［生物——选修3：现代生物科技专题］

   下列是生物学技术制备抗体的两个途径模式简图。请据图回答下列问题：

  (1)过程①至②所获取的抗体1称为_______________，其中过程①是指细胞工程中的_____________技术。

  (2) ④过程需要__________酶，⑤过程则需要的工具酶为__________________________。

  (3) ②处需要筛选，其培养基称为_______________ (液体培养基/选择培养基/鉴别培养基)。结构甲的组成必须包括启动子_______________________及目的基因等(写两项)。

  (4)如果想用棉花产生该种抗体，则⑥过程的受体细胞通常选用__________菌，经过筛选后再侵染棉花体细胞，转化成功后通过_______________技术获得能产抗体的转基因棉花植株。

【生物—选修3：现代生物科技专题】

  科学家从病死的家禽和候鸟体内分离到了H5N1禽流感病毒，用以生产可以预防和治疗禽流感的抗体，下图为单克隆抗体制备过程示意图，图中A～G分别表示生物技术或细胞名称，请回答有关问题：

（1）若A细胞是小鼠骨髓瘤细胞，则B细胞是取自＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿的细胞，C过程不同于诱导植物原生质体融合的常用诱导因素是＿＿＿＿＿＿。

（2）假设仅考虑某两个细胞的融合，则可能形成3种类型的D细胞，因此需用＿＿＿＿培养基筛选出＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿的E细胞用于培养。

（3）在动物细胞培养过程中培养液中必须通入O₂和CO₂，通入CO₂的目的是＿＿＿＿。随着细胞分裂次数的增多，就会停止分裂增殖，这种现象称为细胞的＿＿＿＿，需要用胰蛋白酶等处理使细胞从瓶壁上分离下来。

（4）如果将单克隆抗体基因导入奶牛受精卵，再通过早期胚胎培养和＿＿＿＿＿＿＿＿，可获得多头奶牛，从而从乳汁中提取更多的抗体；欲获得活性更强的抗体，可通过＿＿＿技术对基因进行修饰，以实现目的。

[生物—选修3：现代生物科技专题]

某研究者用抗原(A)分别免疫3只同种小鼠(X、Y和Z}，每只小鼠免疫5次，每次免疫一周后测定各小鼠血清抗体的效价(能检测出抗原抗体反应的血清最大稀释倍数)，结果如下图所示甲

若要制备杂交瘤细胞，需取免疫后小鼠的B淋巴细胞(染色体数目40条)，并将该细胞与体外培养的小鼠骨髓瘤细胞(染色体数目60条)按一定比例加入试管中，再加入聚乙二醇诱导细胞融合，经筛选培养及抗体检侧，得到不断分泌抗A抗体的杂交瘤细胞。回答下列问题：

⑴制备融合所需的B淋巴细胞时，所用免疫小鼠的血清抗体效价需达到1600以上，则小鼠最少需要经过          次免疫后才能有符合要求的。达到要求后的X、Y、Z这三只免疫小鼠中，最适合用于制备B淋巴细胞的是     小鼠 ，理由是_      。

⑵细胞融合实验完成后，融合体系中除含有未触合的细胞和杂交瘤细胞外，可能还有           ，体系中出现多种类型细胞的原因是                  。

⑶杂交瘤细胞中有            个细胞核，染色体数目最多是     条。

⑷未融合的B淋巴细胞经多次传代培养后都不能存活，原因是_                                                                                 。

下图为制备单克隆抗体的流程图，据图回答下列问题。

(1)传统制备抗体的方法是向动物体内反复注射某种抗原，再从动物的                 分离所需抗体。与之相比图示方法制备的单克隆抗体的优点是              。由图中可看出，该过程涉及的动物细胞工程技术有                  。

(2)图示过程中，如果仅考虑细胞的两两融合，其融合细胞有                      种类型。

(3)图中需要两次筛选，其中第一次筛选时所用的培养基是特定的                  培养基。目的是                  。在培养基中添加动物血清，原因是               。为了防止细胞培养过程中积累的代谢产物对细胞造成伤害，应定期                  。单克隆抗体可用于制成“生物导弹”。用“生物导弹”治疗癌症的优点是                         。

