1．下图为果酒和果醋的制作流程，回答问题：

（1）从自然菌样中分离较理想的醋酸杆菌进行纯化培养，通常采用 　   方法分离，接种之前要对接种工具进行     ，避免接种工具上可能存在的微生物污染培养基。

（2）果酒的制作离不开酵母菌，在酵母菌的酒精发酵过程中，通常将温度控制在      。由果酒转变成果醋的制作时，需要改变的环境条件是  ▲    和温度控制住30～35℃。

（3）若在果汁中含有醋酸菌，在果酒发酵旺盛时，醋酸菌    (填“能”或“不能”)将果汁中的糖发酵为醋酸。

(4)在用果汁制果酒的过程中，发酵瓶溶液中pH的变化是          。

A．增大   B．不变    C．减小    D．先碱小后增大

2、下图为科学家利用转基因技术培育抗病番茄植株过程的示意图，请回答以下问题

（5）图中所选的Ti质粒中往往需含有      （A.抗虫  B.胰岛素  C.抗生素抗性  D.抗冻）基因，有利于重组质粒的筛选。A过程中常用的酶有                  。  

（6）E过程需要借助              技术，在含有营养物质、         等成分的培养基中，番茄细胞经过脱分化形成             ，该类单细胞具有细胞质丰富、        （A.液泡大、细胞核大    B.液泡小、细胞核大   C.液泡小、细胞核大   D.液泡小、细胞核小）等特征。

请回答下列现代生物技术中实验操作及目的等有关的问题：

（1）果酒制作过程中，需要先通气后密封，通气的目的是               ；密封的目的是                    。

（2）微生物接种方法很多，常用于统计菌落数目的接种方法是                   ；在

接种操作中，需要在酒精灯的火焰旁进行，其原因是                     。

（3）在植物组织培养过程中，需要对外植体进行         （填“消毒”、“灭菌”），常用体积分数为          的酒精和质量分数为0.1%的氯化汞。

（4）根据胡萝卜素具有易溶于有机溶剂的特点，可用      的方法获得胡萝卜素；提取的胡萝卜素粗产品可通过       方法进行鉴定和分离。

(1)过程④需用同种________酶对含Bt基因的DNA和Ti质粒进行酶切。为将过程②获得的含重组质粒的农杆菌筛选出来，应使用________培养基。

(2)过程③中将棉花细胞与农杆菌混合后共同培养，旨在让________进入棉花细胞；除尽农杆菌后，还须转接到含卡那霉素的培养基上继续培养，目的是________。

(3)若过程④仅获得大量的根，则应在培养基中增加________以获得芽；部分接种在无激素培养基上的芽也能长根，原因是________。

(4)检验转基因棉的抗虫性状，常用方法是________。种植转基因抗虫棉能减少________的使用，以减轻环境污染。

&;   我国为苹果生产大国，为解决鲜果积压、卖果难的问题，发展苹果深加工，利用苹果来酿果酒、果醋和加工成果汁等是解决这一问题的良好途径。请回答下列问题：

（1）苹果酒具有预防血管硬化等疾病、促进新陈代谢、抗衰老、美容养颜等保健作用，下图是为适合青少年和酒精耐受力的人群而设计的苹果酒的酿制流程：

       发酵菌种活化的过程需加入            并进行搅拌。活化后发酵前 应进行酵母菌的纯化培养，常用方法是             和           。所用培养基从功能上属于               。

（2）苹果醋具有护肤、减肥、营养、解酒和消除疲劳等功效，参与果醋发酵的菌种是           。在果酒发酵后期，如果提供           等环境，即可生产果醋。

    （3）苹果的全身都是宝。苹果的果皮可提取香精油，这种香精油具有天然的香味，是制酒、糕点等的天然保健食用油，一般采用       法。果肉除酿制果酒和果醋外，还可加工成罐头、果汁等。             酶可使果酒、果汁的澄清度高，颜色鲜亮，提高品质。

   （4）某果农发现一苹果树的结实率高、品质好，欲在较短时间内大量繁殖该品种，可采用             方法，该技术所用到的最关键激素是               。

(1)从生态系统的成分上看，大肠杆菌属于________；它的同化作用类型是________。

(2)下表是某公司研发的一种培养大肠杆菌菌群的培养基配方。

将上述物质溶解后，用蒸馏水定容到1000mL。根据用途划分该培养基属于________培养基。该培养基中的碳源是______             __。

(3)培养大肠杆菌时，常用的接种方法是平板划线法和______     __。

为防止杂菌污染需要对培养基和培养皿进行___         _____。

(4)现有 一升水样，用无菌吸管吸取1mL水样至9mL无菌水的试管中，依次稀释10³稀释度。各取0.1mL已稀释10³倍的水样分别接种到三个培养基上培养，记录的菌落数分别为55、56、57，则每升原水样中大肠杆菌数为_______  _。

(5)以下微生物发酵生产特定产物时，所利用主要微生物的细胞结构与大肠杆菌相同的是(多选)________。

A．制作果酒　　　　　　　 B．由果酒制作果醋

C．制作泡菜  D．制作腐乳

(6)利用培养基不仅可以分离培养微生物，也可以进行植物组织培养。与微生物培养明显不同的是，用于组织培养的培养基中还需要加入______         __。外植体常用________消毒。

（1）玉米秸秆预处理后，秸秆中的纤维素经C₁酶、C_X酶和          酶的协同作用下最终被 水解成葡萄糖；再经酵母菌发酵产生酒精。发酵过程中检测酵母菌的数量除可采用稀释涂布平板法

