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            • 1.
              科学家研究发现绒山羊的羊绒质量与毛角蛋白Ⅱ型中间丝(KIFⅡ)基因密切相关,获得转KIFⅡ基因的高绒质绒山羊的简单流程如图1所示。图2表示KIFⅡ基因与pZHZ1质粒构建重组质粒的过程,A、B、C、D为四种识别切割序列完全不同的限制酶的酶切位点。已知质粒pZHZ1的长度为3.7 kb(1 kb=1 000对碱基),其中A~B区域长度为0.8 kb,B~C区域长度为0.2 kb,C~D区域长度为0.5 kb。请回答下列问题:

                     图1                                                                         图2

                                      图3

              (1)图1中构建的重组表达载体,目的基因的上游应有____,它是_____酶识别和结合的部位,驱动基因的转录。 

              (2)在图1过程③中,用_________激素处理以获取更多的卵(母)细胞,这些卵(母)细胞需在体外培养到________,方可进行过程④的操作。 

              (3)图1中过程④采用的生物技术是________,得到的重组细胞发育为早期胚胎后,可通过_________技术获得较多胚胎。 

              (4)现分别用限制酶A、D切割图2中重组质粒pZHZ2样品,结果被酶A切割成1.7 kb和3.4 kb两个片段,被酶D切割成1.9 kb和3.2 kb两个片段。据此判断KIFⅡ基因大小为____,并请将目的基因内部的酶D切割位点用相应的字母(D)标注在图3中。 

            • 2. 埃博拉病毒(EBO)虽纤维状,EBO衣壳外有包膜,包膜上有5种蛋白棘突(VP系列蛋白和GP蛋白),其中GP蛋白最为关键,能被宿主细胞强烈识别.请回答下列问题:
              (1)基因疫苗指的是DNA疫苗,要获得编码GP蛋白抗原的基因疫苗,首先要提取出病原体的RNA,并将RNA______.要大量获得表达特异抗原的基因,可采用PCR技术进行扩增.
              (2)以GP蛋白作为疫苗比利用毒性减弱的埃博拉病毒作疫苗更安全,其原因是______.为了从牛分泌的乳汁中生产GP蛋白,在基因导入牛受体细胞前,基因的首段必须含有使其仅能在牛的乳腺细胞中特异性表达的______,才能驱动转录过程.
              (3)为了提高胚胎的利用率,可采用胚胎分割技术.进行胚胎分割时,应选择发育良好、形态正常的囊胚或______进行操作.在对囊胚阶段的胚胎进行分割时,要注意将______.转基因牛是否培育成功,可以通过______技术从分子水平进行检测.
              (4)科研人员利用经EBO免疫后小鼠的______与鼠的瘤细胞进行融合成杂交瘤细胞,培养后可以获得纯净的单一品种抗体,其特点是______,可以用此抗体与药物制成“生物导弹”,抗击EBO.
            • 3.

              日前,英国研究人员利用最新的3D打印技术,“打印”出了活体胚胎干细胞。实验证明,这些干细胞仍保持着人体胚胎干细胞的正常分化能力。科学家使用活体卵子及皮肤成纤维细胞,在实验室已成功克隆出了数个人体胚胎,进而可以开发出有研究价值的胚胎干细胞。请回答:

              (1)自然状况下的胚胎干细胞是由哺乳动物的早期胚胎或_____中分离出来的一类细胞。

              (2)上述过程中要应用到的动物细胞工程技术有________、_________。胚胎干细胞在功能上具有_________。

              (3)将胚胎干细胞用于检测有毒物质是否引起了基因突变,在分子水平上需要采用

              ______________技术。

              (4)若选用囊胚进行胚胎分割,要注意对其__________做到均等分割。

              (5)胚胎移植是否成功,与供体和受体的生理状况有关。大量的研究已经证明,为胚胎在受体内存活提供可能的生理基础是_____________

            • 4.

              科学家将蜘蛛的蛛丝蛋白基因导入山羊体内,得到转基因山羊,使羊奶中含有一种独特的蛛丝蛋白,生产原理见图。请回答:


              (1)将蛛丝蛋白基因和质粒通过甲过程形成的X物质为_____,需要的工具酶是___________________。如果选取的受体细胞为体细胞,一般通过________法将甲导入进受体细胞。当在培养过程中出现接触抑制现象时,需要进行______培养。要使重组细胞具有发育的全能性,乙过程需要的技术操作是________。

              (2)下列关于丙过程的叙述,正确的是______。

              A.该过程为动物细胞培养,目的是获得更多的重组细胞

              B.该过程所用培养液的成分往往是相同的

              C.该过程在无菌条件下进行,需要提供CO2来调节pH

              D.通过现代生物技术可以将重组细胞在体外培养成山羊个体

              (3)为了快速繁殖转基因山羊,还可在丁过程前将早期胚胎培养到__________阶段,再进行_______,经培养后再分别移植到_______的代孕母羊的__________部位。

            • 5.

