回答下列（一）、（二）小题。

(一）某研究小组欲用苹果汁为原料，利用发酵瓶制作果酒和果醋，请分析回答：

(1)将苹果汁放入发酵瓶，要预留约________的空间。为得到酒精和糖含量较高的果酒，可在果汁中加入一定比例的______。若发酵瓶内持续无气泡产生，则需加入更多的_______，使发酵作用尽快发生。

(2)变酸的果酒表面有一层醋杆菌形成的菌膜，若要在该菌膜中筛选高表达量的醋杆菌菌株，可通过获得_______的方法来分离筛选。若要统计获得菌种的数目，则常采用_________法。对获得的优质醋杆菌菌种常用划线法接种在固体培养基______上低温保存。

(3)下图是果酒和果醋的发酵装置，关于果醋发酵叙述错误的是_______

A.发酵前，瓶内酒—冰混合物的pH需调至7.0

B.发酵过程中，充气口要适时适量充气

C.发酵过程中，排气口排出醋酸发酵产生的CO₂

D.发酵完成后，出料口的pH值不再减少

 (二）请回答杂交瘤技术和单克隆抗体制备的有关问题。

(1)杂交瘤技术制备单克隆抗体时，利用一定的物质，如生物诱  导剂_____作介导，使经免疫的小鼠脾细胞与________细胞融合，筛选出融合的细胞再进行细胞的______培养，获得纯系细胞，同时还要进行________检验，以保证获得的是所需的特定杂交瘤细胞。

(2)有关杂交瘤细胞体外培养的叙述，正确的是________

A.用固体培养基培养          B.用滋养层细胞支持生长

C.能进行传代培养            D.需要对细胞进行研磨破碎获得产物

(3)现在欲利用基因工程技术生产单克隆抗体，科研小组将与抗体形成有关的关键基因通过噬菌体导人到受体细胞，该技术的核心步骤是______________,噬菌体是这些关键基因的___________。

下图为单克隆抗体制备流程示意图。

(1)单克隆抗体制备技术的基础是 ____________________________。

(2)细胞融合是随机的过程，在HAT培养基中培养，目的是______________________。在细胞培养过程中，培养液中需要添加无机盐，但要注意无机盐的____________________ ，以保证生命活动的正常进行。    

(3)为选育出能产生高特异性抗体的细胞，要将从HAT培养基上筛选出的细胞稀释到7～10个细胞／ml，每孔滴入0.1ml细胞稀释液，其目的是_______________ 。

(4)若用¹⁵N标记的氨基酸培养能产生单克隆抗体的细胞，放射性物质在细胞结构中出现的先后顺序是____________________________________________________。

A[选修l：生物技术实践]

请回答下列问题：

(1)从土壤中筛选纤维素分解菌时，需要在培养基中加入的特殊染料是________。某同学在纯化土壤中的细菌时，发现培养基上的菌落连成一片，最可能的原因是___________________________________________________________。

(2)制作泡菜时，为了缩短制作时间，有人还会在冷却后的盐水中加入少量陈泡菜液，加入陈泡菜液的目的是___________。从开始制作到泡菜质量最佳这段时间内，泡菜液逐渐变酸，这段时间内泡菜坛中乳酸菌和其他杂菌的消长规律是______________。

(3)腐乳制作有多种微生物参与，其中起主要作用的是______ __。豆腐发酵主要利用了微生物产生的_____________，通过发酵，豆腐中营养物质的种类增多，且更易于消化和吸收。

(4)有人想提取橘皮精油获取利润，一般提取橘皮精油的方法是_______法，为了提高出油率，需将柑橘皮干燥去水，并用______浸泡，浸泡时间为10h以上，这样压榨时不会滑脱。

(5)某橘农发现自家有一株橘树具有抗虫性状，欲利用花药离体培养技术大量繁殖，则应选择花粉发育至_______期的花药培养成功率最高。

B[选修3：现代生物科技专题]

图示方案为人们获得生物新品种的过程，请回答下列问题：

方案I、抗冻蛋白基因烟草细胞→抗冻烟草

方案Ⅱ、A基因全免疫过的B细胞→体外培养→单克隆抗体

方案III、人的生长激素基因牛的受精卵→早期胚胎受体母牛→转基因牛

(1)基因工程的核心步骤是_________。农杆菌上转化法中，根据农杆菌的特点，如果将抗冻蛋白基因插入到_________上，通过农杆菌的转化作用，就可以使目的基因进入植物细胞，并将其插入到植物细胞中____________上。

(2)推测方案Ⅱ中A基因所起的作用是________，请写出该方案获得的细胞中遗传信息传递时所遵循的法则_____________。   

(3)方案III中的转基因牛可以通过分泌乳汁来生产人的生长激素。这需要将人的生长激素基因与________的启动子等调控组件重组在一起。该方案中的早期胚胎在移植入受体母牛子宫之前，必须对胚胎进行性别鉴定一般是取处于______时期的______细胞进行检测。

①骨髓瘤细胞可以产生抗体，但不能无限增殖

②骨髓瘤细胞可以无限增殖，但不能产生抗体

③B淋巴细胞可以产生抗体，但不能无限增殖

④B淋巴细胞只有与骨髓瘤细胞融合才能产生抗体

[生物—选修1：生物技术实践]

图示为稀释涂布平板法的操作流程。请回答下列问题：

（1）实验室获得纯净培养物的关键是________。

（2）图示流程的主要操作包括________和________。

（3）一般选择菌落数在________的平板进行计数，结果比较准确。

（4）当培养基中纤维素成为唯一碳源时，可筛选出________。要证明其有选择作用，可以用________作对照，比较菌落数目：还可以在培养基中加入刚果红染料，如果________，也证明其选择作用。

