ES细胞(胚胎干细胞）在基础生物学、畜牧学和医学上有十分重要的应用价值。请回答下列问题：

（1）ES细胞在体外培养时，可以增殖而不发生分化。在ES细胞培养液中加入分化诱导因子___________(只填一种即可)时，就可以诱导ES细胞向不同类型的组织细胞分化。

（2）将人的ES细胞进行细胞培养时，要用__________酶分散细胞，制成细胞悬液，放入培养瓶中进行培养。使用合成培养基进行细胞培养时，通常需要加入_____________等天然成分。在细胞培养过程中，ES细胞主要通过_______________的方式进行细胞增殖。

（3）将来源于两种不同哺乳动物的两个ES细胞进行细胞融合，常用的生物诱导因素是____________，经融合后所形成的细胞被称为__________。动物细胞融合技术的意义在于__________________。

完成下列相关填空

（一）某工厂为了生产耐高温植酸酶饲料添加剂，开展了产该酶菌株的筛选、酶的固定化及其特性分析研究，其流程如下图所示。

（1）土壤悬液先经80℃处理15分钟，其目的是筛选出             。

（2）在无菌条件下，将经过处理的土壤悬液进行            ，然后涂布于含有植酸钠的固体培养基上。培养后观察到单菌落，其周围出现透明水解圈，圈的直径大小与           强弱相关。

（3）该小组将得到的菌株接种到液体培养基中并混匀，一部分进行静置培养，另一部分进行振荡培养，结果发现：振荡培养的细菌比静置培养的细菌生长速度快。分析其原因是：振荡培养能提高培养液中         的含量，同时可使菌体与培养液充分接触，提高                的利用率。

（4）利用物理或化学方法将植酸酶固定在          的介质上称为固定化酶。实验过程涉及两次蒸馏水洗涤反应柱的操作，其中第一次洗涤的目的是除去             。

（二）下图为绵羊多莉克隆过程，请回答有关问题。

（5）步骤1中若要获得较多数量的卵细胞，通常对母羊注射相关激素使其超数排卵。步骤2可通过降低           浓度，实现对乳腺细胞的营养限制性培养，可以得到大量的          期细胞，从而实现细胞分裂同步化。

（6）步骤3中科研人员采用         技术进行细胞融合，步骤4通过胚胎体外培养获得胚胎，待发育至              胚胎时进行移植，通常移植至代孕母羊的          部位。

（7）若要将目的基因导入乳腺细胞中，在扩增目的基因时，除利用PCR技术外，还可将目的基因所在的重组载体导入大肠杆菌中，利用大肠杆菌  ▲ 使其扩增。

（8）为获得大量的上述克隆羊，可用胚胎成纤维细胞进行体细胞克隆。因为胚胎成纤维细胞可进行           培养，理论上可获得无限只克隆羊。

艾滋病病毒(HIV)外壳的包膜上有多种蛋白质，其中包膜糖蛋白(env)基因编码gpl60蛋白，进一步加工成gpl20蛋白，具有较强的抗原性。制备抗HIVgpl20的单克隆抗体，为艾滋病的治疗带来希望。清回答下列问题：

  (1)若利用动物细胞工程制备抗HIVgpl20的单克隆抗体，涉及到的技术手段主要有动物细胞培养技术和________技术。

  (2)细胞融合常用的生物诱导剂是__________。融合后需要用特定的选择性培养基筛选，只有融合的__________才能生长，这种细胞的特点是______________________________。

  (3)若要大量制备该单克隆抗体，可将筛选出来的细胞进行体外培养，在培养液中通入一定浓度的CO₂，主要作用是_______________________________________。

  (4)科研人员设想用基因工程制备能表达抗HIVpl20抗体的重组细胞，获得目的基因可利用PCR技术扩增，需要在反应体系中添加的有机物有__________、模板DNA、Taq酶和4种脱氧核苷酸。利用________法将目的基因导入骨髓瘤细胞。基因工程的核心是______________________。

