[生物—选修1：生物技术实践]

请回答有关物质提取、微生物培养与应用的问题：

（1）实验室分离叶绿体中的色素常用的方法是________，从胡萝卜中提取胡萝卜素常用的方法是________法。

（2）微生物培养过程中，获得纯净培养物的关键是________。常用的对培养皿进行灭菌的方法是________。

（3）从土壤中分离尿素分解菌的过程中，应向以________为唯一氮源的培养基中加入________指示剂。

（4）纯化菌种和统计某活菌的数目时，宜采用的接种方法是________，用这种方法统计的菌落数往往比活菌的实际数目低，其原因是________。

请回答下列有关的问题：

（1）鉴定尿素分解菌需在培养基中加入        指示剂。纤维素分解菌的筛选方法                              

（2）制作泡菜时，所用盐水使用前，盐水需要         。为了缩短制作时间，有人还会在盐水中加入少量陈泡菜液，加入陈泡菜液的目的是         。

（3）在采用平板划线法分离硅酸盐细菌时，第二次及之后的划线，总是在上一次划线末端开始，这样做的目的是                                。

（4）水中蒸馏的方法对于有些原料不适用。这是因为水中蒸馏会导致                   、和                 等问题。

（5）萃取的效率主要取决于                     和                ，同时还要受到原料颗粒的大小、紧密程度、含水量、萃取的温度和时间等条件的影响。

某科研兴趣小组欲对土壤中分解尿素的细菌进行分离纯化和计数，请帮助完成实验。

（1）实验原理：分解尿素的细菌由于含有脲酶，可将                  而使周围环境的PH上升，在                的培养基中加入                 指示剂，对其进行分离、鉴别；通过平板上的菌落数可以推测样品中的活菌数。

（2）实验简要步骤：

①土壤取样并制备培养基：用                 法对培养基进行灭菌。

②分离纯化该细菌：用稀释涂布平板法进行接种，首先需对土壤滤液进行              ，再分别取土壤滤液0.1mL涂布在每一平板上。

③培养、观察与计数。

（3）有同学发现，稀释倍数为10⁴的5个平板上，长出的菌落数分别为9、147、150、153和360，则每升土壤样液中的细菌数量为               个。

（4）某些同学想将分离出的目的菌在-20℃长期保存，菌液中常需要加入一定量的____（填化学物质）。

（生物选修）某科研兴趣小组欲对土壤中分解尿素的细菌进行分离纯化和计数，请帮助完成实验．

（1）实验原理：分解尿素的细菌由于含有脲酶，可将 而使周围环境的PH上升，在以尿素为唯一氮源的培养基中加入 指示剂，对其进行分离、鉴别；通过平板上的菌落数可以推测样品中的活菌数．

（2）实验简要步骤：

①土壤取样并制备培养基：用 法对培养基进行灭菌．

②分离纯化该细菌：用稀释涂布平板法进行接种，首先需对土壤滤液进行 ，再分别取土壤滤液0.1mL涂布在每一平板上．

③培养、观察与计数．

（3）有同学发现，稀释倍数为10⁴的5个平板上，长出的菌落数分别为9、147、150、153和360，则每升土壤样液中的细菌数量为             个．

（4）某些同学想将分离出的目的菌在﹣20℃长期保存，菌液中常需要加入一定量的                  （填化学物质）．

【生物——选修1：生物技术实践】

某研究小组从牛的瘤胃中采集样本，进行分解尿素的微生物的分离与计数。实验基本步骤如下：

（1）分解尿素的微生物含有_______________，因此，配制培养基时以尿素作为唯一氮源，尿素会被分解成_________使培养基的碱性增强。

（2）配制培养基时，需添加琼脂，琼脂起________________作用；培养基中添加___________作为指示剂，可使目标菌落的周围产生红色环带。

（3）对尿素溶液进行灭菌的最适方法是___________灭菌。

  A.高压蒸汽  B.干热  C.添加抗生素 D.过滤  E.紫外线照射   F. 70﹪酒精浸泡

（4）该小组在接种前，随机取若干灭菌后的空白平板先行培养了一段时间，这样做的目的是__________________________；然后将1mL瘤胃样液稀释1000倍，在3个平板上用涂布法分别接入0.1mL稀释液；经适当培养后，3个平板的菌落数分别为49、47和45。据此可得出每升瘤胃样液中分解尿素的微生物活菌数为__________，理论上，统计的菌落数往往_____（低、等、高）于接种的实际活菌数目。

[生物——选修1：生物技术实践]

已知硅酸盐细菌在甲（尿素为唯一氮源）、乙、丙培养基上均能生长。表1表示以尿素为唯一氮源的培养基的配方，表2是每种培养基上每个稀释度的菌落数及菌落直径。请回答下列问题：

