下图表示利用基因工程培育抗虫棉过程的示意图。请据图回答下列有关问题：

（1）科学家在进行图中［①］操作时，要用                                分别切割运载体和目的基因，运载体的黏性末端与目的基因DNA片段的黏性末端就可通过                              而结合。

（2）基因工程的理论基础是                                法则，可用公式（图解）表示为                          ______________________________________________。

（3）Ⅲ是导入目的基因的受体细胞，经培养、筛选获得一株有抗虫特性的转基因植株。经分析，该植株细胞中含有一个携带目的基因的DNA片段，因此可以把它看作是杂合子。理论上，在该转基因自交产生F₁代中，仍具有抗虫特性的植株占总数的                     。将上述抗虫棉植株的后代种子种植下去后，后代往往有很多植株不再具有抗虫特性，原因是                       。

下列选项中能正确说明生物工程技术应用的是                          （   ）

嗜热土壤芽胞杆菌产生的β-葡萄糖苷酶（BglB）是一种耐热纤维素酶，为使其在工业生产中更好地应用，开展了以下试验：

Ⅰ．利用大肠杆菌表达BglB酶

（1）PCR扩增BglB基因时，选用        杆菌基因组DNA作模板。

（2）右图为质粒限制酶酶切图谱。BglB基因不含图中限制酶识别序列。为使PCR扩增的BglB基因重组进该质粒，扩增的BglB基因两端需分别引入          和          不同限制酶的识别序列。

（3）大肠杆菌不能降解纤维素，但转入上述建构好的表达载体后则获得了降解纤维素的能力，这是因为                                                              

Ⅱ．温度对BglB酶活性的影响

（4）据图1、2可知，80℃保温30分钟后，BglB酶会        ；为高效利用BglB酶降解纤维素，反应温度最好控制在         （单选）。

A．50℃    B．60℃     C．70℃     D．80℃

Ⅲ．利用分子育种技术提高BglB酶的热稳定性

在PCR扩增BglB基因的过程中，加入诱变剂可提高bglB基因的突变率。经过筛选，可获得能表达出热稳定性高的BglB酶的基因。

（5）与用诱变剂直接处理嗜热土壤芽胞杆菌相比，上述育种技术获得热稳定性高的BglB酶基因的效率更高，其原因是在PCR过程中              （多选）。

A．仅针对BglB基因进行诱变    B．BglB基因产生了定向突变

C．BglB基因可快速累积突变     D．BglB基因突变不会导致酶的氨基酸数目改变

野生猕猴桃是一种多年生的富含V.C的二倍体（2n=58）小野果。下图是某科研小组以大量的野生猕猴桃种子（aa）为实验材料培育抗虫猕猴桃无籽新品种的过程，据图回答：

（1）填育种原理：①            ③             ⑥             。

（2）③⑦过程用到的药剂是           ，原理是                          。

（3）若⑤过程是杂交，产生的AAA植株的体细胞含染色体数目是          ，该植株所结果实无籽的原因是减数分裂过程中                       。

（4）⑥过程中用到的工具酶是                 、                 。

（5）若④过程是自交，则产生的AAAA的概率是          。

  （1）在构建基因表达载体时，除了要在重组DNA中插入目的基因外，还需要有______________、_____________和_______________。

  （2）在番茄新品种的培育过程中，将目的基因导入受体细胞的方法叫做______________。

  （3）从图中可见，mRNA1和mRNA2的结合直接导致了____________________无法合成，最终使番茄获得了抗软化的性状。

  （4）普通番茄细胞导入目的基因后，先要接种到诱导培养基上培养，经___________过程后得到________________，然后再转接到分化培养基上，诱导出试管苗，然后进一步培养成正常植株。获得的转基因植物经有性生殖获得的后代，是否也具有转基因特性？___________。

  （5）利用基因工程进行育种，可以培育出具有新性状的植株，这种育种方式的优点是

①                            ；②                              。

下表是基因工程中有关基因操作的名词及对应的内容，正确的组合是