某农场种植的H品种玉米自交后代中，发现了叶片颜色为黄绿色的变异植株。此变异植株因光合作用不足，在开花前死亡。让H品种玉米进行单株自交，其中某株玉米所结种子再种植，子一代中叶片黄绿色有l25株，叶片绿色有365株。有研究者对上述变异提出两种假设：

假设1：与叶绿素合成相关的酶的基因（M基因）发生了基因突变；

假设2：叶片黄绿色是由于“含M基因”的染色体片段丢失所致。

请分析回答：

（1）上述性状分离结果可用假设________解释。假设2所述的变异属于________变异。

（2）若假设1成立，则叶片黄绿色变异为________（填“显性”、“隐性”）突变。检测该变异是否由单基因突变引起________（填“能”、“不能”）用测交实验，理由是________。

（3）提取________植株的DNA，利用PCR技术进行特异性扩增，若能扩增出M基因片段，则证明假设2不成立。

某农场种植的H品种玉米自交后代中，发现了叶片颜色为黄绿色的变异植株。此变异植株因光合作用不足，在开花前死亡。让H品种玉米进行单株自交，其中某株玉米所结种子再种植，子一代中叶片黄绿色有125株，叶片绿色有365株。有研究者对上述变异提出两种假设：

假设1：与叶绿素合成相关的酶的基因（M基因）发生了基因突变；

假设2：叶片黄绿色是由于“含M基因”的染色体片段丢失所致。

请分析回答：

（1）上述性状分离结果可用假设________解释。假设2所述的变异属于________变异。

（2）若假设1成立，则叶片黄绿色变异为________（填“显性”、“隐性”）突变。检测该变异是否由单基因突变引起________（填“能”、“不能”）用测交实验，理由是________。

（3）提取________植株的DNA，利用PCR技术进行特异性扩增，若能扩增出M基因片段，则证明假设2不成立。

下图表示利用基因工程培育抗虫棉过程的示意图。请据图回答下列有关问题：

（1）科学家在进行图中［①］操作时，要用                                分别切割运载体和目的基因，运载体的黏性末端与目的基因DNA片段的黏性末端就可通过                              而结合。

（2）基因工程的理论基础是                                法则，可用公式（图解）表示为                          ______________________________________________。

（3）Ⅲ是导入目的基因的受体细胞，经培养、筛选获得一株有抗虫特性的转基因植株。经分析，该植株细胞中含有一个携带目的基因的DNA片段，因此可以把它看作是杂合子。理论上，在该转基因自交产生F₁代中，仍具有抗虫特性的植株占总数的                     。将上述抗虫棉植株的后代种子种植下去后，后代往往有很多植株不再具有抗虫特性，原因是                       。

嗜热土壤芽胞杆菌产生的β-葡萄糖苷酶（BglB）是一种耐热纤维素酶，为使其在工业生产中更好地应用，开展了以下试验：

Ⅰ．利用大肠杆菌表达BglB酶

（1）PCR扩增BglB基因时，选用        杆菌基因组DNA作模板。

（2）右图为质粒限制酶酶切图谱。BglB基因不含图中限制酶识别序列。为使PCR扩增的BglB基因重组进该质粒，扩增的BglB基因两端需分别引入          和          不同限制酶的识别序列。

（3）大肠杆菌不能降解纤维素，但转入上述建构好的表达载体后则获得了降解纤维素的能力，这是因为                                                              

Ⅱ．温度对BglB酶活性的影响

（4）据图1、2可知，80℃保温30分钟后，BglB酶会        ；为高效利用BglB酶降解纤维素，反应温度最好控制在         （单选）。

A．50℃    B．60℃     C．70℃     D．80℃

Ⅲ．利用分子育种技术提高BglB酶的热稳定性

在PCR扩增BglB基因的过程中，加入诱变剂可提高bglB基因的突变率。经过筛选，可获得能表达出热稳定性高的BglB酶的基因。

（5）与用诱变剂直接处理嗜热土壤芽胞杆菌相比，上述育种技术获得热稳定性高的BglB酶基因的效率更高，其原因是在PCR过程中              （多选）。

A．仅针对BglB基因进行诱变    B．BglB基因产生了定向突变

C．BglB基因可快速累积突变     D．BglB基因突变不会导致酶的氨基酸数目改变

野生猕猴桃是一种多年生的富含V.C的二倍体（2n=58）小野果。下图是某科研小组以大量的野生猕猴桃种子（aa）为实验材料培育抗虫猕猴桃无籽新品种的过程，据图回答：

（1）填育种原理：①            ③             ⑥             。

（2）③⑦过程用到的药剂是           ，原理是                          。

（3）若⑤过程是杂交，产生的AAA植株的体细胞含染色体数目是          ，该植株所结果实无籽的原因是减数分裂过程中                       。

（4）⑥过程中用到的工具酶是                 、                 。

（5）若④过程是自交，则产生的AAAA的概率是          。

  （1）在构建基因表达载体时，除了要在重组DNA中插入目的基因外，还需要有______________、_____________和_______________。

