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            • 1. 如图表示运用基因工程技术生产胰岛素的三条途径.据图结合所学知识回答下列问题.
              (1)为了便于将含有目的基因的细胞筛选出来,所选择的质粒上应该具有 ______ 基因.
              (2)培育转基因羊的过程中,科研人员通过感染或 ______ 技术将重组质粒M转移到受体细胞A中,受体细胞A应该是 ______ 细胞
              (3)下列关于过程③的叙述,错误的是 ______
              A.该过程需要用到胚胎体外培养和胚胎移植技术
              B.该过程中需要配置一系列含有不同成分的培养液
              C.该过程所需的培养基中须加入动物血清
              D.该过程可以完全在体外完成
              (4)受体细胞B应该是莴苣的 ______ (填“体细胞”“卵细胞”或“受精卵),导人该细胞后,需对该细胞进行培养,经 ______ 过程形成愈伤组织,以适当配比的 ______ 诱导愈伤组织,直到再生出新植株.
              (5)过程⑥常用的方法是用 ______ 来处理大肠杆菌,使其易于吸纳重组质粒M.
              (6) ______ 是消除污染杂菌的通用方法,也是用于筛选 ______ 的最简便方法之一.若以接种环为工具,则应用 ______ 法进行接种.接种前需要检测培养基是否被污染,检测方法是 ______ .接种后,须将培养皿摆放于恒温箱中培养.“细菌喜荤,霉菌喜素”,通常培养大肠杆菌的培养基要用 ______ 来配置,还要加入一定量的氯化钠,以维持一定的渗透压,还需调节培养基的 ______
            • 2. 嗜热土壤芽胞杆菌产生的β-葡萄糖苷酶(BglB)是一种耐热纤维素酶,为使其在工业生产中更好地应用,开展了以下试验:
              Ⅰ.利用大肠杆菌表达BglB酶
              (1)PCR扩增bglB基因时,选用 ______ 基因组DNA作模板.
              (2)图1为质粒限制酶酶切图谱.bglB基因不含图中限制酶识别序列.为使PCR扩增的bglB基因重组进该质粒,扩增的bglB基因两端需分别引入 ______ ______ 不同限制酶的识别序列.
              (3)大肠杆菌不能降解纤维素,但转入上述建构好的表达载体后则获得了降解纤维素的能力,这是因为 ______
              Ⅱ.温度对BglB酶活性的影响

              (4)据图2、3可知,80℃保温30分钟后,BglB酶会 ______ ;为高效利用BglB酶降解纤维素,反应温度最好控制在 ______ (单选).
              A.50℃B.60℃C.70℃D.80℃
              Ⅲ.利用分子育种技术提高BglB酶的热稳定性
              在PCR扩增bglB基因的过程中,加入诱变剂可提高bglB基因的突变率.经过筛选,可获得能表达出热稳定性高的BglB酶的基因.
              (5)与用诱变剂直接处理嗜热土壤芽胞杆菌相比,上述育种技术获得热稳定性高的BglB酶基因的效率更高,其原因是在PCR过程中 ______ (多选).
              A.仅针对bglB基因进行诱变     B.bglB基因产生了定向突变
              C.bglB基因可快速累积突变    D.bglB基因突变不会导致酶的氨基酸数目改变.
            • 3. 铁皮石斛是一种名贵中药材,有生津养胃、降血糖和增强免疫力等作用,有效成分为石斛多糖、石斛碱等,温州雁荡山素有“中国铁皮石斛之乡”的美誉.请回答:
              (1)用优良品种自然生长的茎快速繁殖铁皮石斛时,给茎消毒时无需使用的是 ______  (A.乙醇B.无菌水 C.甘露醇 D.次氯酸钠).在细胞分裂素相对较多和生长素相对较少的培养基中培养茎的切段,待长出较多的 ______ ,将其进行 ______ (处理)后再转入 ______ 培养基中继续培养,直至长成幼苗.这种通过组织培养技术快速繁殖植物的方法,也称为 ______
              (2)研究发现,铁皮石斛的生长发育与其体内的内生菌密切相关.为进一步研究内生菌作用,需要大量内生菌进行相关实验.分离内生菌时最好采用 ______  (A.G6玻璃砂漏斗过滤法 B.血细胞计数法 C.划线分离法 D.涂布分离法),再将纯化的内生菌转移到液体培养基中进行 ______
              (3)研究发现,200mg/L浓度的卡那毒素能有效抑制铁皮石斛细胞的增殖与分化.科学家欲利用卡那霉素,采用农杆菌转化法对现有铁皮石斛品种进行基因改良.在基因工程操作中,导入受体细胞的 ______ 分子应同时带有目的基因和 ______ 基因,这样才能利用含有卡那霉素的培养基将成功导入目的基因的受体细胞筛选出来.
              (4)鉴定铁皮石斛的品质,可通过苯酚-浓硫酸法测定石斛多糖的含量.其原理是:石斛多糖水解成单糖并脱水生成糖醛衍生物后,与苯酚缩合生产橙黄色化合物,在490mm处测定光密度值,以不同浓度的葡萄糖溶液为标准溶液建立标准曲线,便可知道样品的石斛多糖含量.这种方法类似于泡菜汁中 ______ 含量的测定,称之为 ______ 法.
              (5)为高效提取石斛多糖,可在提取液中加入 ______ ,以提高铁皮石斛的出汁率.
            • 4.