    （1）a过程为从小鼠的_______________中提取抗体；经b、c、d过程获得抗体相对于a过程获得抗体的优势是____________。

    （2）b过程一般从小鼠的________（器官）中分离免疫细胞，甲试管中的免疫细胞是_________。

    （3）乙管内的细胞为鼠瘤细胞，若甲管中只有4种细胞，且只考虑细胞的两两融合，可有_____种融合细胞。过程c需使用特定的选择培养基进行筛选，分离获得丙试管中细胞的特点是__________。

    （4）d过程是对丙试管中的细胞进行______________和______________，以获得足够数量的能够分泌抗CD3特异性抗体的细胞。

（5）将能分泌抗CD3抗体的杂交瘤细胞在体外培养，或注射到小鼠腹腔内，分别从______或小鼠的______中提供取可得到大量单克隆抗体。

（1）若A细胞是经抗原刺激的小鼠B淋巴细胞，则B细胞一般选用__________，C过程不同于诱导植物原生质体融合的常用诱导因素是___________。

（2）在杂种细胞的培养过程中，为了防止污染，通常还要在细胞培养液中添加一定量的__________，其培养液与植物组织培养的培养基相比，特有的天然成分__________。

（3）单克隆抗体的制备过程需要经过多次筛选，首先用特定的选择性培养基筛选出杂交瘤细胞，其具有的特点是____________________，还需进行克隆化培养和__________，最终获得足够数量的能分泌所需抗体的细胞，选出符合要求的细胞后，可在体外条件下培养或注射到__________内进行增殖。

（4）利用上述技术生产的单克隆抗体可制作成诊断盒，用于准确、快速诊断埃博拉璃毒的感染者，这体现了单克隆抗体____________________的特性。

(1)______________________________________________技术是单克隆抗体技术的基础。

(2)从图中可以看出HAT培养基具有_____________________作用。

(3)单克隆抗体与常规的血清抗体相比，最主要的优点是_________________________。

(4)选出的杂交瘤细胞既具备骨髓瘤细胞的___________特点，又具备淋巴细胞分泌的________特点，经过选择性培养的杂交瘤细胞，还需进行克隆化培养和抗体检测，经多次_____，才能获得足够数量的能分泌所需抗体的杂交瘤细胞。最后将杂交瘤细胞在体外条件下做大规模培养，或在小老鼠腹腔内增殖，从细胞培养液中或从小老鼠腹腔的腹水中，就可以提取出大量的单克隆抗体了。

(5)浆细胞是由动物体          中的          细胞分化、发育而来。

(1)图示技术名称为________________，该技术的基础是__________________技术。

(2)操作所用的成纤维细胞应在________代以内；诱导融合运用了__________________原理。

(3)培养时pH一般为______________；在操作中加入乌本苷的目的是____________________。

(4)下表所示为杂交细胞A、B、C中存在的人类染色体及人类特有的4种酶(“+”表示存在，“-”表示不存在)，这4种酶均为单基因编码产生，据表判断，编码________酶的基因位于染色体2上。

（1）若A．B细胞为动物细胞，从A．B细胞到C细胞的过程中，常用灭活的病毒作为诱导剂来诱导细胞融合。A．B融合为C的过程说明了细胞膜具有                   特性。

（2）若A．B细胞为植物细胞，那么这样的细胞已经用酶解法脱掉了      。这种酶可能是        酶，由此生成的A和B细胞称为               。

（3）若A细胞为骨髓瘤细胞，B细胞为效应B淋巴细胞，那么D细胞称为                细胞,这种细胞既能                 ，又能产生                        。

迄今为止，人们用单克隆抗体已找到不少人和动物的精子抗原。由于精子必须经过获能才具有受精能力，故利用单克隆抗体研究精子获能前后细胞内和细胞表面大分子的变化，可探索新的避孕方法和男性不育诊断及治疗的新途径。请回答下列问题：

(1)制备抗精子的单克隆抗体过程中，首先要向小鼠注射获能后的精子悬液，其目的是为了获得相应的________，用化学方法将该细胞和小鼠的骨髓瘤细胞融合时用________作为促融剂。

(2)对杂种细胞一般要进行两次筛选，第一次筛选是用________进行筛选，第二次筛选的方法为专一抗体检测阳性和克隆化培养。将最终获得的杂交瘤细胞注入小鼠腹腔中能获得大量的单克隆抗体，在小鼠腹腔中进行细胞培养的优点是________.

(3)自然条件下精子与卵细胞结合的场所是________，精子获能前后表面的物质会发生变化，从根本上分析是________的结果。在受精作用中防止多精入卵的两条途径是________。