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            • 1.

              艾滋病病毒(HIV)外壳的包膜上有多种蛋白质,其中包膜糖蛋白(env)基因编码gpl60蛋白,进一步加工成gpl20蛋白,具有较强的抗原性。制备抗HIVgpl20的单克隆抗体,为艾滋病的治疗带来希望。清回答下列问题:

                (1)若利用动物细胞工程制备抗HIVgpl20的单克隆抗体,涉及到的技术手段主要有动物细胞培养技术和________技术。

                (2)细胞融合常用的生物诱导剂是__________。融合后需要用特定的选择性培养基筛选,只有融合的__________才能生长,这种细胞的特点是______________________________。

                (3)若要大量制备该单克隆抗体,可将筛选出来的细胞进行体外培养,在培养液中通入一定浓度的CO2,主要作用是_______________________________________。

                (4)科研人员设想用基因工程制备能表达抗HIVpl20抗体的重组细胞,获得目的基因可利用PCR技术扩增,需要在反应体系中添加的有机物有__________、模板DNA、Taq酶和4种脱氧核苷酸。利用________法将目的基因导入骨髓瘤细胞。基因工程的核心是______________________。

                (5)现代生物工程技术不仅推动了免疫学的发展,对畜牧业的发展也起到了积极的推动作用。用细胞核移植技术繁育良种牛的过程需要进行胚胎移植,移植前需要对受体牛进行________技术处理,受体对外来胚胎基本不发生____________,为胚胎在受体内的存活提供了可能。

            • 2. 1975年,英国科学家米尔斯坦和德国科学家科勒设计了一个极富创造性的实验方案:把一种B淋巴细胞与能在体外大量增殖的骨髓瘤细胞进行融合,得到的融合细胞就能大量增殖,产生足够数量的特定抗体。请回答下列问题:

              (1)从动物体内取出的组织块,需用________处理一段时间,这样组织就会分散成单个细胞。当细胞________(填“原代”或“传代”)培养至10~50代左右时,部分细胞的细胞核型可能发生变化,从而获得骨髓瘤细胞。在动物细胞培养基中加入血清、血浆等天然成分的原因是________。

              (2)制备单克隆抗体时,先用特定的选择性培养基进行筛选,获得________细胞;然后对上述细胞进行抗体检测,选取________的细胞克隆化培养;最终获得单克隆抗体。

              (3)有人提出用核移植技术构建重组细胞来生产单克隆抗体,其过程是取经特定抗原刺激的B淋巴细胞的细胞核,移植到去核的骨髓瘤细胞中,构成重组细胞。此方法________(填“能”或“不能”)获得既能分泌抗体,又能无限增殖的细胞,原因是________。

            • 3.

              下图是单克隆抗体制备过程示意图,请据图分析回答问题:(8分,每空1分)

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              (1)图中A过程之前需进行的操作是         

              (2)图中B过程常用         、聚乙二醇或电激等诱导完成。

              (3)用于大规模培养的“细胞X”的名称是      细胞,其特点是既能        ,又能产生       

              (4)根据物理性质分类,图中体外培养所用的培养基类型为         。若为合成培养基,为满足营养需要,往往还需要加入         

              (5)图示表明,制备单克隆抗体是动物细胞工程中         技术的重要应用。

            • 4. 如图可表示细胞融合技术的一些过程,请据图回答:

              (1)若A、B细胞为动物细胞,从A、B细胞到C细胞的过程中,常用灭活的病毒作为诱导剂来诱导细胞融合.A、B融合为C的过程说明了细胞膜具有______的特性.
              (2)若A、B细胞为植物细胞,那么这样的细胞已经用酶解法脱掉了______.这种酶可能是______酶,由此生成的A和B细胞称为______.
              (3)若A细胞为骨髓瘤细胞,B细胞为效应B淋巴细胞,那么D细胞称为______细胞.这种细胞既能______,又能产生______.
            • 5. 干扰素在人体中是由免疫细胞合成并分泌的一种糖蛋白,几乎能抵御所有病毒引起的感染。传统生产方法成本高、产量低,获得的干扰素在体外不易保存。用生物技术手段可以缓解这些问题。请回答相关问题。
              (1)利用基因工程生产干扰素,过程是:
              ①从健康人体的外周静脉血分离能合成干扰素的免疫细胞,从中提取____________,经反转录获取目的基因。
              ②用限制酶处理载体和目的基因后,用DNA连接酶处理,形成基因表达载体。
              ③若选择大肠杆菌作为受体细胞,常用的转化方法是用Ca2+ 处理,使其成为____________ ,在一定温度条件下完成转化。
              ④在培养液中培养一段时间后,离心后取____________ (答“上清液”或“菌体”),经进一步处理获得产物,进行产物鉴定时可采用____________技术。
              (2)利用蛋白质工程对干扰素进行改造,基本途径是:预期蛋白质功能→_____________________→________________________→找到对应的脱氧核苷酸序列。
              (3)利用细胞工程生产干扰素,设计思路是:将相应免疫细胞和瘤细胞融合,筛选出____________,经细胞培养可获得大量干扰素。
            • 6.

