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            • 1． 阅读如下材料：
              材料甲：科学家将牛生长激素基因导入小鼠受精卵在，得到了体型巨大的“超级小鼠”；科学家采用农杆菌转化法培育出转基因烟草．
              材料乙：T4溶菌酶在温度较高时易失去活性，科学家对编码T4溶菌酶的基因进行改造，使其表达的T4溶菌酶的第3位的异亮氨酸变为半胱氨酸，在该半胱氨酸与第97为的半胱氨酸之间形成了一个二硫键，提高了T4溶菌酶的耐热性．
              材料丙：兔甲和兔乙是同一物种的两个雌性个体，科学家将兔甲受精卵发育成的胚胎移植到兔乙的体内，成功产出兔甲的后代，证实了同一物种的胚胎可在不同个体的体内发育．
              回答下列问题：
              （1）材料甲属于基因工程的范畴．将基因表达载体导入小鼠的受精卵中常用    法．构建基因表达载体常用的工具酶有    和    ．在培育转基因植物是，常用农杆菌转化法，农杆菌的作用是    ．
              （2）材料乙属于    工程范畴．该工程是指以分子生物学相关理论为基础，通过基因修饰或基因合成，对    进行改造，或制造制造一种    的技术．在该实例中，引起T4溶菌酶空间结构改变的原因是组成该酶肽链的    序列发生了改变．
              （3）材料丙属于胚胎工程的范畴．胚胎移植是指将获得的早期胚胎移植到同种的、    相同的另一个雌性动物体内，使之继续发育成新个体的技术．在资料丙的实例中，兔甲称为    体，兔乙称为    体．
              难度：中等
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            • 2． 阅读如下材料：
              材料甲：科学家将牛生长激素基因导入小鼠受精卵中，得到了体型巨大的“超级小鼠”；科学家采用农杆菌转化法培育出转基因烟草．
              材料乙：T4溶菌酶在温度较高时易失去活性，科学家对编码T4溶菌酶的基因进行改造，使其表达的T4溶菌酶的第3位的异亮氨酸变为半胱氨酸，在该半胱氨酸与第97位的半胱氨酸之间形成了一个二硫键，提高了T4溶菌酶的耐热性．
              回答下列问题：
              （1）材料甲属于基因工程的范畴．将基因表达载体导入小鼠的受精卵中常用法    ．构建基因表达载体常用的工具酶有    和    ．在培育转基因植物时常用农杆菌转化法，农杆菌的作用是    ．
              （2）材料乙属于    工程范畴．该工程是指以分子生物学相关理论为基础，通过基因修饰或基因合成，对    进行改造，或制造一种    的技术．在该实例中，引起T4溶菌酶空间结构改变的原因是组成该酶肽链的    序列发生了改变．
              难度：中等
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            • 3． 癌胚抗原（CEA）是一种位于肿痛细胞膜表面的蛋白，白细胞介素（IL-2）是一种淋巴因子．研究人员利用质粒plRES、CEA基因、IL-2基因，分别构建了重组质粒plRES-CEA、plRES-IL-2和plRES-CEA-IL-2．将实验小鼠分成6组，每隔5天进行一次肌肉注射，共3次．最后一次注射完成7天后，检测小鼠体内CEA含量、NK细胞活性等指标，结果如下表．
              第1组第2组第3组第4组第5组第6组
              注射物plRES-CEA-IL-2plRES-CEAplRES-IL-2plRES-IL-2与plRES-CEA混合空载体plRES空白
              CEA含量0.8890.6890.4550.8630.4130.088
              NK细
              胞活性              		0.3950.3890.3970.3970.387 0.091
              淋巴细
              脃数量              		3.041.771.152.181.070.97
              请回答问题：
              （1）构建重组质粒需要用到的工具酶有    ．要保证重组质粒能够在    中大量扩增，重组质粒必须具有    ．
              （2）注射plRES-CEA-IL-2后，小鼠体内产生的大量CEA是重组质粒中的目的基因经过    和
                  形成的．
              （3）NK细胞的活性不依赖于抗原刺激，能自发地溶解多种肿痛细胞和被病毒感染细胞，属于人体免疫的第    道防线．
              （4）从实验结果看，第    组具有最好的特异性免疫效果．对比第3组和第    组结果可以说明
              IL-2有促进    的作用．
              （5）第1，2，4组小鼠均可产生CEA抗体，各组之间无显著性差异，但与第3组、空载体及空白对照组相比有显著性差异，说明    ．
              难度：中等
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            • 4． 已知甲种农作物因受到乙种昆虫危害而减产，乙种昆虫食用某种原核生物分泌的丙种蛋白质后死亡．因此，可将丙种蛋白质基因转入到甲种农作物体内，使甲种农作物获得抗乙种昆虫危害的能力．
              回答下列问题：
              （1）为了获得丙种蛋白质的基因，在已知丙种蛋白质氨基酸序列的基础上，推测出丙种蛋白质的    序列，据此可利用    方法人工合成目的基因．获得丙中蛋白质的基因还可用    、    方法．
              （2）在利用上述丙中蛋白质基因和质粒载体构建重组质粒的过程中，常需使用    酶和    酶．
              （3）将目的基因导入植物细胞最常用的方法是    ，如果受体细胞为动物，则导入方法为    ，如果受体细胞是微生物，则用    处理细胞．
              （4）基因表达载体的组成，除了目的基因，还有启动子、    ，    ．检测甲种农作物体内是否含有丙种蛋白质的方法是    ．
