“生物导弹”可用于杀死人类某些癌细胞。制备“生物导弹”是单克隆抗体的重要应用之一，其过程如下图所示：

（1）在①-⑤批量生产A蛋白抗原的过程中，要快速获得大量的Ａ基因可采用       技术，在该技术中，解旋的方法是       ；过程③所用的方法是          ；④过程一般选择发育良好的                   ，移植到受体牛的子宫中。

（2）在⑥-⑨批量生产生物导弹的过程中，⑦过程所用的“脾脏中的细胞”为          。

⑦过程区别于植物体细胞杂交技术所特有的诱导因素是           ，要得到所需的杂交瘤细胞要经过   次筛选，最终筛选出的杂交瘤细胞的特点是                  。

[生物——选修3：现代生物科技专题]

马铃薯是种植广泛的农作物，病毒侵染后导致产量大幅下降，培育脱毒的马铃薯品种是提高产量的有效方法。请分析并回答。

（1）马铃薯茎尖病毒极少甚至无病毒，因此可将马铃薯茎尖接种在培养基中，经过人工培养获得脱毒苗。培养基中添加________（填激素名称），诱导离体细胞经过________和再分化完成组织培养过程，从而形成脱毒苗。为监控脱毒苗的质量，可采用________的方法检测病毒的蛋白质。

（2）为了获得脱毒的番茄马铃薯，研究人员研究了离体的茎尖大小对幼苗的成苗率和脱毒率的影响，实验结果如图。

实验结果表明，茎尖越小，________，________，因此马铃薯脱毒培养中离体茎尖的适宜大小为________mm。

（3）取番茄、马铃薯的0.27mm茎尖处的组织细胞进行去壁处理得到________，然后再利用________技术和植物组织培养技术最终可以得到脱毒的番茄马铃薯植株。

如图为细胞融合的简略过程，请据图回答：

( 1)若A、B是植物细胞，在细胞融合之前已用___________________处理，除去_____________；A、B到细胞C的过程中，常用的物理方法是__________________________。融合完成的标志是_______________.

(2)若A、B是植物细胞，则形成的D细胞还应用______________技术把D培养成植株。

(3)若A、B是动物细胞，一般用___________________（酶）使其分散开来，A、B到C的过程中，常用的不同于植物细胞的手段是____________________，所形成的D称为____________________。

(4)若该过程是制备单克隆抗体，A为小鼠B淋巴细胞，那么，在获得此细胞之前，小鼠已被注射了___________，注射后小鼠身体产生了相应的____________生成了___________。图中B为_________________。

(5)若该过程仍是制备单克隆抗体，在A、B到C的过程中，所形成的C有______种，（只考虑细胞两两融合）用来培养的D的细胞应该是_____________，它有什么特点？________________________________________________________________，获得D后，常用的培养方法是______________和________________。

下图所示为用两栖动物的卵所做的实验图解，据图回答下列问题：

  （1）蝌蚪肠上皮细胞核中含有青蛙发育所需的                          ，重新组合的细胞相当于蛙的                 细胞，经过细胞分裂和             形成组织和器官。本实验结果说明                       具有全能性。

  （2）图中A过程采用的技术手段称作              技术。如果用生物技术使番茄和马铃薯的体细胞融合，首先要获得             ，其方法是                ，然后诱导             。要将其融合形成的细胞培养成植株，要用          技术。从理论上讲用融合后的细胞培育出的“番茄—马铃薯”植株是          （可育、不可育）。

科研人员利用野生型二倍体马铃薯（2n=24）和抗青枯病的二倍体茄子（2n=24）进行体细胞杂交，培育抗青枯病马铃薯。

（1）自然界中马铃薯和茄子间存在___________，难以通过有性生殖产生后代。

（2）科研人员从PCR鉴定为阳性的杂种植株中选出杂种植株B，用流式细胞仪进一步测定二倍体马铃薯、二倍体茄子和杂种植株B的DNA相对含量结果如下图。

依据上述结果预测，马铃薯—茄子四倍体融合细胞的DNA相对含量约为___________。据图中结果推测，杂种植株B应为___________倍体，判断依据是______________________。

（3）取杂种植株B的根尖制成临时装片，进一步从染色体水平进行鉴定。在显微镜下找到有丝分裂_________期的细胞，观察并统计来自茄子和马铃薯的染色体数目，若________  _          __，则支持上述推测。

（4）为确定杂种植株是否符合育种要求，还需对其进行___________检测。

⑴图中①过程用到的酶是______，所形成的B叫做 ______。

⑵②过程常用______处理农杆菌，使之成为______细胞，利于完成转化过程．

⑶图中③过程需要用到的激素是______。

⑷在分子水平上，可采用______的方法来检测转基因草莓果实提取液中有无相应的抗原．

B、野生马铃薯品种的植株具有较强的抗病、抗虫、抗盐碱、抗寒能力，但块茎不能食用．俄、德、芬兰专家共同做实验研究，用野生马铃薯与马铃薯的体细胞进行杂交，培育出了生活能力强的杂交系马铃薯．