              (1)某实验小组进行固定化酵母细胞的制备,并开展游离酵母和固定化酵母发酵产酒酒精度的比较.请回答下列问题:

              产酒酒精度的比较

               

              1.制作凝胶珠的实验步骤:酵母细胞的活化→________→配制海藻酸钠溶液→________→固定化酵母细胞.

              2.影响实验成败的关键步骤是________.

              3.图中钙离子的作用是使胶体聚沉,海藻酸盐起________的作用.

              4.该小组将制备好的同定化酵母与游离酵母分别放在一定的条件下发酵,定时记录发酵液中酒精度的变化.

              ①实验过程中的“在一定的条件下发酵”的条件是________,要求条件相同是为了确保________.

              ②由表可知,固定化酵母和游离酵母发酵都能产生酒精,但固定化酵母在发酵前期的延迟期的时间比游离酵母发酵前期的延迟期的时间要________


              (2)2016年1月,世界首例转基因人类胚胎问世,但是这项研究受到了很大争议,有研究人员称,如果这项研究可以为人类试管婴儿的医学做出贡献,那么它就有可能使现在的禁令放宽,从而允许胚胎基因编辑和转基因婴儿的出生.回答下列问题:

              1.转基因技术的核心是________,需要使用的工具酶是________

              2.修饰后的基因能够在胚胎细胞内存在并准确表达的原因是________

              3.将胚胎植入子宫内培育的技术称为________,它在胚胎工程中的意义在于________.此过程的进行需要将胚胎培养至________阶段.

              4.很多人强烈反对此项技术的原因可能有①________;②________

            • 5.

              [生物——选修1:生物技术实践]

              A.胡萝卜素可以预防白内障、增强视力,还可以预防夜盲症,同时也是一种常用的食用色素。可以从微生物和胡萝卜中进行提取,过程如下。请回答下列问题:

              (1)若要得到纯化的酵母菌R,常采用的分离方法是________。配制培养基时,灭菌与调节pH的先后顺序是________。

              (2)胡萝卜含有的胡萝卜素中,最主要的组成成分是________,该胡萝卜素在人体内可以转变成两分子________。

              (3)从胡萝卜中提取胡萝卜素时,干燥过程应控制好温度和________以防止胡萝卜素分解;萃取过程中宜采用________(方式)加热以防止温度过高;现有乙醇和乙酸乙酯两种溶剂,应选用其中的________作为胡萝卜素的萃取剂,不选用另外一种的理由是________。

