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            • 1.

              人血清白蛋白(HSA)具有重要的医用价值。科研人员通过生物工程技术获得转HSA基因母牛,以便通过乳腺生物反应器生产HSA,其主要技术流程如下图所示。回答下列问题:

              (1)如上图所示,将牛胎儿成纤维细胞核移入去核卵母细胞中,该技术称为_______________技术;供核的牛胎儿成纤维细胞通常选用传代10代以内的细胞,其原因是____________________________________________________。

              (2)胚胎移植时,为使代孕母牛能处于适合的生理状态,需要用激素对其进行_______处理。

              (3)SRY~PCR法性别鉴定的基本程序是:提取牛胎儿成纤维细胞的DNA,经PCR反应体系扩增SRY基因(Y染色体上特有的性别决定基因)片段,然后对扩增产物进行检测。

              ①PCR反应体系中除含缓冲液、模板DNA、dNTP(包含dATP、dCTP、dGTP、dTTP)、引物以外,还应含有______________;其中,dNTP的作用是___________________,引物应选用下图中的_________(填图中标号)。

              ②若扩增产物含大量SRY基因片段,则该种牛胎儿成纤维细胞________(选填“能”或“不能”)用作技术流程中转化过程的受体细胞。

              (4)从细胞水平鉴定早期胚胎性别的方法是_______________。

            • 2. 回答下列(一)、(二)小题:

                  (一)要获得遗传特性单一的大肠杆菌菌种,一般必须对原有的大肠杆菌菌种进行扩大培养、并利用纯化技术得到单菌落的菌种。请回答下列有关大肠杆菌的培养和分离实验的相关问题:

                  (1)对买回来的大肠杆菌菌种进行扩大培养,一般用LB培养基,在培养基中为微生物提供碳源、氮源和能源的物质主要是__________,为调节渗透压,要加入一定量的___________。为进行大肠杆菌的分离,还要加入琼脂配制成固体培养基,并进行倒平板的操作。

                  (2)获得纯净微生物培养物的关键是_____________________,为此,必须对培养器皿、接种用具和培养基进行严格灭菌。培养器皿和培养基一般采用_____________________法灭菌,接种环采用灼烧法灭菌。同时在接种或倒平板操作时,除了在超净台上进行操作并对实验者的衣着、手和实验空间进行严格清洁和消毒外,还必须_________________________,以防止空气中的杂菌污染。

                  (3)大肠杆菌菌种的扩大培养一般采用液体培养基,接种后将培养基置于37℃摇床振荡条件下培养12小时。菌种的分离时一般在固体培养基上采用____________法,并将培养皿_______________状态。

                  (二)科学家将蜘蛛的蛛丝基因导入山羊体内,创造出转基因山羊,使羊奶中含有一种独特的蛛丝蛋白。生产原理如下图。请回答:

                  (1)将蛛丝蛋白基因和质粒通过甲过程形成的X物质为_____________。如果选取的受体细胞为体细胞,当在培养过程中出现接触抑制现象时,需要进行____________培养。要使重组细胞具有发育的全能性,乙过程需要的技术操作是____________。

                  (2)下列关于丙过程的叙述,正确的是______。

                  A.该过程为动物细胞培养,目的是获得更多的重组细胞

                  B.该过程所用培养液的成分往往是相同的

                  C.该过程在无菌条件下进行,需要提供CO2来调节pH

                  D.通过现代生物技术可以将重组细胞在体外培养成山羊个体

                  (3)为了快速繁殖转基因山羊,还可在丁过程前对早期胚胎进行____________,经培养后再分别移植到____________________的代孕母羊的相应部位。

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