              难度：中等
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            • 5． 电影中，“蜘蛛侠”能产生高强度的蜘蛛丝，现实中的基因工程也创造出了“蜘蛛羊”，该羊的乳汁中含有蛛丝蛋白，高强度的蛛丝蛋白可用于许多重要的特种工业领域．请回答：
              （1）为保证实验成功，产生蛛丝蛋白的基因最好从    （基因组/cDNA）文库中获取．若要获得大量的目的基因片段，可采用PCR技术进行扩增，扩增过程需使用     酶．
              （2）在构建含蛛丝蛋白基因表达载体时，需使用的工具酶有限制酶和DNA连接酶，目的基因应与    基因的启动子等调控组件组合在一起，启动子是    识别和结合的位点；构建完成的基因表达载体需通过显微注射技术导人羊的    ，获得重组细胞．
              （3）若所得到的“蜘蛛羊”乳汁中没有检测到蛛丝蛋白，应先采用    技术检测“蜘蛛羊”乳腺细胞中是否含有    ；若已确认此步成功，则应该继续检测是否    ．
              难度：中等
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            • 6． 某高校研发的幽门螺杆菌疫苗为基因工程疫苗，对该菌引发的胃炎、胃溃疡等疾病具有较好的预防效果，其有效成分是一种该菌表面抗原蛋白质，请回答下列问题．
              （1）根据表面抗原蛋白质的氨基酸序列推测出目的基因的    ，进行人工合成，然后通过    技术大量扩增．
              （2）基因工程的核心步骤是    ．其中标记基因的作用是    ．
              （3）目的基因进入受体细胞内，并且在受体细胞内维持稳定和表达的过程，称为    ．在表达过程中，启动子需与    识和结合，从而驱动转录过程．最终翻译是否成功，常用的检测方法是    ．
              （4）实验证明，一定时间内间隔口服该疫苗3次效果更好，其主要原因是体内产生的    细胞数量增多，导致获得的免疫预防作用更强，持续时间更久．
              难度：中等
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            • 7． （2016•栖霞市模拟）番茄中含有丰富的维生素，但不耐储存．我国科学家将控制番茄果实成熟的基因导入番茄，获得转基因延熟番茄．操作流程如图：
              （1）过程①需要的工具酶有    和    ．在筛选出含重组DNA的土壤农杆菌时通常依据质粒上的    的表达．
              （2）为促进图中②、③培养过程的顺利完成，通常需要在培养基中加入的调节物质是    和    ．
              （3）要快速繁殖转基因番茄植株，目前常用的生物技术是    ．该技术的关键步骤是    ．
              难度：中等
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            • 8． 多不饱和脂肪酸需要从膳食中摄取，而不能被人体直接合成．科学家通过转基因手段将ω-6脂肪酸脱氢酶基因（FAT1）整合到肉牛基因组．以期提高肉牛体内的多不饱和脂肪酸含量，促进人类健康．请回答下列问题．
              （1）将ω-6脂肪酸脱氢酶基因导入肉牛细胞中常用的方法是    ，在用PCR技术扩增目的基因时，需要的条件主要有扩增缓冲液、模板DNA、4种原料、特定引物和    ．
              （2）体外受精获得受精卵时，将优良公牛的精子收集后放在一定浓度的肝素溶液中进行培养，其目的是    ．
              （3）下列有关胚胎移植的叙述错误的是    
              A．应选择健康和具有正常繁殖能力的个体作为受体
              B．只有供、受体生现状态相同，移入受体的胚胎才能被接受
              C．胚胎收集中冲卵指的进从母体输卵管中冲取卵子
              D．受体牛对植入子宫的外来胚胎基本上不发生免疫排斥反应
              （4）胚胎移植前可选择发育良好、形态正常的    （填胚胎发育时期）进行    ，以实现同卵多胎．
              （5）该转基因牛还可以用核移植的方法繁殖，用核移植的方法得到的动物称为    ．
              用于核移植的供体细胞一般都选择10代以内的细胞，目的是保持细胞正常的    ．
              难度：中等
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            • 9． 科学家提取豆根瘤菌的固氮基因，移植到生活在小麦根旁的细菌中去，能使这些细菌具有固氮的本领，这种育种方法是从根本上改变了细菌的    ．根瘤菌与豆科植物共同生活在一起的现象在生物学上称为    ．
              难度：中等
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            • 10． 番茄和土豆都是茄科植物，培育出一种地上能结番茄地下能结马铃薯的新品种是很多育种学家的梦想．请完善下列各种获得番茄-马铃薯新品种的方案：
              （1）可以尝试用基因工程的方法获得所需品种．首先我们需要提取土豆细胞内的    ，通过反转录的方法构建一个    文库．从该基因文库中获得相关基因后，在这些基因的首端和尾端分别连上    和    后，插入到农杆菌Ti质粒上的    内部，通过农杆菌转化的方法导入番茄细胞．将这些番茄细胞组织培养成植株后进行检测筛选，就有可能筛选出所需植株．
              （2）也可以尝试用植物体细胞杂交的方式获得所需品种．首先用    去除番茄细胞和土豆细胞的细胞壁，得到番茄和土豆的原生质体，再通过    （至少填两种）等方法诱导两种原生质体融合，等融合的原生质体    后，再将杂种细胞培养成愈伤组织进而培养成植株，在杂种植株中就有可能筛选出所需品种．
              难度：中等
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