              B.精子可以作为外源基因的载体,使精子携带外源基因进入卵细胞受精。人们可以利用转基因奶牛获得人胰岛素,其流程如图。请回答以下相关问题:

              (1)用PCR技术扩增胰岛素基因时,用到的酶是________;在构建的基因表达载体中除目的基因、标记基因外还应当有________,才能使基因表达载体在受体细胞中进行复制和表达。

              (2)外源基因能够整合到精子的________上是提高转化率的关键,因为受精时只有精子的________才能进入卵细胞中。

              (3)过程③包括________技术和胚胎移植技术,在进行胚胎移植时,需要对母体进行________处理。

              (4)为了获得雌性奶牛,移植前需对已经导入目的基因的胚胎进行________,该操作取样部位为囊胚的________。

            • 6.

              (1)发酵食品是指人们利用有益微生物加工制造的一类食品,具有独特的风味,如腐乳、泡菜、食醋、葡萄酒等。请回答相关问题:

              1.参与腐乳制作的微生物主要是________。在卤汤中加入香辛料的作用是________和________。

              2.泡菜制作过程中,盐与水的质量比为________;在测定泡菜中亚硝酸盐的含量时,为使泡菜汁透明,可加入________乳液;在加入________条件下,亚硝酸盐与对氨基苯磺酸反应后,与N—1—萘基乙二胺盐酸盐结合形成________色染料,与标准液进行目测比较,就可估算泡菜中亚硝酸盐的含量。

              3.在葡萄酒发酵过程中,若葡萄汁中含有醋酸菌,醋酸菌不能将葡萄糖发酵为醋酸的原因是________。


              (2)用酵母菌生产人的乙型肝炎病毒(HBV)疫苗是第一个真核细胞基因工程的商业化产品。回答下列问题:

              1.DNA重组技术的基本工具至少有三种,通常用加工处理过的动植物病毒或者质粒作为________,DNA连接酶可将HBV的遗传物质与目的基因连接起来,由此可以知道HBV是________(填“DNA”或“RNA”)病毒。

              2.早期基因工程操作常用大肠杆菌作为受体细胞,首先用________处理细胞,使细胞处于________,从而容易吸收外界DNA分子。导入受体细胞后,目的基因的检测包括检测转基因生物染色体的DNA上是否插入目的基因、目的基因是否________和目的基因能否________。

              3.用转基因动物生产药物时,转基因动物进入泌乳期后,可以通过分泌的乳汁来生产药物,因而称作________。科学家将基因表达载体用显微注射的方法注入受精卵中,受精卵在体外发育成胚胎后通过________技术,将其移入受体子宫内发育成转基因动物。

            • 7.

              A.[生物——选修1:生物技术实践]

              请回答下列有关传统发酵技术在食品工业上应用的问题:

              (1)果酒的制作过程中,常用的菌种是________。果醋制作过程中持续通入氧气的原因是________。

              (2)检测酒精常用的试剂是重铬酸钾,其原理是在酸性条件下酒精能够使重铬酸钾呈________色。

              (3)腐乳的制作过程中发挥作用的酶主要是________。豆腐块要加盐腌制,因为加盐可以抑制微生物的生长,原因是________。

              腐乳制作完成后再封装时要将瓶口通过酒精灯的火焰,目的是________。

              B.[生物——选修3:现代生物科技专题]

              1998年我国培育出首只转基因羊,该转基因羊的乳汁中表达出人凝血因子IX蛋白,人凝血因子IX蛋白是治疗血友病的药物。请回答下列问题:

              (1)生产转基因羊的过程中,最核心的步骤是________,为了在羊的乳汁中表达出人凝血因子IX蛋白,应将人凝血因子IX蛋白基因和________连接在一起。和目的基因紧邻的另一端还应含有________。

