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            • 1． （2016•揭阳校级模拟）生物学家通过对鼠和人控制抗体产生的基因进行拼接，实现了对鼠源杂交瘤抗体的改造，生产出对人体的不良反应减少、效果更好的鼠-人嵌合抗体，用于癌症治疗．如图表示形成鼠-人嵌合抗体的过程．请据图回答：
              （1）鼠源杂交瘤抗体就是从免疫小鼠的脾脏细胞中获取B淋巴细胞，在诱导剂的作用下与    融合，形成杂交瘤细胞，并通过体内培养或体外培养生产单克隆抗体．这种抗体与普通血清抗体相比较，最主要的优点在于它的    ，可大量制备．
              （2）生产单克隆抗体一般不直接培养B淋巴细胞，主要原因是    ．单克隆抗体制备所依据的免疫学基本原理是    ．将单克隆抗体制成生物导弹，则生物导弹的组成是    ；为了便于了解生物导弹的作用部位，常要对生物导弹中的成分进行    ，抗体可以使抗癌药物定向作用于癌细胞，该过程所利用的免疫学原理为    ．
              （3）科学家通过基因拼接，将鼠源抗体基因改造成鼠-人嵌合抗体基因，然后导入到鼠淋巴细胞中，这个过程属于    工程的范畴．
              难度：中等
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            • 2． 迄今为止，人们用单克隆抗体研究精子已找到不少人和动物的精子抗原．由于精子必须经过获能才具有受精能力．故利用单克隆抗体研究精子获能前后细胞内和细胞表面大分子的变化，可探索新的避孕方法和男性不育诊断及治疗的新途径．谙回答下列问题：
              （1）制备抗精子的单克隆抗体过程中，首先要向小鼠注射获能后的精子悬液，其目的是为了获得相应的    ，用化学方法将该细跑和小鼠的骨髓癌细胞合时用    作为促融剂．
              （2）对杂交细胞一般要进行两次筛选，第一次筛选是用    进行筛选，第二次筛选的方法为专一抗体检测阳性和克隆化培养，最终获得的杂交癌细胞的特点是    ．将最终获得的癌细胞注入小鼠腹腔内能获得大量的单克隆抗体，在小鼠腹腔中进行细胞培养的优点是    ．
              （3）自然条件下精子与卵细胞结合的场所是    ，精子获能前后表面的物质会发生变化，从根本上分析是    的结果．在受精作用中防止多精入卵的两条途径是    ．
              难度：中等
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            • 3． 下列关于生物工程的叙述，正确的是（　　）
              A．在花药离体培养形成愈伤组织的过程中，有可能发生基因的突变和基因重组
              B．检测目的基因是否导入了受体细胞的方法一般是检测该基因的表达产物
              C．植物的单倍体育种和多倍体育种都利用了植物组织培养技术
              D．单克隆抗体的特异性强，但不能单独直接消灭体内的癌细胞
              难度：中等
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            • 4． 如图是通过生物技术制备单克隆抗体的两种途径，请分析回答下列问题：

              （1）在获取抗体之前，需要向健康小鼠注射特定抗原（如乙肝疫苗），图中细胞A在小鼠体内主要参与    免疫过程．
              （2）过程①采用的诱导融合方法是    ，依据的生物学原理是    ．过程④需要用的酶是    ．
              （3）在结构甲中，氨苄青霉素抗性基因的作用是    ，启动子的作用是    
              （4）抗体1与抗体2的氨基酸排列顺序相同，两者的生物活性    （填“相同”或“不相同”），原因是    ．
              难度：中等
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            • 5． 犬细小病毒（Canine Parvovirus，CPV）主要感染幼犬，传染性极强，．死亡率极高．犬细小病毒单克隆抗体（CPV McAb）可抑制病毒对宿主细胞的侵染及病毒的复制，进而杀灭犬体内病毒．请回答：
              （1）在单克隆抗体CPV McAb的制备过程中，所用到了的细胞工程技术有    和    技术．