                 如图所示为细胞融合技术的一些过程:(10分,每空1分)


              细胞融合

              (1) 从A细胞和B细胞到C细胞的过程中,必须用________处理。

              (2) 若A细胞为骨髓瘤细胞,B细胞为B淋巴细胞,那么D细胞称为________细胞,由D细胞连续分裂产生大量的细胞的过程,称为________过程。这种细胞既能无限增殖,又能产生________。

              (3) 若A、B细胞为单倍体烟草植物的体细胞,那么这样的细胞已经用酶降解脱掉了________。这种酶可能是________、________,由此生成的细胞经培养形成的细胞团称为________。

              (4) 若将基因型为AaBB的番茄细胞,与基因型为AAbb的番茄细胞融合,由融合细胞培养成的愈伤组织细胞的基因型是________。

              (5) 若将染色体组成为2A+XX的人细胞,与染色体组成为2B+XX的鼠细胞融合,培育成的人—鼠细胞的染色体组成是________。

            • 7.  下列是制备分泌抗原X抗体的过程,根据图解回答问题:                   

              (1)制备单克隆抗体的步骤:             

              ①将抗原注入小鼠体内,从小鼠脾脏中获得淋巴细胞,其中至少1个淋巴细胞带有抗该抗原的抗体。

              ②由图中可看出,单克隆抗体制备过程运用了                     的动物细胞工程技术手段,前者常用的诱导剂与植物原生质体融合不同的是               

              ③将诱导后产生的多种细胞,放在含________培养基的多孔培养板上培养,筛选。

              ④这样获得的杂交瘤细胞既具有B淋巴细胞                                  的能力,又具有______________________________的本领。

              ⑤检测和分离带有抗X抗体的阳性细胞,培养板中每孔放一个细胞进行培养。

              ⑥将阳性细胞进行增殖,从而制备出大量抗该抗原的单克隆抗体。

              (2)单克隆抗体是由同样的抗体分子组成,与一般的血清抗体相比,单克隆抗体的优点是 _______________________________________。

              (3)用本法制备出的单克隆抗体仍具有局限性,因为它是用小鼠的_____________细胞制备的,其化学本质是___________,对人类有异物性和免疫原性。

              (4)动物细胞培养液的配方通常含有葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素等,与植物细胞培养基有所不同的是,还含有                           

              (5)图中有两次筛选过程,其中步骤④的目的是筛选出                                     ,步骤⑤的目的是筛选出                                                     

            • 8.

              牛雄性胚胎中存在特异性的H-Y抗原,可在牛早期胚胎培养液中添加H-Y单克隆抗体,筛选胚胎进行移植,以利用乳腺生物反应器进行生物制药。回答有关问题,

              (1)用H-Y抗原免疫母牛可获得相应抗体,但这种抗体的缺点是________________。

              (2)利用细胞融合技术而发展起来的___________技术,为制造单克隆抗体开辟途径。常用于细胞融合的诱导因素有聚乙二醇(PEG)___________、电激等。

              (3)将药用蛋白基因与___________等调控组件重组在一起,通过显微注射等方法,导入哺乳动物的受精卵中,然后使其生长发育成转基因动物。转基因动物通过分泌的乳汁来生产所需要的药品,称为乳腺生物反应器。

              (4)通常选用囊胚期的早期胚胎做雌雄鉴别,鉴别后的__________胚胎可做胚胎移植。

            • 9.

              如图可表示细胞融合技术的一些过程,请据图回答:


              (1)若A、B到C的过程是体外受精过程,则精子必须先进行______处理,常采用的方法是__________________和__________________.若此过程是体内受精过程,则胚胎发育到__________________阶段可进行冲卵.
              (2)若A、B细胞为植物细胞,降解脱掉细胞壁的酶可能是__________________酶.A、B到C细胞的过程中,常用的物理方法是__________________.
              (3)若该过程是制备单克隆抗体的过程,在A、B到C的过程中,A细胞为骨髓瘤细胞,B细胞为能产生抗体的B淋巴细胞,那么D细胞称为____________细胞,这种细胞的特点是__________________.从融合细胞中选择出它的方法是在特定的__________培养基中培养,筛选出该类细胞后还需进行___________和____________经多次筛选可获得数量足够的能分泌所需抗体的细胞.
            • 10.

              (1)图甲是基因表达载体的模式图,图中抗生素抗性基因作为基因工程中的___________________基因。

              (2)模型是人们为了某种特定目的对认识的对象所做的一种简化的概括性描述,模型构建是生物学教学、研究和学习的一种重要方法。图乙是基因工程的操作流程图,图中D表示_____________。若图乙表示单克隆抗体制备过程,则从A、B到C的过程需要的生物方法是使用___________________。

              (3)有人提出用细胞核移植技术构建重组细胞来生产单克隆抗体,试用相关的图示及文字(括号中填文字)完善图丙表示该过程:

               

              (4)高等哺乳动物受精后不久,受精卵开始进行细胞分裂。经桑椹胚、囊胚、原肠胚和组织器官的分化,最后发育成一个完整的幼体,完成胚胎发育的全过程。图中②、③依次为_________、        ,胚胎从①中伸展出来的过程叫做____________。若要对图所示胚胎进行胚胎分割,则正确的操作方法的是图中的_________。

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