              (2)重组DNA分子上标记基因的作用是________。要检测目的基因是否插入动物细胞的DNA上,常用的方法是________,原理是________。

              (3)可利用胚胎分割技术获得多只转基因羊,当对囊胚期的胚胎分割时应注意________,目的是________。

            • 8. 家蚕细胞具有高效表达外源基因能力.将人干扰素基因导入家蚕细胞并大规模培养,可以提取干扰素用于制药.
              (1)进行转基因操作前,需用 ______ 酶短时处理幼蚕组织,以便获得单个细胞.
              (2)为使干扰素基因在家蚕细胞中高效表达,需要把来自cDNA文库的干扰素基因片段正确插入表达载体的 ______ ______ 之间;若要检测干扰素基因在家蚕细胞中是否表达,可以采用的分子检测方法有 ______ ______
              (3)通过PCR技术可大量获取目的基因.PCR反应体系主要包括:扩增缓冲液(含Mg2+)、水,4种脱氧核糖苷酸、模板DNA、 ______ ______
              (4)培养家蚕细胞时,贴壁生长的细胞会产生接触抑制.通常将多孔的中空薄壁小玻璃珠放入反应器中,这样可以 ______ ,增加培养的细胞数量,也有利于空气交换.
              (5)“桑基鱼塘”生态系统能充分利用废弃物中的能量,形成“无废弃物农业”,这主要是遵循生态工程的 ______ 原理.同时,通过饲养家禽、家畜,栽培食用菌,提高农民经济收入,使保护环境和发展经济相互协调,这又体现了生态工程的 ______ 原理.
            • 9. 已知某传染性疾病的病原体为RNA病毒,该病毒表面的A蛋白为主要抗原,制备抗A蛋白抗体的部分流程如下图.

              请回答:
              (1)①代表的是 ______ 过程.为获得A基因表达载体,需用 ______ 酶对A基因和运载体进行切割.将A基因表达载体导入动物细胞常用的方法是 ______
              (2)利用PCR技术扩增A基因时,设计引物序列的主要依据是 ______ ,加入引物的作用是 ______
              (3)与体内DNA复制相比较,PCR反应要在一定的缓冲溶液中才能进行,并且要严格控制 ______ 等条件.
              (4)过程③采用的技术是 ______ ,获得的X叫 ______  细胞.
            • 10. 现代生物技术在花椰菜遗传育种工作中得到广泛应用.育种技术人员已经利用分子标记技术对花椰菜种质资源进行遗传多样性分析,并绘制了主要的花椰菜品种核酸指纹,为品种测试、新品种以及种质资源评价利用提供了重要依据.请根据相关信息回答下列问题:
              (1)目前已经建立了花椰菜稳定的遗传转化技术体系,比如将抗虫基因、豇豆胰蛋白抑制剂以及抗黑腐病等目的基因导入到受体中,获得具有较高抗性的新种质,为育种提供了良好的材料.将其目的基因导入花椰菜植株细胞的方法通常为 ______
              (2)为加快花椰菜育种纯化的速度,育种技术人员利用了花药和小孢子等细胞进行培养.从细胞到形成纯合子所用生物工程技术是 ______
              (3)花椰菜的花为两性花,某二倍体花椰菜品种的正常体细胞中染色体数目为18条,在研究其核酸指纹(也是单倍体基因组)时,需测定 ______ 条染色体.
              (4)育种工作者发现,利用白菜(2N=20)与花椰菜(2N=18)进行杂交,可得到白菜-花椰菜二倍体植株,但是却不可育,育种技术人员再用 ______ (化学试剂)处理白菜-花椰菜植株的 ______ 后,便可得到可育的新品种.接着育种技术人员又尝试将该新品种与白菜(2N=20)杂交,仍然可以得到种子,由该种子发育成的植株为 ______ 倍体(用具体数字表示),其染色体数目为 ______ 条.
              (5)以花椰菜为材料也可提取DNA,常用的方法为研磨法,却不能像鸡血那样,用蒸馏水使其破裂,其原因是 ______
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