现有甲、乙两个烟草品种(2n=48)，其基因型分别为aaBB和AAbb，这两对基因位于非同源染色体上，且在光照强度大于800勒克斯时，都不能生长，这是由于它们中的一对隐性纯合基因(aa或bb)作用的结果。取甲乙两品种的花粉分别培养成植株，将它们的叶肉细胞制成原生质体，并将两者相混,使之融合，诱导产生细胞团。然后，放到大于800勒克斯光照下培养，结果有的细胞团不能分化，有的能分化发育成植株。请回答下列问题：

(1)甲、乙两烟草品种花粉的基因型分别为_________和___________。

(2)将叶肉细胞制成原生质体时，常使用_________酶和_________酶去除细胞壁。在细胞融合技术中，常用的化学促融剂是__________________。

(3)在大于800勒克斯光照下培养，有______ 种细胞团不能分化(只考虑2个原生质体的相互融合)。能分化的细胞团发育成的植株，其染色体数是_______，基因型是_______。该植株自交后代中，在大于800勒克斯光照下，出现不能生长的植株的概率是________。

（1）基因工程实现了______改造生物性状；基因工程的核心步骤是___________；利用PCR技术扩增目的基因的过程中，目的基因受热形成单链，并与______结合，在________酶的作用下延伸形成DNA。

（2）植物细胞工程中，科学家采用体细胞杂交方法终于获得“番茄—马铃薯”超级杂种植株，该过程中可诱导原生质体融合的物理方法有________、_________和电激等，获得的杂种细胞还需经_____________技术培养成杂种植株，依据的原理是_______________；已知番茄、马铃薯分别为四倍体、二倍体，则“番茄-马铃薯”属于_____倍体。  

（3）治疗性克隆是指把患者体细胞核移植到去核卵母细胞中构建形成重组细胞，体外培养到一定时期分离出ES细胞，获得的ES细胞定向分化为所需的特定类型细胞（如神经细胞、肌肉细胞和血细胞），用于治疗。治疗性克隆采用的技术有体细胞________、早期胚胎培养技术和干细胞培养； ES细胞可从重组细胞培养到囊胚时期的___________中分离；ES细胞在功能上具有_____________性。

（4）生物技术安全性和伦理问题是社会关注的热点．下列叙述，错误的是(　) 

A．应严格选择转基因植物的目的基因，避免产生对人类有害的物质      

B．当今社会的普遍观点是禁止克隆人的实验，但不反对治疗性克隆    

C．反对设计试管婴儿的原因之一是有人滥用此技术选择性设计婴儿    

D．生物武器是用微生物、毒素、干扰素及重组致病菌等来形成杀伤力  

（5）习近平在纳扎尔巴耶夫大学回答学生问题时指出：“我们既要绿水青山，也要金山银山。宁要绿水青山，不要金山银山，而且绿水青山就是金山银山。”请说出这段话包含哪些生态工程原理：_________________________________。（至少写出两个）

研究人员用四倍体马铃薯（4n=48）和抗青枯病的野生型二倍体马铃薯（2n=24）进行体细胞杂交，培育抗青枯病的马铃薯。

（1）研究人员用四倍体马铃薯的叶片探究原生质体制备条件，结果如下表所示。

①据表分析，制备原生质体的最佳组合是第_____组，叶片解离程度主要取决于________的浓度。

②制备的原生质体应置于浓度__________________马铃薯叶片细胞液浓度的溶液中进行培养，以保持原生质体的正常形态。

（2）为了便于在显微镜下对杂种细胞进行镜检筛选，将用四倍体马铃薯叶片制备的原生质体与用野生型马铃薯的__________（填"叶片"或"幼根"）为材料制备的原生质体进行融合。把两种原生质体置于加入__________的溶液中促融。

（3）为进一步从染色体水平上检测杂种植株，科学家选取杂种植株根尖进行__________后用碱性染料染色并制片，显微镜下对__________期的细胞进行染色体计数。

（4）为达到育种目标，还需要对杂种植株进行          抗性检测以筛选得到抗性马铃薯。

如图所示为植株繁殖的四种人工方式示意图，请据图回答：

​

(1)图中单倍体植株通常的获取方式是________________。若图中单倍体细胞含2个染色体组，A有4个染色体组，则③过程所用化学试剂的作用是_________。

(2)图中B和C过程的不同点是______________________________________，

这种不同主要的决定因素是________________________________________。

(3)若想在C过程中获得突变体，进而培育成新品种植株，应用物理诱变或化学诱变的方法处理____________。

(4)若要获得水稻的人工种子，则应选用图中的________结构，该结构与正常受精卵形成的________有类似的结构和发育过程。

(5)若D为胡萝卜—羊角芹，②过程经融合处理后，已经融合的细胞类型有________种(若融合的细胞只考虑两两融合)。

（1）从A和B细胞到C细胞的过程中，必须用____________处理。

（3）若A细胞为骨髓瘤细胞，B细胞为B淋巴细胞，那么D细胞称为_____________细胞，由D细胞连续分裂产生大量细胞的过程，称为_____________。这种细胞既能无限繁殖，又能产生_____________。

（4）若A为人细胞，B为鼠细胞，并分别用红、绿荧光染料标记细胞膜上的蛋白质，在C细胞时，细胞一半发红色荧光，一半发绿色荧光。到D细胞阶段，两种颜色的荧光均匀分布，原因是                                                                 。