              （2）给成年鼠注射CPV，一段时间后，若鼠血清中抗    的抗体检测呈阳性，说明体内产生了    （填体液或细胞）免疫反应．
              （3）将小鼠的B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合，．获得能分泌CPV McAb的杂交细胞的过程中至少要进行两次筛选，一次是通过    培养基筛选出杂交细胞，另一次是通过    筛选出能分泌CPV McAb的杂交细胞．
              （4）诱导B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合最常用的方法是    ；对杂交细胞进行培养时，需要    的环境，及营养、温度、PH和    环境适宜的条件．
              （5）通过上述方法得到的单克隆抗体可快速准确的识别CPV，其原因是该抗体具有    的特点．
              难度：中等
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            • 6． 回答下列有关生物工程的问题．
              材料1抗体的制备经历了细胞学层面和分子学层面两种合成途径的研究．下列是生物学技术制备抗体的两个途径模式简图．

              普通质粒V1基因大肠杆菌免疫后的人体分离细胞AmRNA③结构甲抗体⑤细胞增殖抗体⑥Y细胞①②④
              （72）在获取抗体之前，需要向健康人体注射特定抗原（如乙肝疫苗），并且每隔一周重复注射一次．免疫学称细胞A为    ，该细胞在人体主要介导    免疫．
              （73过程①至②获取的抗体称为    ，其中①是    过程，Y细胞称为    ．
              材料2 上图中，结构甲的建构可用下图1和2表示．图1表示含有目的基因的DNA片段长度（bp即碱基对）和部分碱基序列，图2表示一种质粒的结构和部分碱基序列．现有4种限制性核酸内切酶，它们识别的碱基序列和酶切位点分别为如表所示．
              限制酶MspⅠBamHⅠMboⅠSmaⅠ
              识别序列及切割位点




              （1）若用限制酶SmaⅠ完全切割图1中DNA片段，其产物长度为    ，    ，    ．
              （2）若图1中虚线方框内的碱基对被T-A碱基对替换，那么基因D就突变为基因d．从杂合子中分离出图1及对应的DNA片段，用限制酶SmaⅠ完全切割，产物中共有    种不同长度的DNA片段．
              （3）上述结构中的建构过程可知，在限制酶作用下得到的产物有多种，生产上多采用    技术来降低目的基因分离提取的难度，也有利于限制酶的回收和再利用．
              （4）若将图2中质粒和目的基因D通过同种限制酶处理后进行拼接，形成重组质粒，那么应选用的限制酶是    ．在导入重组质粒后，为了筛选出含有重组质粒的大肠杆菌，一般需要添加    的    （固体/液体）培养基进行培养．在培养前，培养基必须先经过灭菌，所用的方法是        ；采用    的方法接种以获得单菌落后继续筛选．
              难度：中等
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            • 7． 手足口病是五岁以下儿童中常见的传染性疾病．柯萨奇病毒A16型（CA16）和肠道病毒71型（EV71）是引起手足口病的两个最主要的病原体，感染EV71或CA16都有可能引起严重的神经系统并发症甚至导致死亡．可利用生物技术手段制备手足口病疫苗，请根据所学知识分析回答下列相关问题：
              （1）为获得大量手足口病的抗体，可将    细胞与    细胞进行细胞融合，最常用的诱导融合手段是    ．至少经过    次筛选后获得的杂交瘤细胞，可通过    和    生产大量抗体．这种方法获得的抗体具有    、    和    的优点．若得到的抗体不易保存，可通过    工程对天然抗体进行改造，使其满足人类需要．
              （2）科学家研制手足口病基因疫苗的基本过程为：获取病毒某基因后，与    结合形成的表达载体还必须具备    、    和    等；注入机体基因表达后，产生病毒的    （填“抗体”或“抗原”），从而使机体对该病毒产生免疫．
              难度：中等
