[生物——选修1：生物技术实践]

将没有吃完的西瓜盖上保鲜膜后放入冰箱，是很多人日常储藏西瓜的办法。但事实上，有时候盖上保鲜膜储藏的西瓜中的细菌种类和数目反而比没用保鲜膜的多。某生物研究小组用保鲜膜保存三天的西瓜表面的瓜瓤制备浸出液，研究细菌的种类和数量。请回答下列问题：

（1）该研究小组需配制用于培养微生物的培养基，配制的培养基一般都含有水、碳源、________和________。一般采用________法对培养基进行灭菌。

（2）为了避免培养基污染，在培养过程中，需将平板________（填“正置”或“倒置”）。为了观察浸出液中微生物的种类和数量，采用________法接种。接种时，为了避免环境中微生物的污染，实验操作应在________附近进行。

（3）在培养20小时后，观察到平板上有形态和颜色不同的菌落，说明西瓜的浸出液中有________（填“一种”或“多种”）细菌。细菌总数越多，说明西瓜被细菌污染的程度越________（填“高”或“低”）。

[生物——选修3：现代生物科技专题]

多不饱和脂肪酸需要从膳食中摄取，人体不能直接合成。科学家通过转基因手段将ω－6脂肪酸脱氢酶基因（FAT1）整合到肉牛基因组，以期提高肉牛体内的多不饱和脂肪酸含量，促进人体健康。请回答下列问题：

（1）将ω－6脂肪酸脱氧酶基因导入肉牛细胞中常用的方法是________，在用PCR技术扩增目的基因时，需要的条件主要有扩增缓冲液、模板DNA、4种原料、________和________。

（2）体外受精获得受精卵时，将优良公牛的精子收集后放在一定浓度的肝素溶液中进行培养，其目的是________。

（3）胚胎移植前可选择发育良好、形态正常的________（填胚胎发育时期）进行________，以实现同卵多胎。

（4）该转基因牛还可以用核移植的方法繁殖，用核移植的方法得到的动物称为________，用于核移植的供体细胞一般选择10代以内的细胞，目的是保持细胞正常的________。

A．[生物——选修1：生物技术实践]

请回答下列有关传统发酵技术在食品工业上应用的问题：

（1）果酒的制作过程中，常用的菌种是________。果醋制作过程中持续通入氧气的原因是________。

（2）检测酒精常用的试剂是重铬酸钾，其原理是在酸性条件下酒精能够使重铬酸钾呈________色。

（3）腐乳的制作过程中发挥作用的酶主要是________。豆腐块要加盐腌制，因为加盐可以抑制微生物的生长，原因是________。

腐乳制作完成后再封装时要将瓶口通过酒精灯的火焰，目的是________。

B．[生物——选修3：现代生物科技专题]

1998年我国培育出首只转基因羊，该转基因羊的乳汁中表达出人凝血因子IX蛋白，人凝血因子IX蛋白是治疗血友病的药物。请回答下列问题：

（1）生产转基因羊的过程中，最核心的步骤是________，为了在羊的乳汁中表达出人凝血因子IX蛋白，应将人凝血因子IX蛋白基因和________连接在一起。和目的基因紧邻的另一端还应含有________。

（2）重组DNA分子上标记基因的作用是________。要检测目的基因是否插入动物细胞的DNA上，常用的方法是________，原理是________。

（3）可利用胚胎分割技术获得多只转基因羊，当对囊胚期的胚胎分割时应注意________，目的是________。

【现代生物科技专题】基因疫苗指的是DNA疫苗，即将编码外源性抗原的基因插入到质粒上，然后将质粒直接导入人或动物体内，让其在宿主细胞中表达出抗原蛋白，诱导机体产生免疫应答。口蹄疫是一种危害严重的偶蹄动物传染病，近年来国内外在口蹄疫基因疫苗研究方面有了许多新的突破．回答下列问题：

（1）获取目的基因后，可利用___________技术获得大量该基因，该过程所利用的酶必须具有___________的特点。

（2）将编码外源性抗原的基因插入到质粒上，此过程在基因工程中称作____________。

（3）将导入目的基因的受体细胞在体外培养至________________阶段后进行胚胎移植，选用的受体动物应符合的性别条件是___________。

（4）欲检测人或动物体内是否具有了抗原蛋白，在分子水平上检测的方法是从转基因人或动物中提取蛋白质，进行______________________。

（5）现已经通过基因工程和胚胎工程技术培育出一头具有口蹄疫免疫特性的高产奶牛，可以采用_______________________技术形成多个重组细胞，经早期胚胎培养获得大量的重组胚胎，再进行____________________就会得到大量具有口蹄疫免疫特性的高产奶牛。

日前，英国研究人员利用最新的3D打印技术，“打印”出了活体胚胎干细胞。实验证明，这些干细胞仍保持着人体胚胎干细胞的正常分化能力。科学家使用活体卵子及皮肤成纤维细胞，在实验室已成功克隆出了数个人体胚胎，进而可以开发出有研究价值的胚胎干细胞。请回答：

（1）自然状况下的胚胎干细胞是由哺乳动物的早期胚胎或                中分离出来的一类细胞。

（2）上述过程中要应用到的动物细胞工程技术有                          、                        。胚胎干细胞在形态上表现为体积小，细胞核大，          明显，在功能上具有                   。

（3）将胚胎干细胞用于检测有毒物质是否引起了基因突变，在分子水平上需要采用         技术。

（4）若选用囊胚进行胚胎分割，要注意对其               做到均等分割。

（5）胚胎移植是否成功，与供体和受体的生理状况有关。在胚胎移植操作中，应对供体和受体母畜进行

              处理才能使胚胎在移植前后所处的生理环境保持一致。

（1）为了使乳汁中含有抗血栓药物，需要获取仅在_____    ___细胞中特异性表达的基因的启动子，与该药用蛋白基因等构建基因表达载体，

并用_______       ___技术将基因表达载体导人山羊的受精卵中，成功后，在胚胎发育的初期，通过___         _____技术分析DNA进行性别鉴定，选取能够发育成母羊的胚胎继续培养成转基因山羊。

（2）科研人员通过以上过程获得了所需的胚胎，可在胚胎发育的__________________阶段采用_______   ____技术在体外获得更多的胚胎。