（生物—选修3 现代生物科技专题）

紫杉醇是从红豆杉属植物树皮中提取分离出来的一种代谢产物，具有显著的抗癌效果。下面是几种生物合成紫杉醇的方法，请据图回答相关问题：

（1）若利用微型繁殖技术大量生产红豆杉幼苗，则该技术利用的原理是___________。在植物组织培养的培养基中除无机营养成分、有机营养成分、琼脂外，还需要添加__________。红豆杉的形成层在生长发育过程中并不能合成紫杉醇的根本原因是_________________。

（2）科学家尝试利用PCR技术从太平洋红豆杉中获取相关基因片段，并在大肠杆菌中完成转化过程。PCR技术利用的原理是___________。将该目的基因导入受体菌时，常利用Ca²⁺处理细胞，使其成为___________，从而完成转化过程。若重组大肠杆菌产生的中间代谢产物扩散到水体或土壤后，可引发_________安全问题。

（3）为了培养能产生紫杉醇的红豆杉-柴胡植株，科研人员将红豆杉的愈伤组织和柴胡的愈伤组织用纤维素酶和果胶酶处理后，获得有活力的____________，再用诱导剂____________使其融合，最后选择能够高效合成紫杉醇的杂交细胞进行培养。

花椰菜易受黑腐病菌的危害而患黑腐病，野生黑芥具有黑腐病的抗性基因。用一定剂量的紫外线处理黑芥原生质体可使其染色体片段化，并丧失再生能力。再利用此原生质体作为部分遗传物质的供体与完整的花椰菜原生质体融合，以获得抗黑腐病杂种植株。流程如下图．

据图回答下列问题：

（1）过程①所需的酶是________，过程②依据的原理是________．

（2）若分析再生植株的染色体变异类型，应剪取再生植株和双亲植株的根尖，通过________、漂洗、染色和制片等过程制成装片，然后在显微镜下观察比较________．

（3）过程②后，在显微镜下观察融合的活细胞中有供体的________存在，这一特征可作为初步筛选杂种细胞的标志．

（4）原生质体培养液中需要加入适宜浓度的甘露醇以保持一定的渗透压，其作用是________。原生质体经过细胞壁再生，进而分裂和脱分化形成愈伤组织．

（5）采用特异性引物对花椰菜和黑芥基因组DNA进行PCR扩增，得到两亲本的差异性条带，可用于杂种植株的鉴定。下图是用该引物对双亲及再生植株1—4进行PCR扩增的结果．据图判断，再生植株l—4中一定不是杂种植株的有________．

（6）对杂种植株进行________接种实验，可筛选出具有高抗性的杂种植株．

甲、乙是染色体数目相同的两种二倍体药用植物，甲含有效成分A，乙含有效成分B。某研究小组拟培育同时含有A和B的新型药用植物。请回答下列问题：

(1)为了培养该新型药用植物，可取甲和乙的叶片，先用纤维素酶、果胶酶去除细胞壁，获得具有活力的______________，再用化学诱导剂诱导二者融合。形成的融合细胞进一步培养形成愈伤组织，然后经过_____________形成完整的杂种植株。这种培养技术称为______________________。

(2)上述杂种植株属于多倍体，多倍体是指______________________________________。假设甲和乙有性杂交的后代是不育的，而上述杂种植株是可育的，造成这种差异的原因是________________________________________________________。

(3)这种杂种植株可通过制作人工种子的方法来大量繁殖。经植物组织培养得到的______

_________________等材料用人工薄膜包装后可得到人工种子。

回答下列有关问题：

(1)在动物细胞培养过程中，当贴壁细胞分裂生长到细胞表面相互接触时，细胞会停止分裂增殖，这种现象称为细胞的__________。要使贴壁的细胞从瓶壁上分离下来，需要用酶处理，常用的酶是__________。

(2)随着细胞传代次数的增多，绝大部分细胞分裂停止，进而出现衰老甚至死亡的现象；但极少数细胞可以连续增殖，其中有些细胞会因遗传物质发生改变而变成_______细胞，这种细胞的黏着性__________，细胞膜表面蛋白质(糖蛋白)的量__________。

(3)用某种大分子染料对细胞进行染色时，观察到死细胞被染色，而活细胞不染色，原因是_______________________________________。

(4)检查某种有毒物质是否能改变细胞染色体的数目，最好选用分裂到________期的细胞用显微镜进行观察。

(5)给患者移植经细胞培养形成的皮肤后，发生了排斥现象，这是因为机体把移植的皮肤当作________进行攻击。

(6)已知番茄、马铃薯分别为四倍体、二倍体，则融合后的“番茄－马铃薯”属于__________倍体植株，该技术称为              。

DHA对脑神经发育至关重要。以A、B两种单细胞真核藻为亲本，利用细胞融合技术选育高产DHA融合藻。两种藻特性如下表。据表回答：

（1）选育的融合藻应具有A藻                          与B藻            的优点。

（2）诱导融合前需用相关酶处理两种藻，其目的是获得                  。

（3）以获得的融合藻为材料进行甲、乙、丙三组试验，结果如下图。

与甲、丙两组相比，乙组融合藻生长速率较快，原因是在该培养条件下                       。甲、乙两组DHA产量均较高，但实际生产中往往采用甲组的培养条件，其原因是                                                        。