写出两点) ______。

【选修3】《现代生物科技专题》

（1）构建基因工程表达载体时，用不同类型的限制酶切割产生的DNA片段末端通常有两种形式——________和____________。若要在限制酶切割目的基因和质粒后使其直接进行连接，则应选择________(相同或不同)限制酶进行切割。

（2）利用大肠杆菌生产人胰岛素时，构建的表达载体含有人胰岛素基因及其启动子等，其中启动子的作用是：它是                       的位点，有了它才能驱动基因转录出mRNA，最终获得所需要的蛋白质。在用表达载体转化大肠杆菌时，常用________处理大肠杆菌，以利于表达载体进入；为了检测胰岛素基因是否转录出了mRNA，可用标记的         基因片段作探针与mRNA杂交，该杂交技术称为________。为了检测胰岛素基因转录的mRNA是否翻译成人胰岛素，常用______________技术。

（3）如果要将某目的基因通过农杆菌转化法导入植物细胞，先要将目的基因插入农杆菌Ti质粒的________中，然后用该农杆菌感染植物细胞，通过DNA重组将目的基因插入植物细胞的________上。

Ⅱ．请根据材料回答下列问题。

单克隆抗体在医疗、诊断等方面发挥着越来越重要的作用。英国科学家米尔斯坦和柯勒设计了一个用被免疫的B淋巴细胞制备单克隆抗体的实验，图示其实验流程，请回答。

（1）a是               ，b是                ①过程是                      ，②表示在              上进行培养。③过程包括了体外培养和                    。

（2）制备单克隆抗体时，选择B淋巴细胞的原因是                             。

（3）如何判断经过②后的细胞就是杂交细胞                                   。   

（4）诱导动、植物细胞融合常用的一种化学诱导剂是                    ，植物体细胞杂交之前还需用                          去除细胞壁，植物体细胞杂交技术在一定程度上解决了杂交育种的                               问题。

(1)自然界中马铃薯和茄子间存在___________，难以通过有性生殖产生后代。

(2)科研人员将马铃薯和茄子的叶片用_______酶分解处理，获得有活力的原生质体。将马铃薯和茄子的原生质体融合，融合细胞在培养基中培养，培养基中需要加入_______，促进形成愈伤组织和再分化形成杂种植株。

(3)科研人员从PCR鉴定为阳性的杂种植株中选出杂种植株B，用流式细胞仪进一步测定二倍体马铃薯、二倍体茄子和杂种植株B的DNA相对含量结果如下图。

依据上述结果预测，马铃薯—茄子四倍体融合细胞的DNA相对含量约为___________。据图中结果推测，杂种植株B应为___________倍体，判断依据是___________。

(4)取杂种植株B的根尖制成临时装片，进一步从染色体水平进行鉴定。在显微镜下找到有丝分裂______期的细胞，观察并统计来自茄子和马铃薯的染色体数目，若______，则支持上述推测。

(5)为确定杂种植株是否符合育种要求，还需对其进行___________检测。

[生物——选修3：现代生物科技专题]

下图是利用现代生物技术改良植物品系的过程。

（1）请写出图中涉及的现代生物技术：________。

（2）①中细胞融合的原理是________，诱导其融合的常用化学诱导剂是________。

（3）融合后的原生质体经过________再生，进而经过③________形成愈伤组织。

（4）④过程的实质是________，某同学在操作时发现细胞只分裂而不分化出芽和根，可能原因是________。

（5）如最终获得的杂种植株需要通过制作人工种子的方法来大量繁殖，经④得到的________等材料用人工薄膜包装后可得到人工种子。

1．生物乙醇是以生物为原料生产的可再生能源。我国利用农作物废弃物（秸秆）生产乙醇，其技术流程为：纤维素酶分解→酵母菌发酵→蒸馏→成品。纤维素酶可以从能分解纤维素的细菌培养液中提取。某同学设计了从土壤中分离纤维索分解菌的实验流程：土壤取样→选择培养→梯度稀释→鉴别培养。请分析回答下列问题：

