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            • 1． 生物技术的广泛应用给社会带来了较大的经济效益，受到了社会的广泛重视．请回答下列有关问题：
              （1）制作泡菜时需要测定亚硝酸盐的含量，其方法是    ．亚硝酸盐在特定的条件下会转变为    ，引起生物致癌．引起细胞癌变的原因是环境中的致癌因子使细胞中的    发生    ．
              （2）1993年，美国科学家因发明了PCR技术面获得了诺贝尔化学奖．PCR技术和生物体内DNA的复制都必须的条件包括    、模板DNA、能量、游离的脱氧核苷酸和引物；在生物体内DNA复制所必需的，而在PCR技术中不需要的成分是    ．
              （3）为获得一种能高效降解农药的细菌（目的菌），向培养基中加入某种化合物，将初步筛选得到的目的菌转到固体培养基中，常采用的接种方法是    ；实验结束后，使用过的培养基应该处理后再倒掉，这样做是为了    ．
              难度：中等
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            • 2． 火龙果营养丰富、功能独特，很少有病虫害，几乎不使用任何农药都可以正常生长．
              （1）火龙果果实中富含植物性蛋白，根据相对分子质量大小分离蛋白质的有效方法是    ，该方法中相对分子质量较大的蛋白质移动速度较    ．
              （2）火龙果果实含糖量高，还可以用来酿制果酒．请填全果酒生产工艺流程简图．选料→    →榨汁→发酵→果酒．水果中的糖类主要为发酵微生物提供的营养是    ．鉴定发酵成品是否含有酒精可用    来检验．
              （3）利用    技术大量快速繁殖火龙果，繁殖过程中培养基里需要加入    等无机营养、有机营养和植物激素．细胞分裂素和生长素的用量比值偏    时，有利于根的分化．
              难度：中等
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            • 3． 资料显示，近10年来，PCR技术（聚合酶链反应技术）成为分子生物实验的一种常规手段，其原理是利用DNA半保留复制的特性，在试管中进行DNA的人工复制（如下图），在很短的时间内，将DNA扩增几百万倍甚至几十亿倍，使分子生物实验所需的遗传物质不再受限于活的生物体．请据图回答：

              （1）加热至94℃的目的是使DNA样品的    键断裂，这一过程在生物体细胞内是通过    的作用来完成的．
              （2）通过生化分析得出新合成的DNA分子中，A=T、G=C这个事实说明DNA分子的合成遵循    ．
              （3）通过PCR技术使DNA分子大量复制时，若将一个用15N标记的DNA样品分子（第一代）放入试管中，以14N标记的脱氧核苷酸为原料，连续复制到第五代之后，则含15N标记的DNA分子链数占全部DNA总链数的比例为    ．
              （4）综合PCR技术与人体细胞内DNA合成过程可知，二者的必需条件中，除了模板、原料、ATP、酶以外，至少还有3个分别是    ．
              （5）PCR技术不仅为遗传病的诊断带来了便利，而且改进了检测细菌和病毒的方法．若要检测一个人是否感染了艾滋病毒，你认为可用PCR技术扩增他血液中的    ．
              A．白细胞DNA    B．病毒的蛋白质    C．血浆中的抗体    D．病毒的核酸．
              难度：中等
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            • 4． （2016•南昌校级二模）在工业上常利用微生物将木屑、废纸（主要成分为木质纤维）转化为生物乙醇．基本流程如图所示，请据图回答：
              （1）微生物筛选常用的接种方法是    和    ．筛选微生物X菌种的培养基中，应以    为唯一碳源，在培养基中加入    ，并根据水解圈的大小来筛选微生物X．
              （2）从微生物X中提取的纤维素酶液可通过    法进一步纯化，判断纯化的蛋白质是否达到要求，可用    法对样品进行纯度鉴定．若想使该酶液能反复利用，常采用    的方法进行固定．
              （3）微生物Y是    ．在生产生物乙醇的工艺中常对其进行固定化，采用的方法是    ．在酸性条件下，可用    来检测发酵产物中是否含有酒精．
              难度：中等
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            • 5． 蛋白质的分离与提纯技术是研究蛋白质的重要技术，DNA的提取和分离及PCR技术是研究DNA的重要技术．根据所学的知识回答下列问题．
              （1）样品处理，红细胞的洗涤要用    反复冲洗、离心．血红蛋白粗分离阶段，若要尽快达到理想的透析效果，可以采用的方法是    ．
              （2）分离蛋白质时，用凝胶色谱法将样品纯化的目的是    ．
              （3）DNA粗提取时，常用鸡血作为实验材料，原因是    ．实验前中，以通过    两种上法使鸡血细胞沉淀与试管底部，以便除去血清．实验中有两次使用蒸馏水，第一次使用的目的是    ．
              （4）PCR反应过程中的延伸是指    ，在PCR技术中所需要的引物实质上是一种    ．
              难度：中等
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            • 6． 利用PCR技术扩增目的基因，其原理与细胞内DNA复制类似（如图所示）．图中引物a、b为单链DNA样品片段，它是子链合成延伸的基础．请回答有关问题：

