(1)ES细胞能分化出成体动物的所有组织和器官，这体现了ES细胞的_____________。为获得适合人体移植的猪器官，减弱或消除排斥反应，可对ES细胞进行___________。

(2)—个ES细胞变成ES细胞群的过程中，细胞_________(填“可能”、“不可能”)出现接触抑制现象。下列关于动物细胞培养和核移植的叙述，正确的是__________。

A.从原代培养物或细胞系中选择和纯化无法获得细胞株

B.动物细胞培养基中添加胰岛素的目的是调节血糖浓度

C.胚胎干细胞培养时，加滋养层是为了抑制胚胎干细胞分化

D.核移植形成的重组细胞在初次分裂时核基因不转录

(3)为获得含兔褐毛基因的转基因小鼠，可将褐毛基因通过_________法导入ES细胞核中，再将该核移植到去核的卵细胞中，经过_____________、胚胎培养、胚胎移植，最终由代孕母鼠产下克隆小鼠。

(4)为获得大量的上述克隆小鼠，可用转基因的小鼠胚胎成纤维细胞进行体细胞克隆。因为含有褐毛基因的胚胎成纤维细胞可进行__________培养，理论上可获得无限个转基因小鼠。

（1）打靶载体中含有的目的基因是     ，需将该目的基因和与细胞内靶基因同源的DNA片段都重组到质粒上，整合时用到的酶有      。

（2）图中的同源重组位点是指打靶载体和小鼠基因组DNA中具有     的DNA片段。

（3）将打靶载体线性化是选择的限制性核酸内切酶的识别序列不能位于    等中。线性化的打靶载体可采用    法导入小鼠细胞。将小鼠细胞培养在含     的培养液中，可以成功筛选出打靶成功的小鼠细胞，经细胞培养后可以获得大量的具有目的基因的细胞。

（4）可以通过动物细胞克隆技术获得含人胰岛素基因的小鼠，其过程是将打靶成功的小鼠细胞的细胞核移植到     中，培养到     期移植到代孕母鼠子宫内进行发育。

［生物——选修3：现代生物科技专题］

2017年11月27日世界上首个体细胞克隆猴“中中”诞生，12月5日第二个克隆猴“华华”诞生，该成果标志中国率先开启了以体细胞克隆猴作为实验动物模型的新时代，实现了我国在非人灵长类研究领域由国际“并跑”到“领跑”的转变。据此回答问题。

（1）“中中”和“华华”的诞生，体现出动物细胞的________具有全能性，克隆技术在繁殖类型上属________；非人灵长类克隆技术实践日益成熟对人类治疗性克隆具有重要意义，但我国政府一再重申________、________、________、不接受任何生殖性克隆人的实验。

（2）相对于植物克隆而言，动物尤其是高等动物的克隆比较困难，原因是________，继而在克隆过程中需要使用________，原因是________。

（3）在干细胞研究领域中，科学家裴端卿的团队用人的尿液在小鼠体内培育出了人再生牙齿，目前他们已经能够将尿液中提取的多能干细胞与滋养细胞共同培养，或在培养液中加入________，如________等物质可进一步使之变成血液细胞、骨细胞、皮肤细胞、肝细胞以及神经细胞等多种组织细胞。

1997年英国学者韦尔穆特，用成年绵羊的乳腺细胞的细胞核移植到去核卵母细胞中，最终得到了克隆羊多利。请回答下列有关问题：

(1)动物细胞在体外培养时，需要给细胞提供必要的营养条件，由于人们对动物细胞所需营养物质还没有完全搞清楚，所以在使用合成培养基时要加入________等天然成分，出于动物细胞在体外培养时，具有________现象，为了让细胞继续增殖，一定时间后需用________酶处理，然后进行传代培养。

(2)目前人类还不能直接利用体细胞来培育出新的动物，所谓的克隆动物，实际是通过________来实现的，要使供体细胞核与卵母细胞融合要通过________，并利用电脉冲、乙醇和蛋白酶合成抑制剂等来________受体细胞，使其完成细胞分裂和发育进程。

(3)在体外培育的胚胎细胞要移植到受体母羊子宫内，外来胚胎能在受体内存活的生理基础是受体对移入子宫的外来胚胎基本上不发生________反应，并且外来胚胎与受体子宫可建立正常的________联系，在孕育过程中其遗传特性不受任何影响。

自然条件下，哺乳动物不发生孤雌生殖。2014年3月，云南农大科研团队把猪卵母细胞进行人为的孤雌激活处理，使其发育成胚胎，移植到代孕母猪体内，获得世界上第一批成活的孤雌生殖克隆猪。这种克隆猪不同于核移植获得的克隆猪，现将两种技术进行比较。

（1）图中过程①②③④是获得孤雌克隆猪的技术流程，那么获得核移植克隆猪的技术流程是过程_____（填序号）。

（2）孤雌生殖克隆猪仍然是二倍体生物，但由于缺少__________方亲本基因，导致其生长发育中出现多种问题，但给研究者提供了很好的材料。

（3）孤雌激活处理其实质是要激活卵母细胞________，使其发育成早期胚胎，得到克隆猪。

（4）体细胞核移植技术中也会用到卵母细胞，需要选择____________时期的卵母细胞。

（5）可以从良种不同的克隆猪中提取mRNA进行研究，也可通过________方法得到多种cDNA，并通过______________技术扩增产物。

2016年 4月6日，世界上首个拥有“三位亲生父母”的健康男婴在墨西哥诞生。其培育过程采用如下技术路线。

据图回答下列问题：

（1）由于女性的自然周期产生的卵子太少，捐献者在取卵前通常需要注射____________激素，促使一次有更多的卵泡发育。受捐者也要注射相关激素，目的是____________________。

