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            • 1. 精子载体法是以精子作为外源基因的载体,使精子携带外源基因进入卵细胞受精形成受精卵,在体外培养成胚胎后移入代孕母体,从而获得转基因动物.请回答下列问题.
              (1)将目的基因导入精子之前需要构建基因表达载体,基因表达载体包括目的基因、    .目的基因导入精子的方法常用    
              (2)外源基因能够整合到精子的    上是提高转化率的关键,因为受精时只有精子的    才能进入卵细胞中,受精之前需要对精子进行    处理.
              (3)胚胎移植时,受体应处于适合的生理状况,此时可利用激素对受体进行处理,一般采用的激素是    .此外,受体对移入子宫的外来胚胎    ,这为胚胎在受体内的存活提供了可能.
            • 2. 目前第二、三代病毒疫苗的研制是基于DNA重组技术而建立的.请分析回答下列问题:
              (1)第二代疫苗是以编码病毒抗原蛋白的RNA为模板,经    酶的作用获得目的基因,再利用    等工具酶构建基因表达载体.
              (2)要将重组质粒导入大肠杆菌,应先用    处理大肠杆菌,使大肠杆菌转变为    态;再将    在缓冲液中混合培养完成转化过程.
              (3)第三代疫苗即“DNA疫苗”是将编码某种抗原蛋白的DNA注射到动物体内,该DNA可在生物体内    出相应的抗原蛋白.
              (4)对于基因工程产品安全性的争论越来越激烈,目前转基因生物的安全性主要体现在食物安全方面、        三个方面.
            • 3. 目前,科学家可以应用生物技术进行一些疾病的治疗,如器官移植、单抗诊断、基因治疗等.请回答下列问题.
              I、人体器官移植面临的主要问题有供体器官短缺和免疫排斥.
              (1)为了解决器官短缺的问题,科学家将目光集中在某种小型猪身上,但实现这一目标的最大难题是免疫排斥.同时,科学家发现人体内有一种DAF 蛋白,可以抑制免疫系统对外来细胞的攻击,于是有人提出用基因工程的方法对猪的器官进行改造从而减少排斥.在改造中,目的基因是    ,受体细胞一般选用    ,导入方法常用的是    
              (2)免疫排斥主要是由    细胞引起的,该细胞是在    (器官)发育成熟的.临床上通常通过使用免疫抑制药物来抑制该细胞的增殖从而提高器官移植的成活率.
              (3)自体器官移植可以避免免疫排斥,目前有些自体器官可以通过对患者的胚胎干细胞进行体外诱导分化形成.胚胎干细胞来源于    或原始性腺,也可以通过    技术得到重组细胞后再进行相应处理获得.
              Ⅱ、人绒毛膜促性腺激素(HCG)是女性怀孕后胚盘滋养层细胞分泌的一种糖蛋白,制备抗HCG 单克隆抗体可用于早孕的诊断.下图是抗HCG 单克隆抗体制备流程示意图,请分析回答.

              (1)制备单克隆抗体过程中,给小鼠注射的HCG相当于    .它能使小鼠产生分泌相应抗体的淋巴细胞,此过程属于特异性免疫中的    免疫.
              (2)在细胞内DNA 合成一般有两条途径,主要途径是在细胞内由糖和氨基酸合成核苷酸,进而合成DNA,而氨基瞟岭可以阻断此途径.另一辅助途径是在次黄嘌呤和胸腺嘧啶核苷存在的情况下,经过酶的催化作用合成DNA,而骨髓瘤细胞的DNA 合成没有此辅助途径.利用DNA 合成途径不同的特点配制的HAT 培养基含有多种成分.若用a 表示骨髓瘤细胞,b表示效应B细胞,其中在培养基中添加的    成分筛选出    (a、aa、ab、bb、b)细胞进行培养,然后再筛选出    细胞进行大规模培养.
              (3)此过程生产的单克隆抗体可以与    特异性结合,从而诊断早孕.
            • 4. 小鼠的某种抗体由轻链和重链组成,科学家将编码轻链和重链的基因分别导入两个不同的烟草植物体内,然后让两株植物进行杂交就能获得可同时编码轻链和重链两种多肽的植株,即合成小鼠抗体的转基因植物.回答下列问题:
              (1)若要获取小鼠的编码轻链和重链的基因,可以先提取小鼠浆细胞中编码两条链的mRNA,然后通过     过程获取小鼠的cDNA,并利用    技术对目的基因进行扩增.
              (2)在构建基因表达载体时,需要用到的工具酶有    ,基因表达载体中的目的基因两端的序列分别是        
              (3)用农杆菌转化法将目的基因导入植物细胞的过程中,常常将目的基因插入到农杆菌Ti质粒的    
              上.检测目的基因是否导入受体细胞可用DNA分子杂交技术,一般用标记的    作探针.
              (4)若想大规模培育能合成小鼠抗体的转基因植物,可采用    技术.
