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            • 1.

              科学家从哺乳动物早期胚胎中分离出一类胚胎干细胞(ES细胞),并进一步将ES细胞诱导分化为某些组织细胞。回答下列问题:

              (1)胚胎干细胞(ES细胞)可由囊胚的__________________________分离培养获得,其可产生多种多样的细胞的根本原因是__________________。

              (2)获得的动物细胞进行培养时,一般需控制在10代以内,原因是__________________________。

              (3)离体培养胚胎干细胞时,一般需要在合成培养基中加入____________等天然成分,培养时所需的气体主要有O2和CO2,CO2的主要作用是______________。

              (4)研究发现,细胞因子能够调控某动物干细胞分化。放线菌素D能通过阻碍RNA聚合酶的功能进而抑制细胞因子的调控,由此推断该抑制过程发生在____________(填"复制""转录"或"翻译")水平。

              (5)研究还发现,胚胎干细胞可以诱导分化为造血干细胞等各种细胞,这体现了胚胎干细胞具有__________________的特点,临床上可用诱导干细胞定向分化的方法修补损伤或衰老的组织器官,从而解决______________问题。

            • 2.

              请回答胚胎工程方面的问题:

              (1)应用胚胎工程技术可以培育出“试管牛”。试管牛的培育需经过体外受精、___________、__________以及在母体中发育和产出等过程。

              (2)在“试管牛”的培育过程中,要使精子和卵母细胞在体外成功结合,需要对精子进行_________处理。另外,培养的卵母细胞需要发育至_________ 期,该时期在显微镜下可观察到次级卵母细胞和______________。

              (3)通常奶牛每次排出一枚卵母细胞,利用____________________激素处理可使其一次排出多枚卵母细胞,从而获得多枚胚胎。再通过胚胎移植及胚胎分割可大大提升供体的繁育能力。进行胚胎分割时,一般采用发育良好、形态正常的_____________。对胚胎进行分割时,要特别注意将________均等分割,否则会影响分割后的胚胎恢复和进一步发育。

              (4) 胚胎干细胞可以分化为成年动物体内任何一种组织细胞,因此具有极高的应用价值。通常胚胎干细胞可以从________________或__________________中分离得到。

            • 3.

              (1)ES细胞能分化出成体动物的所有组织和器官,这体现了ES细胞的_____________。为获得适合人体移植的猪器官,减弱或消除排斥反应,可对ES细胞进行___________。

              (2)—个ES细胞变成ES细胞群的过程中,细胞_________(填“可能”、“不可能”)出现接触抑制现象。下列关于动物细胞培养和核移植的叙述,正确的是__________。

              A.从原代培养物或细胞系中选择和纯化无法获得细胞株

              B.动物细胞培养基中添加胰岛素的目的是调节血糖浓度

              C.胚胎干细胞培养时,加滋养层是为了抑制胚胎干细胞分化

              D.核移植形成的重组细胞在初次分裂时核基因不转录

              (3)为获得含兔褐毛基因的转基因小鼠,可将褐毛基因通过_________法导入ES细胞核中,再将该核移植到去核的卵细胞中,经过_____________、胚胎培养、胚胎移植,最终由代孕母鼠产下克隆小鼠。

              (4)为获得大量的上述克隆小鼠,可用转基因的小鼠胚胎成纤维细胞进行体细胞克隆。因为含有褐毛基因的胚胎成纤维细胞可进行__________培养,理论上可获得无限个转基因小鼠。

            • 4.

              运用细胞培养技术可以从哺乳动物的早期胚胎中获得胚胎干细胞(ES细胞),如图所示。


              (1)胚胎干细胞除来源于早期胚胎外,还可来源于_____________。它在形态上的特点是:______小、______大、______明显;它在功能上的特性是具有发育的_____________。

              (2)在体外培养过程中,必须用___________处理内细胞团,使之分散成单个细胞,在体外诱导可以定向分化成各种类型的细胞,其分化的原因是_____________________________________。

              (3)通过ES细胞培育出的人造器官,在临床应用上的最大优点是解决了移植器官和患者之间的_________________问题。

            • 5.

              科学家通过Lazl基因的异位表达,在体内将小鼠胚胎干细胞同时诱导出了游动的精子和卵子.请回答:

              (1)胚胎干细胞可来源于囊胚期的______或胎儿的原始性腺.其在体外培养能不断增殖、自我更新,在功能上具有发育的______.

              (2)胚胎干细胞的培养和诱导等操作均需在严格的_______环境条件下操作,且配制的合成培养液通常需要加入________等一些天然成分,还要向培养液中通入一定量的氧气和二氧化碳,氧气参与细胞代谢,二氧化碳可以维持培养基的_______.

              (3)若将诱导的精子和卵子进行体外受精,对精子进行获能处理的常用方法是________和________.判断哺乳动物的卵子已经受精的重要标志是在卵黄膜和透明带的间隙可以观察到________.

              (4)将早期胚胎分割、移植可获得多个同卵胚胎,这属于动物的_____生殖,胚胎分割时要将_______均等分割.

            • 6.