⑴专家在实验中，需用到的酶主要有______和______等。

⑵专家在实验中，用于诱导融合使用的化学试剂是______。

⑶对于农民，种植杂交系马铃薯除可获得较高的收成外，还有什么优点？(要求写出两点) ______。

[生物——选修3：现代生物科技专题]

   白菜、甘蓝均为二倍体，体细胞染色体数目分别为20、18。“白菜—甘蓝”是用细胞工程的方法培育出来的蔬菜新品种，它具有生长期短、耐热性强和易于储藏等优点。下图是“白菜—甘蓝”的杂交过程示意图，回答以下问题：

（1）为了得到原生质体需先用________和________来处理白菜细胞和甘蓝细胞；

（2）诱导原生质体融合的方法有多种，常用的物理方法是________，融合完成的标志是________。由杂种细胞得到白菜—甘蓝还需要经过组织培养技术，其中需要避光培养的步骤是________。

（3）上图通过植物体细胞杂交技术获得的“白菜—甘蓝”体细胞染色体数为_____；通常情况下，白菜和甘蓝有性杂交是不能成功的，原因是________，若对白菜和甘蓝采用杂交育种方法能成功的话，得到的后代应含________条染色体。

（4）植物体细胞杂交技术和传统杂交技术相比的优点是________。

【选修3】《现代生物科技专题》

（1）构建基因工程表达载体时，用不同类型的限制酶切割产生的DNA片段末端通常有两种形式——________和____________。若要在限制酶切割目的基因和质粒后使其直接进行连接，则应选择________(相同或不同)限制酶进行切割。

（2）利用大肠杆菌生产人胰岛素时，构建的表达载体含有人胰岛素基因及其启动子等，其中启动子的作用是：它是                       的位点，有了它才能驱动基因转录出mRNA，最终获得所需要的蛋白质。在用表达载体转化大肠杆菌时，常用________处理大肠杆菌，以利于表达载体进入；为了检测胰岛素基因是否转录出了mRNA，可用标记的         基因片段作探针与mRNA杂交，该杂交技术称为________。为了检测胰岛素基因转录的mRNA是否翻译成人胰岛素，常用______________技术。

（3）如果要将某目的基因通过农杆菌转化法导入植物细胞，先要将目的基因插入农杆菌Ti质粒的________中，然后用该农杆菌感染植物细胞，通过DNA重组将目的基因插入植物细胞的________上。

Ⅱ．请根据材料回答下列问题。

单克隆抗体在医疗、诊断等方面发挥着越来越重要的作用。英国科学家米尔斯坦和柯勒设计了一个用被免疫的B淋巴细胞制备单克隆抗体的实验，图示其实验流程，请回答。

（1）a是               ，b是                ①过程是                      ，②表示在              上进行培养。③过程包括了体外培养和                    。

（2）制备单克隆抗体时，选择B淋巴细胞的原因是                             。

（3）如何判断经过②后的细胞就是杂交细胞                                   。   

（4）诱导动、植物细胞融合常用的一种化学诱导剂是                    ，植物体细胞杂交之前还需用                          去除细胞壁，植物体细胞杂交技术在一定程度上解决了杂交育种的                               问题。

基因工程和植物细胞工程技术在科研和生产实践中有广泛应用，请据图回答：

(1)①②过程采用最多的是农杆菌转化法，原因是农杆菌中Ti质粒上的________可转移到受体细胞并整合到受体细胞的_______上；检测目的基因是否导入受体细胞可用DNA分子杂交技术，要用__________作探针。

(2)图中③④过程须在无菌条件下进行，培养基中除加入营养物质外，还需添加________等物质，作用是____________________。

(3)若要获取转基因植物人工种子，需培养到________阶段，再进行人工种皮的包裹；如用植物细胞实现目的基因所表达的蛋白质类药物的工厂化生产，培养到_______阶段即可。

(4)若采用植物体细胞杂交技术获得新的植物体，细胞间杂交一般采用________作为诱导剂诱导细胞融合，与传统的有性杂交相比，其优是______。

花椰菜易受黑腐病菌的危害而患黑腐病，野生黑芥具有黑腐病的抗性基因。用一定剂量的紫外线处理黑芥原生质体可使其染色体片段化，并丧失再生能力。再利用此原生质体作为部分遗传物质的供体与完整的花椰菜原生质体融合，以获得抗黑腐病杂种植株。流程如下图。

（1）过程①所需的酶是                       。

（2）过程②后，在显微镜下观察融合的活细胞中有供体的             存在，这一特征可作为初步筛选杂种细胞的标志。

（3）原生质体培养液中需要加入适宜浓度的甘露醇以保持一定的渗透压，其作用是              。原生质体经过             再生，进而分裂和脱分化形成愈伤组织。

（4）采用特异性引物对花椰菜和黑芥基因组DNA进行PCR扩增，得到两亲本的差异性条带，可用于杂种植株的鉴定。下图是用该引物对双亲及再生植株1—4进行PCR扩增的结果。据图判断，再生植株1—4中一定是杂种植株的有                    。

（5）对杂种植株进行                 接种实验，可筛选出具有高抗性的杂种植株。