为了加快优良种牛的繁殖速度，科学家采用了以下两种方法，请根据图示信息回答

（1）试管牛和克隆牛的培育过程中均用到的细胞工程技术有                 。方法Ⅱ为什么要用卵母细胞做受体细胞？                                       

（2）产生E牛的过程，对B牛和D牛要进行          处理。产生F牛的理论依据是          ，其生殖方式属于           。E牛和F牛的性别分别为           。

（3）解释F牛的遗传性状与D牛不同的原因                                                    。

（4）在受精的过程中，卵子是否受精的标志是                                                。

（5）体细胞进行体外培养时，所需的气体主要有O₂和CO₂，CO₂的主要作用是                   。若要获得ES细胞，可以来自于囊胚中的          。

［生物——选修3：现代生物科技专题］

据报道，尽管存在巨大争议，世界上首例“三亲婴儿”仍然于2016年4月在墨西哥诞生。三亲婴儿的培育技术路线如下。

 回答下列问题：

（1）三亲婴儿培育技术中，过程A使用的技术是                            ；在体外受精前需对精子进行                处理；由“受精卵…→三亲婴儿”过程中，需用到的胚胎工程技术有早期胚胎培养和                           。

（2）利用三亲婴儿培育技术可以避免三亲中          （填“捐献者”“母亲”或“父亲”）中的                 （填“常染色体上”、“性染色体上”或“线粒体中”）的基因缺陷传给孩子。

（3）三亲婴儿与体细胞克隆动物多利羊在遗传物质来源上的主要区别是                                                    。

【选修1—现代科技专题】下图表示通过核移植等技术获得某种克隆哺乳动物（二倍体）的流程。

回答下列问题：

（1）过程①表示去除细胞核，该过程一般要在卵母细胞培养至_______期再进行，去核时常采用_______的方法。②代表的过程是__________。

（2）经过多次传代后，供体细胞中遗传物质的稳定性会降低，因此，选材时必须关注传代次数，通常选择传代_______以内的细胞。

（3）若获得的克隆动物与供体动物性状不完全相同，从遗传物质的角度分析其原因是______。

（4）与克隆羊“多莉（利）”培养成功一样，其他克隆动物的成功获得也证明了__________。

（5）克隆人和克隆动物的原理基本相同，中国政府对对克隆人的态度是禁止_______，不反对__________

[生物——选修1：生物技术实践]

已知微生物A可以产生油脂，微生物B可以产生脂肪酶。脂肪酶和油脂可用于生物柴油的生产。回答有关问题：

（1）显微观察时，微生物A菌体中的油脂通常可用__________染色。微生物A产生的油脂不易挥发，可选用_________（填“萃取法”或“水蒸气蒸馏法”）从菌体中提取。

（2）为了从自然界中获得能产生脂肪酶分微生物B的单菌落，可从含有油料作物种子腐烂物的土壤中取样，并应选用以___________为碳源的固体培养基进行培养。

（3）若要测定培养液中微生物B的菌体数，可在显微镜下用__________直接计数；若要测定其活菌数量，可选用__________法进行计数。

（4）为了确定微生物B产生的脂肪酶的最适温度，某同学测得相同时间内，在35℃、40℃、45℃温度下降解10g油脂所需酶量依次为4mg、1mg、6mg，则上述三个温度中，________℃条件下该酶活力最小。为了进一步确定该酶的最适温度，应围绕_________℃设计后续实验。

【生物——现代生物科技专题】

人的血清蛋白有广泛的药用价值，科学家通过培育乳腺生物反应器生产人血清白蛋白，流程如下：

(1)在基因工程中，①被称为__________________。若①因数量少而不能满足生产需要，常利用___________________技术进行扩增。

(2)②应该取自__________(雄性或雌性)荷斯坦奶牛，由②到③的过程中，需将②用_____________处理后进行培养。

(3)从③到④的过程中，用于核移植的供体细胞③一般都选用传代10代以内的细胞，原因是______________；作为受体细胞的卵母细胞需培养至____________期；形成④时常通过______________(物理方法)进行激活，使其完成分裂和发育进程。

(4)④培养至⑤后，可通过___________技术获得多个⑥，从而提高胚胎的利用率。胚胎移植的实质是___________________________________________________。

【生物—选修3：现代生物科技专题】

回答下列问题：

（1）三亲婴儿培育技术中，过程A使用的技术是______________；在体外受精前需对精子进行______________处理；由“受精卵→三亲婴儿”过程中，需用到的胚胎工程技术有早期胚胎培养和_________________。