表1

表2

（1）表1从物理性质看属于________培养基，按用途划分属于培养基。

（2）为统计硅酸盐细菌的数目，应采用________法进行接种，该方法的所有操作都应在________环境中进行。表2中，稀释度为________时，统计的结果较为可靠。

（3）为检测培养基灭菌是否彻底，应进行的操作是________。由表2中的数据得出，用________培养基分离硅酸盐细菌的效果最好。

（4）甲培养基中加入________指示剂，可根据指示剂变红的情况初步鉴定菌种分解尿素的情况。

[生物——选修1：生物技术实践]

已知尿素分解菌合成的脲酶能将尿素分解成氨。回答下列问题：

（1）从土壤中分离尿素分解菌时，首先要进行选择培养，该过程使用的培养基中要添加________作为唯一氮源；制备上述培养基时，在倒平板之前要进行灭菌处理，常用的灭菌方法是________；而对接种环等金属用具常用的灭菌方法则是________。

（2）接种尿素分解菌后的培养基需要倒置培养，原因是________。若采用稀释涂布平板法检测土壤样液中的尿素分解菌含量，在涂布接种前，应随机选取若干个灭菌后的空白平板先培养一段时间．这样做的目的是________；然后，将1mL样液稀释100倍，在3个平板上用涂布法分别接入0.1mL稀释液，经适当培养后，3个平板上的菌落数分别为56、58和60，据此可得出每升土壤样液中的活菌数为________。

（3）鉴别培养基中是否存在尿素分解菌时，可在培养基中加入________指示剂；如果有尿素分解菌存在，则培养基中该菌落的周围会出现红色。

某研究小组从牛的瘤胃中采集样本，进行分解尿素的微生物的分离与计数。实验基本步骤如下：

请回答：

（1）分解尿素的微生物含有_______________，因此，配制培养基时以尿素作为唯一氮源，尿素会被分解成_________使培养基的碱性增强。

（2）配制培养基时，需添加琼脂，琼脂起________________作用；培养基中添加___________作为指示剂，可使目标菌落的周围产生红色环带。

（3）对尿素溶液进行灭菌的最适方法是___________灭菌。

  A.高压蒸汽  B.干热   C.添加抗生素  D.过滤   E.紫外线照射    F. 70﹪酒精浸泡

（4）该小组在接种前，随机取若干灭菌后的空白平板先行培养了一段时间，这样做的目的是__________________________；然后将1mL瘤胃样液稀释1000倍，在3个平板上用涂布法分别接入0.1mL稀释液；经适当培养后，3个平板的菌落数分别为49、47和45。据此可得出每升瘤胃样液中分解尿素的微生物活菌数为__________，理论上，统计的菌落数往往_____（低、等、高）于接种的实际活菌数目。

（1）微生物的分布：微生物主要分布在富含                 的土壤表层；不同微生物对pH值的要求不同，细菌常生活在                 性的环境中。

（2）微生物的消毒和灭菌：在菊花组织培养中，对外植体常用                        和氯化汞进行消毒；在微生物培养中，对培养基常用                   方法进行灭菌。

（3）微生物的接种：微生物接种的方法很多，最常用的是               和             。

（4）微生物的计数：运用活菌计数法统计的菌落数往往比活菌的实际数目低，原因是                                                              。

（5）微生物的鉴定：为筛选出纤维素分解菌，应向培养基中加入                染料，将呈           反应，再依据培养基中是否产生                   来筛选纤维素分解菌；为检测尿素分解菌的存在与否，在以尿素为唯一氮源的              （选择、鉴别）培养基中加入              指示剂，如果存在尿素分解菌，则指示剂将变红色。

（1）进行①过程的目的是            ；②过程所使用的接种方法是             。用该接种方法对微生物进行计数时，统计的菌落数往往比活菌的实际数目             ，原因是                                  。

（2）从用途上来说，Ⅰ号培养基属于        培养基，制备该培养基的步骤是：计算→称量→溶化→       →         。由于瘤胃中的微生物多为厌氧菌，接触空气后会死亡，因此分离其中能分解尿素的微生物除了需要准备Ⅰ号培养基外，还要提供       的条件。此培养条件也是        （填“果醋”或“果酒”）制作过程中需要的。

（3）在接种前，随机取若干灭菌后的空平板先行培养了一段时间，这样做的目的是    。

（4）以尿素为唯一氮源的培养基培养“目的菌”后，加入             指示剂后变红色，说明“目的菌”能分解尿素。理由是                                     。

（5）为进一步确定取自瘤胃中液体的适当稀释倍数，将接种的培养皿放置在37℃恒温培养箱中培养24h-48h，观察并统计具有红色环带的菌落数，结果如下表，其中          倍的稀释比较合适。假设每个平板分别接入0.1mL稀释液，据此可得出每毫升瘤胃液体中的活菌数为               个。