  （2）在番茄新品种的培育过程中，将目的基因导入受体细胞的方法叫做______________。

  （3）从图中可见，mRNA1和mRNA2的结合直接导致了____________________无法合成，最终使番茄获得了抗软化的性状。

  （4）普通番茄细胞导入目的基因后，先要接种到诱导培养基上培养，经___________过程后得到________________，然后再转接到分化培养基上，诱导出试管苗，然后进一步培养成正常植株。获得的转基因植物经有性生殖获得的后代，是否也具有转基因特性？___________。

  （5）利用基因工程进行育种，可以培育出具有新性状的植株，这种育种方式的优点是

①                            ；②                              。

某Ti质粒上有SalⅠ、HindⅢ、BamHⅠ三种限制酶切割位点，同时还含有抗四环素基因和抗氨苄青霉素基因。利用此Ti质粒获得转基因抗盐烟草的过程如图所示，请回答下列问题。

(1)将抗盐基因导入烟草细胞内，使烟草植株产生抗盐性状，这种新性状（变异）的来源属于________。

(2)在构建重组质粒时，为保证目的基因和运载体的定向连接，选用________和________两种限制酶切割。

(3)为筛选出导入了重组质粒的农杆菌，下图表示运用影印培养法(使一系列培养皿的相同位置上能出现相同菌落的一种接种培养方法)检测基因表达载体是否导入了农杆菌。

①图示培养基除了含有细菌生长繁殖必需的成分外，培养基A中还含有___________。

②从检测筛选的结果分析，选择菌落________(填数字)中的细菌导入植物细胞。

（4）为了确定抗盐烟草是否培育成功，需要进一步做检测,进行如下图所示的操作.

①使用                       作探针进行分子杂交;

②将薄膜曝光在显微胶片上,胶片显影结果上所对应培养皿中相应位置的细胞    (含/不含)目的基因.

(5)将转入抗盐基因的烟草细胞培育成完整的植株所需要技术的原理是             。

下图是利用工程菌(大肠杆菌)生产人生长激素（由人垂体细胞产生的一种蛋白质类激素）的实验流程。所用的pBR322质粒含有限制酶pstⅠ、EcoRⅠ和HindⅢ的切点各一个，且三种酶切割形成的黏性末端各不相同，而Amp^r表示青霉素抗性基因，Tet^r表示四环素抗性基因。请据图回答以下相关问题：

（1）过程①所用细胞是        ，过程②所用的原料和酶分别是                   。

（2）人生长激素基因在经③处理之前需经过PCR扩增，扩增前需要人工合成     种引物备用，扩增时应在PCR扩增仪中加入          用以催化互补链的合成。

（3）若人生长激素基因两端具有限制酶pstⅠ识别序列，切割人生长激素基因和pBR322质粒时只用限制酶pstⅠ的目的是确保产生            ，切割时断开的键是           。

（4）过程④所用的酶是            ；过程⑤应选择                    型的大肠杆菌作为受体细胞，为提高转化率，首先用    处理大肠杆菌使其成为感受态细胞。

（5）若用限制酶PstⅠ切割，完成过程④、⑤后，将三角瓶内的大肠杆菌先接种到甲培养基上，再将甲培养基上的单个大肠杆菌接种到丙培养基上，待形成12个菌落后，将相应菌落的一部分转接到乙培养基的相同位置上。一段时间后，菌落的生长状况如图乙、丙所示。将三角瓶内的大肠杆菌接种到甲培养基上的目的是筛选含           基因的大肠杆菌；接种到培养基乙上能存活的是导入含              质粒的大肠杆菌。生产人生长激素的工程菌应从丙培养基的菌落中选取，选取的依据是                        。

据图回答下列问题：

(1)过程①所需的酶_____________________。

(2)过程②后，在显微镜下观察融合的活细胞中有供体的________存在，这一特征可作为初步筛选杂种细胞的标志。

(3)原生质体培养液中需要加入适宜浓度的甘露醇以保持一定的渗透压，其作用是________。原生质体经过________再生，进而分裂和脱分化形成愈伤组织。

(4)若分析再生植株的染色体变异类型，应剪取再生植株和________植株的根尖，通过________、________、染色和制片等过程制成装片，然后在显微镜下观察比较染色体的形态和数目。

(5)采用特异性引物对花椰菜和黑芥基因组DNA进行PCR扩增，得到两亲本的差异性条带，可用于杂种植株的鉴定。下图是用该引物对双亲及再生植株1—4进行PCR扩增的结果。据图判断，再生植株1—4中一定是杂种植株的有__________________。

(6)对杂种植株进行________接种实验，可筛选出具有高抗性的杂种植株。

下图表示以某种农作物①和②两个品种为基础，培育出④⑤⑥⑦四个品种的育种过程请回答下列问题:

（1）过程Ⅰ叫做         ；④Ab可称作         植株,获得该植株常采用的方法是               。

（2）通过I、Ⅱ过程培育出⑤所采用的育种方法的原理是      ；用I、Ⅲ、V培育出⑤所采用的育种方法是        ，其优越性主要表现为                。

（3）在图Ⅳ育种过程中，用秋水仙素处理的对象是              ，其发挥作用的时期为            。

图Ⅵ培育⑦的育种原理为                   。

（4）某植株产生了一种新的抗病基因，若要获得该抗病基因，应用              酶处理切割DNA分子，此酶的作用部位是DNA分子的                  。将该抗病基因转移到农作物体内的四个操作步骤为：

提取目的基因、              、将目的基因导入受体细胞、目的基因的表达与检测。