              某课题组为解决本地奶牛产奶量低的问题,引进了具高产奶基因但对本地适应性差的纯种公牛。

              (1)拟进行如下杂交:

              A(具高产奶基因的纯种)×♀B(具适宜本地生长基因的纯种)→C

              选择B作为母本,原因之一是胚胎能在母体内正常______。若C中的母牛表现为适宜本地生长,但产奶量并不提高,说明高产奶是______性状。为获得产奶量高且适宜本地生长的母牛,根据现有类型,最佳杂交组合是_______,后代中出现这种母牛的概率是________(假设两对基因分别位于不同对常染色体上)。

              (2)用以上最佳组合.按以下流程可加速获得优良个体。

              精子要具有受精能力,需对其进行_________处理;卵子的成熟在过程_________中完成。在过程④的培养基中含有葡萄糖,其作用是________。为筛选出具有优良性状的母牛,过程⑤前应鉴定胚胎的___________。子代母牛的优良性状与过程_________的基因重组有关。

              (3)为了提高已有胚胎的利用率,可采取______技术。

            • 6.

              请回答下列有关胚胎工程和基因工程方面的问题:

              (1)在“试管牛”的培育过程中,要使精子和卵母细胞在体外成功结合,需要对精子进行__________处理。卵子受精的重要标志是________________。

              (2)若要使获得的转基因牛分泌的乳汁中含有人干扰素,要将干扰素基因_______________________________________与_________________等调控组件重组在一起构建基因表达载体,通过_______方法将基因表达载体导入牛的___________(填“受精卵”或“乳腺细胞”)中。

              (3)通常奶牛每次排出一枚卵母细胞,采用___________激素处理可使其超数排卵。在核移植过程中,作为受体的成熟卵母细胞在核移植前需要进行__________处理。

              (4)在牛胚胎移植前,通过____________技术可获得较多胚胎。进行该项技术时,应选用发育良好的、形态正常的_______________。

            • 7.

              胚胎工程技术包含的内容很丰富,如图是胚胎工程技术研究及应用的相关情况,其中供体1是良种荷斯坦高产奶牛,供体2是黄牛,请据图回答下列问题:

              (1)应用1中获得的小牛,其遗传物质来源于___________ ,细胞B的名称是_______。

              (2)应用2中牛完成体内受精的场所是__________________,刚种植在子宫内的胚胎其发育程度一般为________,胚胎种植后可以通过________从母体获得正常发育所需要的物质。这种试管牛的产生,采用的胚胎工程技术有_____________(至少答出2种)等。

              (3)应用3中细胞C、D分别取自_____________、_____________。

              (4)应用4中通过胚胎分割技术获得二分胚①和②,同时,可以通过取样________进行分子水平的早期胚胎性别鉴定;也可以在细胞水平上通过对________的分析进行性别鉴定。

            • 8. 回答下列问题

              (1)基因工程的核心步骤是________________。图甲是基因表达载体的模式图,图中插入基因和抗生素抗性基因分别作为基因工程中的_________和____基因。

              (2)模型是人们为了某种特定目的对认识的对象所做的一种简化的概括性描述,模型构建是生物学教学、研究和学习的一种重要方法。图乙是基因工程的操作流程,图中A和B分别表示质粒和目的基因,则C和D可分别表示____________和_______________ 。

              (3)有人提出用细胞核移植技术构建重组细胞来生产单克隆抗体,试用相关的图示及文字(括号中填文字)完善图丙表示该过程:

              (4)高等哺乳动物受精后不久,受精卵开始进行细胞分裂。经桑椹胚、囊胚、原肠胚和组织器官的分化,最后发育成一个完整的幼体,完成胚胎发育的全过程。图中②、③依次为________和_______________。若要对图所示胚胎进行胚胎分割,则正确的操作方法的是图中的_________。

            • 9. 2018年1月25日,我国研究人员在世界上率先利用去甲基化酶(Kd4d)的mRNA,经体细胞核移植技术培育出第一批灵长类动物--食蟹猴,可作为研究癌症等人类疾病的动物模型。下图为体细胞核移植技术培育食蟹猴的操作过程,请回答:

              (1)获得食蟹猴的体细胞核移植技术难度明显高于胚胎细胞核移植,原因是______,恢复其全能性较难。
              (2)进行过程①时,为提供成纤维细胞培养所需的无菌无毒环境,应进行的实验措施是______,通常还要添加一定量的抗生素,以防培养过程中的污染。
              (3)图中过程⑤的实质是早期胚胎在______条件下空间位置的转移。受体子宫对移入的胚胎基本不发生______反应,为胚胎的存活提供了可能。
              (4)若要快速获取两个食蟹猴,可利用此胚胎进行______,但要注意保证内细胞团均分,否则会______。
              (5)上述实验可以应用于医疗领域,进行自体移植,即我国政府允许的______克隆,但我国政府禁止______克隆。
            • 10. 现代生物工程技术推动了医药学、免疫学等领域的发展,依据现代生物工程技术的相关知识和原理回答下列问题:
              (1)利用基因工程技术实现胰岛素的批量生产是目前糖尿病治疗的新思路,该过程中的关键操作环节是______,该环节目的是使胰岛素基因______,同时,使其能够表达和发挥作用。
              (2)单克隆抗体的制备中,将经抗原免疫的B淋巴细胞与骨髓瘤细胞进行融合,再用特定的选择性培养基进行筛选,获得杂交瘤细胞后,还需进行______培养和抗体阳性检测,经过多次筛选,就能获得能分泌单一抗体的杂交瘤细胞。最后获得的杂交瘤细胞只能产生一种单一抗体的原因是______。
              (3)在胚胎工程中,胚胎移植前,通过______技术可获得较多胚胎;移植后的胚胎能在受体子宫中存活的生理基础是______。
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