[生物—选修3：现代生物科技专题]

动物细胞融合技术突破了有性杂交方法的局限，使远缘杂交成为可能。现在已经广泛应用于多种学科的研究工作中，特别是新发展起来的杂交瘤技术，为制备单克隆抗体开辟了新途径。研究表明DNA合成有两条途径：“S途径”和“D途径”，淋巴细胞（效应B细胞）有“S途径”和“D途径”；骨髓瘤细胞只有“D途径”；HAT培养液中氨基喋呤可以阻断DNA合成的“D途径”。下图是单克隆抗体制备流程阶段示意图。回答下列问题：

（1）________技术是单克隆抗体技术的基础。

（2）单克隆细胞是指________。

（3）单克隆抗体与常规的血清抗体相比，最大的优越性是________。

（4）杂交瘤细胞既具备骨髓瘤细胞的________特点，又具备淋巴细胞的________特点。

（5）图示过程，有两次的筛选。第一次是用HAT培养液筛选出杂交瘤细胞，那么淋巴细胞（效应B细胞）在HAT培养液中不生长的是________，骨髓瘤细胞在HAT培养液中不生长的原因是________。

犬细小病毒（Canine Parvovirus，CPV）主要感染幼犬，传染性极强，死亡率极高。犬细小病毒单克隆抗体（CPV McAb）可抑制病毒对宿主细胞的侵染及病毒的复制,进而消灭犬体内病毒。请回答：

（1）在单克隆抗体CPV McAb的制备过程中，所用到的细胞工程技术有_________。

（2）给成年鼠注射CPV，一段时间后，若鼠血清中抗       的抗体检测呈阳性，说明体内产生了   (体液或细胞)免疫。

（3）将已免疫小鼠的B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合，获得能分泌CPV McAb的杂交瘤细胞的过程中至少要进行两次筛选，一次是通过     培养基筛选出杂交细胞，另一次是通过____________筛选出能分泌CPV McAb的杂交瘤细胞。

（4）杂交瘤细胞进行细胞培养时，为防止污染，通常还要在培养液中需要加入         。培养箱中的空气要混有_______﹪的二氧化碳用以调节培养液的pH。

（5）通过上述方法得到的单克隆抗体可快速准确地识别CPV，其原因是该抗体具有_______的特点。

某研究者用抗原（A）分别免疫3只同种小鼠（X、Y和Z），每只小鼠免疫5次，每次免疫一周后测定各小鼠血清抗体的效价（能检测出抗原抗体反应的血清最大稀释倍数），结果如下图所示。

若要制备杂交瘤细胞，需取免疫后小鼠的B淋巴细胞（染色体数目40条），并将该细胞与体外培养的小鼠骨髓瘤细胞（染色体数目60条）按一定比例加入试管中，再加入聚乙二醇诱导细胞融合，经筛选培养及抗体检测，得到不断分泌抗A抗体的杂交瘤细胞。回答下列问题：

（1）制备融合所需的B淋巴细胞时，所用免疫小鼠的血清抗体效价需达到16000以上，则小鼠最少需要经过       次免疫后才能有符合要求的。达到要求的X、Y、Z这3只免疫小鼠中，最适合用于制备B淋巴细胞的是       小鼠，理由是       。

（2）细胞融合实验完成后，融合体系中除含有未融合的细胞和杂交廇细胞外，可能还有       ，体系中出现多种类型细胞的原因是       。

（3）杂交瘤细胞中有       个细胞核，染色体数目最多是       条。

（4）未融合的B淋巴细胞经过多次传代培养后都不能存活，原因是                  

(1)在图1中注射到小鼠体内的物质是________。融合后的细胞经过多次筛选才能获得理想的细胞，此类细胞的特点是________。该过程所用的生物技术有_______________。

(2)图2中参与体外受精的精子需要经过成熟和________的过程，才能使卵细胞受精。若要获得多头与此优质奶牛相同的小牛，可对图2中囊胚中的__________均等分割后进行胚胎移植。以上技术是在__________(填“体内”或“体外”)完成的。

(3)图3中过程①是植物细胞形成_______的阶段，该阶段所用的酶是_______。在形成再生植株的过程中与组织培养有相似之处的步骤是__________。

（1）培育抗虫棉时，检测所得植株染色体的DNA上是否插入了目的基因的方法是_________，从个体水平检测所得植株是否具有抗虫特性，需要做_________。

（2）植物细胞原生质体融合后要进行筛选，目的是要获得_________进行组织培养。体细胞诱变育种过程中，可以对愈伤组织进行一定处理后，从中筛选_________，以培育新品种。

（3）单克隆抗体制备过程中，首先要用_________对融合的细胞进行筛选，之后还需进行克隆化培养和抗体检测，最终选择出的细胞具有_________的特点。

（4）在胚胎移植时，首先要对_________进行选择和处理，胚胎移植后，要对受体进行是否_________的检查。

（1）若A、B到C的过程是体外受精过程，则对已取得的精子必须先进行______处理，若需获取更多的卵细胞一般要对雌性个体注射______________，使其______________。若此过程是体内受精过程，则胚胎发育到____________阶段可进行冲卵。

（2）若该过程是制备单克隆抗体的过程，在A、B到C的过程中，A细胞为骨髓瘤细胞，B细胞为能产生抗体的B淋巴细胞，那么D细胞称为__________细胞，这种细胞的特点是______________________________________。从融合细胞中选择出它的方法是在特定的选择性培养基中培养，筛选出该类细胞后还需进行克隆化培养和抗体检测经多次筛选可获得数量足够的能分泌所需抗体的细胞。

（3）若A、B细胞为植物细胞，降解细胞壁的酶可能是________酶。A、B到C细胞的过程中，常用的物理方法是________________。