            • 5. 某科研机构研发的幽门螺杆菌疫苗为基因工程疫苗,对该菌引发的胃炎、胃溃疡等疾病具有较好的预防效果,其有效成分是该菌的一种表面抗原蛋白质,请回答下列问题.
              (1)要获得编码该菌表面抗原的基因,可提取出该菌的mRNA,并将mRNA    .要大量获得表达特异抗原的基因,可采用    技术.
              (2)基因工程的核心步骤是构建    ,该结构除了抗原基因(目的基因)外,还必须有启动子、终止子以及    
              (3)目的基因进入受体细胞内,并且在变体细胞内稳定和表达的过程,称为    .在表达过程中,启动子需与    识别和结合,从而驱动转录过程.最终翻译是否成功,常用的检测方法是    
              (4)与传统疫苗相比,基因疫苗不仅能在宿主体内较长时间存在,还可以诱导产生    (填“体液免疫”“细胞免疫”或“体液免疫和细胞免疫”).基因疫苗是在基因治疗技术的基础上发展而来的.基因治疗是把    导入病人体内,使该基因表达产物发挥功能,从而达到治疗疾病的目的.
            • 6. 生物学家利用基因工程技术通过生物反应器生产人的血清蛋白.请根据相关知识回答下列问题:
              (1)在基因工程的操作中的“分子手术刀”是    
              (2)在基因工程的操作中的“分子缝合针”是    
              (3)基因工程中最常用的运载体是    
              (4)人的基因在牛体内能表达,说明人和牛    
            • 7. 请回答下列现代生物科技问题:
              (1)基因工程的工具之一限制酶主要是从    中分离纯化出来的.将目的基因导入受体细胞内,并且在受体细胞内维持稳定和表达的过程称为    ,从分子水平检测目的基因是否翻译成蛋白质的方法是    
              (2)将目的基因导人动物细胞培育转基因动物常用的受体细胞是    ,经早期胚胎培养和    ,使其发育成具有新性状个体.
              (3)胚胎干细胞是由早期胚胎或原始性腺中分离出来的一类细胞,在功能上具有    ,在    细胞上或在添加抑制因子的培养液中培养可以增殖而不发生分化.
              (4)转基因产品的安全性问题一直是争论的焦点,原因之一是由于科学发展水平的限制,目前科学家对基因的    、基因间的相互作用以及基因的调控机制等都了解的相当有限.
            • 8. Bt毒蛋白基因是从苏云金芽孢杆菌中分离出来的抗虫基因,因其表达产物Bt毒蛋白具有杀虫效果好、安全、高效等优点而成为应用最为广泛的基因.请回答下列有关转基因抗虫植物的问题:
              (1)要从苏云金芽孢杆菌中获取Bt毒蛋白基因,可根据Bt毒蛋白基因的部分已知序列,设计特异性    ,再利用    技术扩增出Bt毒蛋白基因.
              (2)构建重组质粒时,常用Ti质粒作为载体,是因为Ti质粒上具有    ,它能把目的基因整合到受体细胞(植株细胞)的    上.这种将基因表达载体导入受体细胞的方法是    法.
              (3)要确定抗虫基因导入棉花细胞后,是否赋予了棉花抗虫特性,在个体水平上还需要做    实验;若要检测具有抗虫基因的棉花是否产生了相应毒蛋白,在分子水平上可利用    方法进行检测.
              (4)目前,转基因植物的安全性问题是社会争论的热点.如有些人认为转基因植物的种植会威胁环境安全;但也有人认为转基因植物的种植减少了    的使用,有利于减轻污染.面对转基因技术的利弊,我们应持有的正确做法是    
            • 9. (1)在植物基因工程中,构建重组Ti质粒时,通常要用    分别切割    和Ti质粒,再用    进行连接.
              (2)动物细胞体外培养时,要保证被培养的细胞处于    的环境,在营养方面最终需在培养基中加入    等天然成分.细胞培养需在适宜的理化条件下进行,此外还需要一定的气体环境,其中C02的主要作用是    
            • 10. 临床上治疗大面积创伤时,可将经特殊处理的猪皮移植到患者的创面处,并在猪皮上开若干个小口植入患者的自体皮,待其生长并最终替换猪皮.研究表明,导入人P基因的转基因猪提供的“皮肤”可在移植后存活更长时间,能够保证自体皮充分生长.请回答问题:
              (1)如果将P基因通过    法直接导入猪受精卵中,一般情况下,猪不会表达P基因,原因是P基因在猪细胞中不能    ,因此需要构建基因表达载体.
              (2)操作成功的受精卵品要在无菌无毒的环境中培养,如何创造无菌无毒的环境    
              (3)通过    技术将早期胚胎移入代孕母猪的子宫内,可获得转基因猪.检测猪体细胞中P基因是否表达,在分子水平上采用的检测方法是    
              (4)若应用得到的早期胚胎,并从中分离出    ,用于医学硏究和治疗,则这种方法称为    
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