（2）利用三亲婴儿培育技术可以避免三亲中____________（填“捐献者”、“母亲”或“父亲”）的____________（填“常染色体上”、“性染色体上”或“线粒体中”）的基因缺陷传给孩子。

为治疗糖尿病，研究人员提出了如下图的方法。

（2）核移植的受体细胞一般选用MⅡ期卵母细胞。进行相关显微操作时，一般用微型吸管一并吸出               。  

（3）细胞在体外培养时，除培养液提供必需的营养条件外，还需要有        。上图所获的胚胎干细胞可由       中分离出来，在功能上具有         。

（4）利用PCR技术扩增正常胰岛素基因的前提条件是        。将正常胰岛素基因导入胚胎干细胞并维持稳定和表达的过程，称为        

（5）“定向诱导”的目的是使重组细胞B发生      ，从而形成功能专一的胰岛类似细胞。

（6）该治疗糖尿病的方法与相比异体移植，突出的优点是         。

基因打靶是通过外源DNA与染色体DNA同源序列之间的重组来改造基因组特定位点，从而改变生物遗传特性的方法。下图是利用该技术将小鼠的胰岛素基因（靶基因） 置换成人胰岛素基因的过程示意图，其中neo^r是新霉素抗性基因；HSV-tk基因的表达可以使无毒的丙氧鸟苷代谢为毒性物质，导致细胞死亡。请回答下列问题：

（1）打靶载体中含有的目的基因是____________，需将该目的基因和与细胞内靶基因同源的DNA片段都重组到质粒上，整合时用到的酶有____________。

（2）图中的同源重组位点是指打靶载体和小鼠基因组DNA中具有___________的DNA片段。

（3）将打靶载体线性化所选择的限制性核酸内切酶的识别序列不能位于_____________________等中。线性化的打靶载体可采用___________法导入小鼠细胞。将小鼠细胞培养在含_________________的培养液中，可以成功筛选出打靶成功的小鼠细胞，经细胞培养后可以获得大量的具有目的基因的细胞。

（4）可以通过动物细胞克隆技术获得含人胰岛素基因的小鼠，其过程是将打靶成功的小鼠细胞的细胞核移植到___________中,培养到___________期移植到代孕母鼠子宫内进行发育。

【生物选修3】

治疗性克隆是指把患者体细胞的细胞核移植到去核卵母细胞中，构建形成重组胚胎，体外培养到一定时期分离出Es细胞，获得的ES细胞定向分化为所需的特定类型细胞(如神

经细胞、肌肉细胞和血细胞)，用于治疗。请回答下列问题:

(1)治疗性克隆采用的技术有                   和干细胞培养。ES细胞可从重组胚胎培养到囊胚时期的                  中分离。

(2)科学家将患者的体细胞核植入去核的卵细胞中，而不是直接用体细胞进行细胞培养的原因是                      。

(3)在培养液中加入            可诱导ES细胞定向分化成所需的各种特定类型细胞，体现了该细胞在功能上,具有      的特性。

(4)某次科学家将体外培养的ES细胞进行诱导使其定向分化为胰岛B细胞，并进行了胰岛素释放实验：控制培养液中 的浓度，检测细胞分泌的胰岛素的量，下图为实验结果,据此分析确认ES细胞诱导成功。得到此结论的依据是              。

细胞工程和胚胎工程技术为优良种畜的快速繁殖带来了无限生机，请据图成以下问题。

(1)在试管牛和克隆羊的培育过程中都必须用到的生物技术有               (至少写出两项)。

(2)超数排卵技术的处理措施是对供体母牛注射             ；冲卵实质上是用特定装置，将供体母牛子宫内的________冲洗出来。

(3)从A到E中，适宜于牛的胚胎移植时期有________；图中标号3为       ，它将来可发育为胎膜和胎盘。

(4)试管牛E的性别为________，克隆羊多利的性状和________最接近。

[生物—选修3：现代生物科技专题]

回答下列问题：

（1）图中A表示正常细胞核，染色体数为2n，则其性染色体的组成可为____________。过程①表示去除细胞核，该过程一般要在卵母细胞培养至适当时期再进行，去核时常采用_______的方法。②代表的过程是__________。

（2）经过多次传代后，供体细胞中______的稳定性会降低，因此，选材时必须关注传代次数。

（3）若获得的克隆动物与供体动物性状不完全相同，从遗传物质的角度分析其原因是______。

（4）与克隆羊“多莉（利）”培养成功一样，其他克隆动物的成功获得也证明了__________。