某生物兴趣小组通过测定土壤中的微生物的种类、含量等来了解其土质情况，并做了相关微生物的分离工作。回答相关问题。

⑴获得纯净培养物的关键是___________________________，这是研究和应用微生物的前提。

⑵从土壤中分离纤维素分解菌时，常从公园里、街道旁、花盆中的土壤或是农田、菜园土选取土壤时，原因是___________________________。

⑶该小组对某种菌进行扩大培养时等分为两组，A组静置培养，B组振荡培养。结果发现B组比A组的细菌要多得多，原因是_______________________________（答两点）。

⑷小组进一步发现，该土壤中只有一种真菌，欲使其从土壤中与其它细菌分离开，可在牛肉膏-蛋白胨培养液中加入___________。分离纯化后提取DNA测序发现含有产脲酶的基

因序列，请设计实验证明该种真菌可合成脲酶（简要说明实验步骤，结果，结论。相关试剂、仪器、菌种等都可提供）____________________

下表是筛选异养型细菌的培养基配方。回答下列问题：

(1)苯胺是致癌物质，土壤中有分解苯胺的异养型细菌，若要筛选此异养型细菌，则此培养基中的成分X除了为目的菌提供能源外，还能提供_________，该培养基从物理性质看属于________培养基。中学实验室中对培养基进行灭菌的常用方法是____________。接种前，用灭菌后未接种的培养基培养一段时间，观察是否形成菌落，目的是________________________________________________________________________。

(2)如图是采用纯化微生物培养的两种接种方法接种后培养的效果图，获得图A效果的接种方法是____________________。运用获得图B效果的方法接种时，操作上应注意每次划线前要灼烧________。

(3)在以尿素为唯一氮源的培养基中加______________可初步鉴定该种细菌能否分解尿素；在筛选能够分解纤维素的微生物过程中，常用到________染色法。

(1) 图中细菌培养基和选择培养基成分上的主要区别是后者_________。

(2) 土壤样品需稀释后振荡摇匀，用_________准确吸取0.1 mL土壤悬液，滴加在培养基中，均匀涂布，将培养皿倒置后放在_________中培养一段时间，获得细菌菌落。

(3) 在5个细菌培养基平板上，共接种稀释倍数为10⁵的土壤样品液0.5 mL，培养一段时间后，平板上长出的细菌菌落数分别为13、156、462、178和191，则每毫升土壤样品中的细菌数量为

_________个。

(4) 研究人员用鉴别培养基来鉴定细菌，刚果红培养基平板上得到部分有透明降解圈的菌落(见图)，图中菌落_________的细菌最适合作为目的菌保存。不考虑基因突变，上图甲中鉴别培养基中的菌落周围是否都有透明圈？_________

（5）某同学在纯化土壤中的细菌时，发现培养基上的菌落连成一片，最可能的原因是________ 。

(6) 图中菌种若要长期保存，应该将其放在_________条件下。

如图为分离微生物的流程示意图，请据图回答问题：

（1）微生物培养时，选取_________________时的记录作为结果，这样可以防止因培养时间不足而导致遗漏菌落的数目．

（2）若要对分离的细菌做进一步的鉴定，还需借助物理化学的方法：若要鉴定是否有分解尿素的细菌，可以在以尿素为唯一氮源的培养基中加入_________指示剂，若指示剂变红，说明培养基的PH____________，这样可以鉴定这种细菌可以分解尿素；若要鉴定是否有分解纤维素的细菌，在长出菌落的培养基上，覆盖_________染液，10～15min后，倒去该染液，再加入1mol/L的NaCl溶液，15min后，也倒去该溶液，若菌落的周围出现__________，说明此细菌能分解纤维素．

（3）在 10⁵ 稀释度下求出 3 个平板上菌落数的平均值为63，那么，每克样品中的菌落数为_______________．

（2）为从富含纤维素的土壤中分离获得纤维素分解菌的单菌落,某同学设计了甲,乙两种培养（成分见下表）;培养基甲______（填"能"或"不能"）用于分离和鉴别纤维素分解菌，原因是______________。

（4）在用稀释涂布平板计数法对纤维素分解菌数目进行统计时，统计的菌落数往往比活菌的实际_______________________。如果探究温度对纤维素酶活性的影响，应该保持______________、______________等不变(至少答两项)

如图是工业上利用微生物分解纤维素生产乙醇的基本工作流程，请回答下列问题：

（1）微生物一般来自土壤，图中①过程选取产酶微生物时应选择__________的土壤，在鉴定和筛选这种微生物时需用_______对纤维素进行染色并制成选择培养基．最后还要在平板培养基上分离纯化目的菌。

（2）图中②环节获得的酶是一种复合酶，一般认为它至少包括三种组分，分别为C₁酶、C_X酶和________。前两种酶使纤维素分解成______，第三种酶将其进一步分解成葡萄糖。

（3）⑤环节常用的菌种是________．微生物在果酒、果醋、腐乳、泡菜等食品加工方面应用广泛，其中与果醋、泡菜制作密切相关的微生物分别是______和_______。

（4）产生酒精的过程中，要注意对发酵装置进行灭菌处理．通常情况下，在微生物培养过程中，实验室常用的灭菌方法有_______、________和高压蒸汽灭菌．无菌技术要求实验操作应在酒精灯火焰附近进行，其目的是___________。

某生物兴趣小组试图探究牛和山羊的瘤胃中的微生物对尿素和纤维素是否有分解作用，设计了实验，并成功筛选到能降解尿素的细菌和能分解纤维素的细菌．

（1）分离分解尿素的细菌培养基的主要特点是                          。

在进行该实验时，甲同学从培养基上筛选出大约150个菌落，而其他同学只选择出大约50个菌落。甲同学的实验结果产生的原因可能有____________(填序号)
 ①由于供体动物不同 ②由于培养基被污染 ③由于操作失误 ④没有设置对照

（2）为了对分离出的分解尿素的菌种作进一步的鉴定，在原配置的选择培养基中加入      ，使其变红色，原因是细菌体内合成的___________将尿素分解为氨和CO₂，pH增高。

（3）在筛选纤维素分解菌的过程中,经过梯度稀释后，要将样品均匀涂布在用于鉴别纤维素分解菌的培养基上，在该培养基中需要加入的特殊染料是        ，当形成菌落以后，可以根据菌落周围是否产生           来筛选纤维素分解菌。

（4）甲同学用稀释涂布平板法分离纯化细菌时，发现培养基上的菌落连成一片，最有可能的原因是          。

乙同学在实验时得到了如下图所示的结果,则纤维素分解菌位于         位置。

A.③     B.①②      C.②③            D.①②③