  (5)现代生物工程技术不仅推动了免疫学的发展，对畜牧业的发展也起到了积极的推动作用。用细胞核移植技术繁育良种牛的过程需要进行胚胎移植，移植前需要对受体牛进行________技术处理，受体对外来胚胎基本不发生____________，为胚胎在受体内的存活提供了可能。

如图为细胞融合的简略过程，请据图回答：

(1)若A,B是植物细胞，在细胞融合之前已用                     处理，除去细胞壁；融合完成的标志是                         。

(2)若A,B是动物细胞，用          使细胞分散开来，A,B到C的过程中，常用的不同于植物细胞的手段是               。

(3)若该过程是制备单克隆抗体，A为小鼠B淋巴细胞，那么，在获得此细胞之前，小鼠已被注射了           ，图中B是_______细胞， D是___________细胞

下图是单克隆抗体制备过程示意图，请据图分析回答问题：（8分，每空1分）

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（1）图中A过程之前需进行的操作是         。

（2）图中B过程常用         、聚乙二醇或电激等诱导完成。

（3）用于大规模培养的“细胞X”的名称是      细胞，其特点是既能        ，又能产生       。

（4）根据物理性质分类，图中体外培养所用的培养基类型为         。若为合成培养基，为满足营养需要，往往还需要加入         。

（5）图示表明，制备单克隆抗体是动物细胞工程中         技术的重要应用。

如图为某同学根据杂交瘤技术的方法，设计生产破伤风杆菌抗体的实验方案。请据图回答问题。

（1）该方案能达到预期效果吗？________，原因是                                                       。

（2）在制备破伤风杆菌抗体过程中之所以选用B淋巴细胞和骨髓瘤细胞，是因为它们融合后的杂交瘤细胞具有________________，________________的特性。

（3）在上图制备破伤风杆菌抗体的过程中，进行了两次筛选，其目的不同，②是通过筛选获___________，④是通过筛选获得 _______________________________。

（4）细胞悬液转入⑤瓶中进行的初次培养称为____________，悬液中分散的细胞很快就贴附在瓶壁上，称为_____________。

（5）该技术利用的生物学原理有                                 。

（6）此过程中，常用的与植物细胞融合不同的诱导方法是              。

研究表明，HER2/neu是一种原癌基因，它表达的H蛋白在多种恶性肿瘤特别是乳腺癌细胞中过量表达。抗H蛋白单克隆抗体能抑制过量表达H蛋白的乳腺癌细胞的生长，目前已成为有效的生物治疗手段。

（1）选择H蛋白作为单克隆抗体的作用靶点，是因为H蛋白在成年个体的正常组织中___________（填“低表达”或“高表达”）。

（2）将H蛋白注射到小鼠体内，取该小鼠的________细胞与骨髓瘤细胞进行融合，常用的化学诱导剂是________，也可用不同于植物细胞工程的诱导方法，即用_______诱导融合。

（5）治疗乳腺癌时，可单独使用抗H蛋白单克隆抗体，也可将该单克隆抗体与抗癌药物结合构建“生物导弹”，杀死癌细胞。这充分体现了单克隆抗体______________的特点。

   如图所示为细胞融合技术的一些过程：（10分，每空1分）

(1) 从A细胞和B细胞到C细胞的过程中，必须用________处理。

(2) 若A细胞为骨髓瘤细胞，B细胞为B淋巴细胞，那么D细胞称为________细胞，由D细胞连续分裂产生大量的细胞的过程，称为________过程。这种细胞既能无限增殖，又能产生________。

(3) 若A、B细胞为单倍体烟草植物的体细胞，那么这样的细胞已经用酶降解脱掉了________。这种酶可能是________、________，由此生成的细胞经培养形成的细胞团称为________。

(4) 若将基因型为AaBB的番茄细胞，与基因型为AAbb的番茄细胞融合，由融合细胞培养成的愈伤组织细胞的基因型是________。

(5) 若将染色体组成为2A＋XX的人细胞，与染色体组成为2B＋XX的鼠细胞融合，培育成的人—鼠细胞的染色体组成是________。