计数外，           法也是测定微生物数量的常用方法。

（2）在酸性条件下，发酵产生的酒精，与重铬酸钾反应呈现         色。在盐酸酸化条件下，泡菜腌制过程中产生的亚硝酸盐，与对氨基苯磺酸发生重氮反应后，与N—1—萘基乙二胺盐酸盐结合形成          色染料。在含           的培养基上培养大肠杆菌，菌落会呈现黑色。在以尿素为唯一氮源的培养基中加入               ，因培养尿素分解菌后而变为红色。纤维素等多糖物质可以与          染料形成红色复合物。

2 （16分）当植物细胞脱离了原来所在植物体的器官或组织而处于离体状态时，在一定的营养物质、激素和其它外界条件的作用下，就可能表现出全能性，发育成完整的植株。影响菊花组织培养和月季花药培养的成功率的因素有材料的选择与培养基的组成。

（1）材料的选择：菊花的组织培养一般选择        植株的茎上新萌发的侧枝。在月季的花粉发育过程中，只有某一个时期（       期）对离体刺激敏感，为了挑选到该时期的花药，通常选择         的花蕾。要确定其中的花粉是否处于适宜的发育期，可用的方法有         和焙花青—铬钒法，后者能将细胞核染成            色。

（2） 培养基的组成：常用的MS培养基主要成分包括：大量元素、微量元素、有机物（如甘氨酸、烟酸、肌醇、维生素以及            ）等。在配制好的MS培养基中，常常需要添加植物激素。植物激素的浓度、使用的先后顺序以及用量的比例等都会影响实验结果。如同时使用生长素和细胞分裂素，出现的实验结果是               ；生长素用量比细胞分裂素用量比值低时，出现的实验结果是                 。     

23.如图表示月季的花药离体培养过程，请回答：

（1）选择花药时，一般要通过_________来确定其中的花粉是否处于适宜的发育期，一般来说，在_________期，细胞核由中央移向细胞一侧的时期，通常选择_______________的花蕾，花药培养成功率最高。

（2）在花粉的培养基中要加入一定的植物激素，常用的植物激素有____________________。

（3）从植物产生的途径来说，花粉植株产生的途径除了图中所示外，还可以通过_______阶段发育而来。

（4）图中的B过程需要_____，因为愈伤组织形成幼小植物后，植物需要叶绿素进行光合作用。

（5）某同学在培养过程中发现培养基上感染了几种细菌。若在以尿素为唯一氮源的培养基中加入_____________指示剂培养几种细菌后，指示剂变红就可以判断其中含有能够分解尿素的细菌；若在以纤维素为唯一碳源的培养基中加入______________染料，培养几种细菌后，培养基中出现透明圈，就可以判断其中含有纤维素分解菌。

(2）由霉菌发酵生产果胶酶是食品工业中使用量最大的酶制剂之一，果胶酶是分解果胶的一类酶的总称，包括          、果胶分解酶、果胶酯酶等；在探究果胶酶的用量实验中，因变量是              。

(3)无菌技术是影响植物组织培养能否成功的重要因素。用       和质量分数为0．l%的氯化汞对外植体消毒，用        清洗，接种时每次使用器械后都需要        灭菌；接种3-4d后，观察外植体的生长情况，若发现外植体被污染，分析其原因可能是          。（至少答出两点）

(1)微生物培养基一般都含有：水和无机盐以及                   

(2)在微生物接种过程中，试管口需要通过酒精灯火焰，其目的是                    。

(3)某同学在稀释倍数为10⁶的培养基中测得平板上菌落数的平均值为225，那么每克样品中的菌落数是（涂布平板时所用稀释液的体积为0.1mL）               

(4)植物组织培养技术基本操作的正确顺序是                      。

①外植体消毒  ②制备MS培养基  ③接种  ④培养  ⑤栽培  ⑥移栽

    A．①→②→③→④→⑤→⑥   B．②→①→③→④→⑤→⑥

    C．②→①→③→④→⑥→⑤   D．①→②→③→④→⑥→⑤

(5)在植物组织培养过程中，往往需要使用植物激素启动细胞分裂，人为地控制细胞的                     和                    。

(6)通过电泳法分离提纯蛋白质时，影响蛋白质迁移速率的因素是蛋白质分子的带电性质、分子大小以及                    。

(7)用含有蛋白酶的洗衣粉洗涤丝绸衣物和羊毛衣物是否合适?为什么?                                                                                 

(1)当糖源充足或缺少糖源时，醋酸菌分別能将                  物质最终转变成醋酸。

(2)为了分离和计数土壤中分解尿素的细菌，配制如下培养基进行实验:

若在上述培养基中加入酚红指示剂，该培养基能对培养的细菌起到                 的作用。若取土样4g,应加入          ml的无菌水配制成稀释10倍的土壤溶液。因土壤中细菌密度很大，需要不断加以稀释，将10⁴-10⁷倍的稀释液分别吸取0.2mL加人到固体培养基上，在对应稀释倍数为10⁶的培养基中统计3个平板上的菌落数分別为:219、212、256，则每克该土壤样品中的菌株数为        (小数点后保留一位小数)。

(3)若为了获得更多青蒿素，需将青蒿离体的细胞或组织培养成愈伤组织。青蒿的细胞分裂、组织分化能力比菊花困难一些，需要借助外源激素才能更好的分裂和分化。若上述培养基用来进行青蒿细胞、组织的组织培养，还应加入的具体植物激素是                        。碳源可以用            代替。

(4) 胡萝卜素粗品用            法进行鉴定，鉴定过程中需用              作为对照。