              （1）PCR扩增开始前，需要向离心管中加入的物质除了DNA样品，Taq酶 以及缓冲液之外，还需要加入    和    ．
              （2）A、B、C中属于退火的步骤是    ，A过程的目的是    ．
              （3）C步骤温度为72℃时发挥作用的酶是    ．
              （4）从理论上分析，PCR技术利用DNA分子的    复制的方式，一个样品DNA分子经n次循环共需消耗引物a的数量为    ．
              （5）设计引物是PCR技术关键步骤之一．某同学设计的两组引物（引物对B只标注了部分碱基序列）都不合理（如表），请分别说明理由．
              引物对AP1：AACTGAAATCTAGCTATC
              P2：GTCCGACTAGTGGCTGTG
              引物对BS1：3′-AACTG-CAGTT-5′
              S2：3′-CAGTT-GATTA-5′
              ①引物对A中P1和P2的    （碱基对）含量差异较大，导致退火温度不一致．
              ②引物对B S1局部碱基配对导致自身    而失效；S1和S2之间出现    而失效．
              （6）获取目的基因的途径除上述外，还有另外两个途径是    、    ．
              难度：中等
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            • 7． （2016•成都校级模拟）根据现代生物技术的相关知识，回答下列问题：
              （1）我们在用苹果泥作原料探究果胶酶催化反应的最适条件和最适用量时，通过    来确定最适值的思想方法是不变的．此类实验的观测指标可以是    （两点）
              （2）用葡萄制做的果酒酒味纯正，放置一段时间后，发现果酒带有明显的酸味，原因是    ．果酒发酵结束后，为方便后续使用，可将菌液转移到甘油中，与之充分混匀后，放在    ℃的冷冻箱中保存，此方法叫    ．
              （3）榨取果汁的过程中，发现榨取的果汁非常浑浊．解决的方法是用果胶酶处理，果胶酶包括    等成份．（三种）
              （4）已知某样品中存在甲、乙、丙、丁、戊五种蛋白质分子，其分子大小、所带电荷的性质和数量情况如图所示．
              ①将样品装入透析袋中透析12h．若分子乙保留在袋内．则分子    也保留在袋内．
              ②若用凝胶色谱柱分离样品中的蛋白质，则分子     移动速度最快．
              ③若将样品以2000r/min的速度离心10min．分子戊存在于沉淀中．则分子    可能不存在于沉淀中．
              （5）提取胡萝卜素常用有机溶剂萃取的方法，萃取的效率主要取决于，同时还受到原料颗粒的大小、紧密程度、含水量、萃取的溫度和时间等条件的影响．将提取的胡萝卜素粗品用    法进行鉴定，鉴定过程中需用    作为对照．
              难度：中等
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            • 8． 某实验小组以洋葱组织为实验材料，进行DNA粗提取和鉴定的实验，实验主要过程如下图，回答下列问题：

              （1）步骤一中需加入一定量的洗涤剂和    对洋葱组织进行处理，加入前者是为了瓦解细胞膜结构，加入后者的目的是    ．将搅拌和研磨后的物质进行过滤，即可得到含有DNA的滤液．
              （2）步骤二是DNA纯化过程中的关键步骤，可以采用以下几种不同的方法：
              ①滤液中NaCl浓度在0.14mol/L时可分离出DNA，若要再次提纯，需要将其溶解在    mol/L的NaCl溶液中；
              ②通常会向DNA粗提取物中加入嫩肉粉，其目的是    ；
              ③将得到的DNA粗提取物放在60～75℃水浴中保温10～15min，蛋白质被破坏，但仍能得到纯度较高的DNA，说明了DNA    ．
              （3）步骤三中向滤液中加入DNA体积分数为95%的酒精的目的是    ，依据的原理是    ．得到纯净的DNA后，可利用DNA与    在沸水浴条件下发生显色反应，来对其进行鉴定．
              难度：中等
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            • 9． 血红蛋白是人和其他脊椎动物红细胞的主要组成成分，负责血液中O2或CO2的运输．请根据血红蛋白的提取和分离流程图回答问题．

              （1）将实验流程补充完整：A为    ，B为    ．凝胶色谱法是根据    而达到蛋白质分离的有效方法．
              （2）洗涤红细胞的目的是去除    ，洗涤次数过少，无法除去    ；离心速度过高和时间过长会使    一同沉淀，达不到分离的效果．洗涤干净的标志是    ．释放血红蛋白的过程中起作用的是    ．
              （3）在洗脱过程中加入物质的量浓度为20mmol/L的磷酸缓冲液（pH为7.0）的目的是    ．如果红色区带    ，说明色谱柱制作成功．
              难度：中等
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            • 10． （2016•成都校级二模）根据现代生物技术的相关知识，回答下列问题：
              （1）我们在用苹果泥作原料探究果胶酶催化反应的最适条件和最适用量时，通过来确定最适值的思想方法是不变的．此类实验的观测指标可以是    ．用葡萄制做的果酒酒味纯正，放置一段时间后，发现果酒带有明显的酸味，原因是密封不严，醋酸菌进行有氧呼吸，将果酒转变成果醋．果酒发酵结束后，为方便后续使用，可将菌液转移到甘油中，与之充分混匀后，放在    ℃的冷冻箱中保存．
              （2）对分离的能分解尿素的细菌进行鉴定，在以尿素为唯一氮源的培养基中加入    ，培养后如果PH升高，指示剂将变红，因为细菌合成的    将尿素分解成氨，使培养基碱性增强．
              （3）已知某样品中存在甲、乙、丙、丁、戊五种蛋白质分子，其分子大小、所带电荷的性质和数量情况如图所示．
              ①将样品装入透析袋中透析12h，若分子乙保留在袋内，则分子    也保留在袋内．
              ②若用凝胶色谱柱分离样品中的蛋白质，则分子    移动速度最快．
              ③若将样品以2 000r/min的速度离心10min，分子戊存在于沉淀中，则分子    可能不存在于沉淀中．
              （4）提取胡萝卜素常用有机溶剂萃取的方法，萃取的效率主要取决于    ，同时还受到原料颗粒的大小、紧密程度、含水量、萃取的温度和时间等条件的影响．将提取的胡萝卜素粗品用    法进行鉴定，鉴定过程中需用    作为对照．
              难度：中等
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