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            • 8． （2016•洛阳模拟）如图所示为细胞融合技术的一些过程，请据图回答：
              （1）如果A、B细胞为植物细胞，植物细胞在细胞融合前，可用先除去    ，余下的部分可称为    ．这一步骤中若用酶解法，所使用的酶是    
              A．多肽酶     B．淀粉酶  C．纤维素酶    D．脂肪酶
              （2）若A、B是动物细胞，一般取自幼龄动物细胞或胚胎，然后用     使其分散开来；A、B到C的过程中常用的但不能用于植物细胞培养的手段是    ，所形成的D称为    ．
              （3）若该过程是制备单克隆抗体，A为小鼠浆细胞，那么，在获得此细胞之前，小鼠已被注射了    ．获得杂交瘤细胞后，常用的扩大培养方法是培养基中体外培养和注入     培养．
              难度：中等
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            • 9． 微生物与生物工程
              Ⅰ、研究者从热泉中筛选了高效产生高温淀粉酶的嗜热菌，其筛选过程如图1所示．

              （1）①过程称为    ，②过程是为了    ．在1号培养基上挑出能产生淀粉酶的嗜热菌菌落的鉴别方法是培养基上会出现以该菌的菌落为中心的    ．
              （2）按功能分Ⅰ号培养基称为    ；该培养基中必须添加的成分有    （多选）等．
              A．琼脂B．葡萄糖C．硝酸铵D．淀粉
              （3）一般对配制的培养基采用高压灭菌，其中“高压”是为了    ．
              Ⅱ、图2为单克隆抗体制备过程的示意图
              （4）若只考虑细胞的两两融合，试管中有    种融合细胞，筛选后进一步培养的是    细胞，此细胞的特点是    ．
              （5）相对细菌而言，动物细胞离体培养更需关注培养基的渗透压，这是因为动物细胞    ．
              A．渗透压远高于细菌或植物细胞的渗透压
              B．没有成熟大液泡，渗透压调节能力差
              C．没有细胞壁，对培养基的渗透压更敏感
              D．生长缓慢，各生长阶段对环境的渗透压要求不同
              （6）已知细胞合成DNA有D和S两条途径，其中D途径能被氨基嘌呤阻断．人淋巴细胞中有这两种DNA的合成途径，但一般不分裂增殖；鼠骨髓瘤细胞中没有S途径，但能不断分裂增殖．写出过程I分离筛选出杂种细胞的方法    ．
              难度：中等
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            • 10． 血管内皮生长因子（VEGF）是目前发现的诱导肿瘤血管生成的最强烈的血锌生成因子，针对VEGF生产的抗肿瘤药物，是治疗癌症的一个方向；芝加哥大学的Katherine Knight博士成功地在转基因兔中获得骨髄瘤样肿瘤，经技术改进，能高产量地生产兔单克隆抗体：我国江苏省某公司首次在全球成功开发出人源化兔单抗药物“注射用人源化抗VEGF单克隆抗体”（SIM63），有效打破了跨国公司的技术垄断．人源化抗体可以大大减少异源抗体对人类机体造成的免疫副反应．请回答下列相关问题：
              （1）动物细胞在体外培养的技术属于    工程，由于人们对动物细胞所需的营养物质没有完全搞淸楚，在使用合成培养基时，通常需要加入    等一些天然成分：在培养时除提供细胞所需的O2外，还需要CO2，其作用是    ．
              （2）在基因工程中，将目的基因导入动物细胞现今极常用、极有效的方法是    ，要在短时间内扩增大量的目的基因采用    技术，这个技术中的关键酶是    ．
              （3）当VEGF作为抗原进入动物体内时，动物体内的某些B细胞分化为浆细胞，这种浆细胞只分泌针对VEGF的一种抗体，但B细胞在体外培养不会无限增殖，解决这一问题的方法是通过动物细胞融合技术得到杂交瘤细胞，常用的化学诱导融合试剂为    ，要分离出杂交瘤细胞，应该用    培养基进行筛选，单克隆抗体最主要的优点是它的    ，并可大量制备．
              难度：中等
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