（2）重组细胞需培养到MⅡ中期的原因是该时期的卵母细胞才具备________________，重组细胞体外培养所需的气体主要是O₂和CO₂，CO₂的主要作用是______________。

（3）从受精卵到三亲婴儿的培育需要_________________和__________________等技术。

（4）三亲婴儿的培育技术________（填“能”或“不能”）避免母亲的线粒体遗传病基因传递给后代，而___________（填“能”或“不能”）避免母亲的红绿色盲基因传递给后代。三亲婴儿的染色体_____________（填比例）来自母亲提供的细胞核。

（5）设计试管婴儿技术与为解决不孕夫妇的生育问题而出现的试管婴儿技术主要区别是植入前对胚胎进行___________________。

我国首例绿色荧光蛋白转基因克隆猪在东北农业大学的种猪场自然分娩产出，这标志着我国在转基因克隆猪技术领域已达到世界领先水平。下图为我国首例绿色荧光蛋白转基因克隆猪的培育过程示意图，请据图回答：

（1）过程①必需用到的酶是                                       

（2）重组质粒除了带有绿色荧光蛋白基因以外，还必须含有启动子、终止子和______________       才能构成一个完整的基因表达载体

（3）为了获得更多的猪卵母细胞，可通过对母猪注射促性腺激素的方法，做_________处理，并将所采集到的卵母细胞在体外培养到                        期即可通过显微操作将其细胞核去除。

（4）我国首例绿色荧光蛋白转基因克隆猪的培育过程运用了哪些现代生物技术_        _________________________________________________________

我国全面二孩政策已于2016年1月1日起正式实施．十二年前，产妇朱女士利用试管婴儿技术，成功生下一个男孩．2016年3月，朱女士决定生育第二个孩子，医院找到当年为她冷冻的“胚胎”过捡胎等程序，朱女士已成功怀孕12周．冷冻12年后复苏、植入，该“冻龄”宝宝将有望成为国内最“老”的宝宝．请回答以下相关问题：

（1）由于女性的自然周期产生的卵子太少，在取卵前通常需要注射促性腺激素，而不通过服用雌激素来首接促进更多的卵泡发育，原因是过量的雌激素会通过       ，从而影响卵巢的发育．在体外受精前，医生借助超声波探测仪等工具用吸卵针从朱女士卵巢中吸取卵母细胞；随后将取出的卵母细胞置于与     中相似的环境，让它进一步发育成熟．受精过程中，精子顶体内含有的顶体酶能协助精子穿过卵子的      ，最终进人卵内完成受精作用．

（2）若做试管婴儿的夫妇中，妻子患有线粒体疾病（线粒体DNA缺陷），丈夫正常，则子女患病情况为    ．那么这对夫妇要想获得健康的孩子，可通过特殊的设计试管婴儿技术即“三亲婴儿”（医生要去除女性捐赠者卵子中的细胞核，接着用母亲卵细胞中对应的遗传基因取而代之，最后再按照标准的试管婴儿技术进行培育）．“三亲婴儿”的获得过程，除运用胚胎工程的技术手段外，还要特别运用           技术．

（3）该生育过程属于   繁殖，整个生育过程应用的生物技术有                  ．

2015年2月3日，英国议会下院投票通过一项历史性法案，允许以医学手段培育“三亲婴儿”。“三亲婴儿”的培育过程可选用如下技术路线。请回答下列问题：

（1）过程①采用的是细胞工程中的__________技术。图中“三亲婴儿”的染色体来自________和父亲提供的细胞核。

（2）进行过程②时，所用的父亲精子是经过__________处理的。过程②中防止多精入卵的屏障有________和卵细胞膜反应。判断卵子是否受精的重要标志是_______________。

（3）过程③采用的是胚胎工程中的___________技术，该过程所用培养液的成分除一些无机盐和有机盐类外，还需添加维生素、激素、氨基酸、核苷酸等营养成分以及____________等物质。

（4）若捐献者携带红绿色盲基因，则该基因___________（“能”或“不能”)遗传给“三亲婴儿”。

科学家通过转基因技术获得了含有人生长激素基因的奶牛，如果要加速转基因奶牛的繁育，可以对此转基因奶牛进行克隆(如下图所示)。请结合图示回答下列问题：

(1)在进行细胞培养时，要对取自转基因奶牛的组织细胞进行分离，形成单个细胞，这个过程中需要利用________酶处理。

(2)形成重组细胞时应选用________期的卵母细胞，并去掉其细胞核的原因是__________________________________________________________________。

(3)如果重组细胞为贴附性细胞，则在进行原代培养时，还会表现出________等特点。

(4)图中犊牛并非是对体细胞核供体母牛100%的复制，其原因主要有______________、_____________________。

(5)上图中所示的生物技术整体被称为________，其包括的具体生物技术有________、________等。转基因奶牛的克隆成功，说明了动物____________________具有全能性。