（1）最好选择       环境采集土样。

（2）配置培养基时，各种成分在熔化后分装前必须进行       ，接种前要进行       。

在整个微生物的分离和培养中，一定要注意在无菌条件下进行。在制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的倒平板操作时，平板冷凝后，应将平板       放置，这样做的目的是       。

（3）以下是A、B两种培养基配方：

A培养基配方：

B培养基配方：

如果要分离提纯土壤中的纤维素分解菌，应选择   （填编号）培养基配方，从功能看该培养基属于___   ____培养基。该培养基能增加样品中纤维素分解菌的浓度，其原理是                  。

（4）为了鉴别纤维素分解菌和进一步纯化菌种，可以在鉴别培养基中加入       ，将筛选获得的菌液稀释后用      法接种到鉴别培养基上，然后挑选产生     的菌落作为菌种进行扩大培养。

（5）乙醇是酵母菌的发酵产物，发酵时酵母菌直接利用的物质是               。

2.科学家从某些能无限增殖细胞的细胞质中分离出无限增殖调控基因（prG），该基因能激发许多动物细胞分裂，这为单克隆抗体的制备提供了更为广阔的前景。请回答下列问题：

（1）利用细胞融合技术制备单克隆抗体的过程中，促进动物细胞融合常用的诱导剂是       ，植物体细胞杂交在细胞融合之前要用           处理。

（2）利用细胞融合技术制备单克隆抗体时有两次筛选，第1次筛选的目的是       ，第2次筛选的目的是           。

（3）有人提出，可以直接通过基因工程导入该调控基因来制备单克隆抗体，其思路如图所示。请回答下列问题：

①．酶A是指       ，酶B是指       。

②．对已导入重组质粒的Ⅱ进行“检测”的目的是         ；题目中Ⅱ所指的细胞是       ，Ⅲ所9指的细胞具有的特点是           。

（4）也有人提出用细胞核移植技术构建重组细胞来生产单克隆抗体，试用相关的图示及文字表示该过程：（图中·和▲代表细胞核，○代表细胞质）

絮凝性细菌分泌的具有絮凝活性的高分子化合物，能与石油污水中的悬浮颗粒和有机物等形成絮状沉淀，起到净化污水的作用。为进一步提高对石油污水的净化效果，将絮凝性细菌和石油降解菌融合，构建目的菌株。其流程图如下,据图回答：

（1）溶菌酶的作用是_________________________。

（2）PEG的作用是_________________________。

（3）经处理后，在再生培养基上，未融合的A、B难以生长。图中AB融合菌能生长和繁殖的原因是_______________________________。

（4）目的菌株的筛选：筛选既能分泌具有絮凝活性的化合物，又能在含有_________的培养基上生长的AB融合菌，选择效果最好的最为目的菌株。

（5）为探究目的菌株不同发酵时间发酵液的絮凝效果，将目的菌株进行发酵培养，定时取发酵液，加入石油污水中：同时设置________________为对照组。经搅拌、静置各3分钟后，分别测定上层水样的石油浓度COD值（COD值越高表示有机物污染程度越高）,计算石油去除率和COD去除率，结果如下图。

（6）目的菌的种群增长曲线是_____________型。在40～44小时，发酵液对石油污水的净化效果最好，其原因是_________________。

【生物—选修3：现代生物科技专题】

   花椰菜易受黑腐病菌的危害而患黑腐病，野生黑芥则具有黑腐病的抗性基因。用一定剂量的紫外线处理黑芥原生质体可使其染色体片段化，并丧失再生能力。利用此原生质体作为抗性基因的供体与完整的花椰菜原生质体融合，可培育出抗黑腐病的杂种植株。请据下图所示流程图回答下列问题：

（1）过程①所做的处理是________。原生质体培养液中需要加入适宜浓度的甘露醇以保持一定的渗透压，其作用是________。

（2）过程②常用的诱导剂是________，融合后在显微镜下选取有________（填细胞器名称）的融合细胞，经过________再生，进而分裂和脱分化形成愈伤组织。愈伤组织经过________可形成丛芽等。

（3）愈伤组织还可生成[A]________，包裹人工种皮可制成人工种子。

（4）从杂种植株中筛选出高抗性个体的方法是________。