              I:下列是与芳香油提取相关的问题,请回答:

              (1)玫瑰精油适合用_________________法提取,其理由是玫瑰精油_________________________。蒸馏时收集的蒸馏液__________ (是、不是)纯的玫瑰精油。

              (2)蒸馏瓶中的水和原料量比例为_________,蒸馏过程中,影响精油提取量的主要因素有_________________和____________________。

              (3)如果蒸馏过程中不进行冷却,则精油提取量会__________,原因是_____________________。


              II:Rag2基因缺失小鼠不能产生成熟的淋巴细胞。科研人员利用胚胎干细胞(ES细胞)对Rag2基因缺失小鼠进行基因治疗。其技术流程如下图:


              (1)步骤①中所选的卵母细胞应处于______________期。

              (2)步骤②中,重组胚胎培养到囊胚期时,可从其______________分离出ES细胞,ES细胞在形态上表现为____________________的特点。

              (3)步骤③中,需要构建含有Rag2基因的____________________。可以根据Rag2基因的核苷酸序列设计合成____________________,利用______________技术扩增Rag2基因片段。用HindⅢ和PstⅠ限制酶分别在目的基因所在DNA片段两侧进行酶切获得Rag2基因片段。为将该片段直接连接到表达载体,所选择的表达载体上应具有_______________________酶的酶切位点。

              (4)为检测Rag2基因的表达情况,可提取治疗后小鼠骨髓细胞的蛋白质,用抗Rag2蛋白的抗体进行________________________________。

            • 7.

              克隆羊的成功轰动世界,它不仅奠定了疾病克隆性治疗的基础又解决了器官移植中供体不足的问题,同时也给人类带来了一些过去尚未遇到的问题.下图为人类对克隆羊技术的拓展图和应用。请据图回答问题。

              (1)图中所涉及的现代生物技术有__________________________________                 等。

              (2)下列有关胚胎移植的叙述正确的有(多选)(    )

               A.冲卵指的是从子宫中冲出胚胎,而非冲出卵子

               B.只有供、受体生理环境高度一致,移入受体的胚胎才能被接受,并继续发育

               C.供体和受体要进行免疫检查,防止发生免疫排斥反应

               D.不同动物其胚胎移植的时间不同,人的胚胎移植最好在四细胞阶段进行

              (3)图中两个婴儿长大后,外貌、性格和其他特征与原型男人相同,这说明__________具有全能性。

              (4)使用培养基进行胚胎干细胞培养时,通常要加入___________________等天然成分,除了保证被培养细胞处于无菌、无毒及充足氧气的环境中,还需要保证细胞生活所需的____________等 ;早期胚胎发育在___________阶段以前的细胞是全能细胞。

              (5)图中从“内细胞团到胚胎干细胞”的培养过程中,必须用_____________处理内细胞团,使之分散成单个细胞。干细胞形成组织、器官时必须要进行细胞的分裂和分化。

              (6)在体外培养胚胎干细胞能否获得动物器官?为什么?________________________。

            • 8. 如图为经过体外受精和胚胎分割移植培育优质奶牛的过程.请回答下列问题:
              (1)体内受精过程中精入卵的两道屏障是                               ,帮助精子穿越放射冠和透明带的是           反应。

              (2)胚胎分割时,一般采用发育良好、形态正常的______.对胚胎进行分割时,要特别注意将______均等分割,否则会影响分割后的胚胎恢复和进一步发育.来自同一胚胎分割产生的后代具有相同的遗传物质,因此,胚胎分割可以看作动物______的方法之一.

              (3)①过程分割出的少量胚体细胞用来做性别鉴定,该技术常采用的方法是______.
              (4)通常胚胎干细胞可以从                      中分离得到.

              (5)受体母牛必须和供体牛属于         .移植后的胚胎能在受体子宫中存活的生理基础是       

            • 9.

              “二娃”政策实施后,一些高龄夫妇选择“试管婴儿”技术孕育二胎:

              (1)要使精子和卵细胞在体外成功融合,首先须采集到成熟的卵细胞,最常用的方法是卵巢经过超数排卵处理后,使用超声监视器确定卵泡的位置,插入穿刺针吸取卵泡液,取出_____,在体外进行人工培养至减数第二次分裂的中期,该时期在显微镜下可观察到次级卵母细胞和______。为了达到超数排卵目的,常使用的激素是_____。同时对于男方提供的精子,须经系列处理与培养,以达到______状态。受精卵形成后,经人工培养至_____阶段,借助胚胎移植技术回输至女方体内,经过自然孕育,即得试管婴儿。

              (2)胚胎干细胞研究发展前景诱人,它具有发育全能性和二倍体核型。培养胚胎干细胞的培养基中,必须加入无机盐、有机盐、激素、氨基酸、核苷酸等营养成分,以及______等物质。

            • 10. Rag2基因缺失小鼠不能产生成熟的淋巴细胞.科研人员利用胚胎干细胞(ES细胞)对Rag2基因缺失小鼠进行基因治疗.其技术流程如图:

              (1)步骤①中,在核移植前应去除卵母细胞的 ______ (结构).
              (2)步骤③中,需要构建含有Rag2基因的表达载体.可以根据Rag2基因的 ______ 设计引物,利用PCR技术扩增Rag2基因片段.用Hind III和PstI限制酶分别在片段两侧进行酶切获得Rag2基因片段.为将该片段直接连接到表达载体,所选择的表达载体上应具有 ______ 酶的酶切位点.
              (3)为检测Rag2基因的表达情况,可提取治疗后小鼠骨髓细胞的 ______ ,用抗Rag2蛋白的抗体进行杂交实验.
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