（1）从牛的组织获得单个细胞，通常需要用______________酶处理。

（2）将人血清蛋白基因导入牛的受精卵常用的方法是___________________。

（3）未受精的卵应培养到______期，将细胞核和去核卵细胞组装的技术称为___________，在该过程中要用____________使两细胞融合，构建重组胚胎。

（4）在胚胎发育过程中，____________将发育成转基因牛的各种组织，如果要求转基因牛大批量生产人血清蛋白，则要求获取组织的牛性别是_______。

人组织纤溶酶原激活物(htPA)是一种重要的药用蛋白，可在转htPA基因母羊的羊乳中获得。流程如下：

（1）htPA基因与载体构建重组表达载体需要用到的工具酶有__________。基因表达载体中除了要有目的基因以外，还要有启动子，它是_________识别和结合点部位；除上述外还需有_____________________。检测目的基因是否已插入受体细胞DNA，可采用____________技术。

（2）为获取更多的卵(母)细胞，要对供体母羊注射促性腺激素使其超数排卵，采集的卵子必须发育到________(时期)；采集的精子需要经过________处理，才具备受精能力。

（3）将重组表达载体导入受精卵常用的方法是__________。生产上常用________期的胚胎进行移植；为了获得母羊，移植前需对已成功转入目的基因的胚胎进行___________。利用______________技术可获得多个转基因个体，这体现了早期胚胎细胞的全能性。

（4）若在转htPA基因母羊的羊乳中检测到__________，说明目的基因成功表达。

​（5）如果利用上述方法培育出的蕃茄不具抗软化性状，经分子杂交技术检测，发现细胞内有抗PG存在，但检测不到mRNA2分子，可能原因是目的基因（抗PG）上游缺少___________。

转基因抗病香蕉的培育过程如下图所示。图中PstⅠ、SmaⅠ、EcoRⅠ、ApaⅠ等为限制酶，质粒和抗病基因上的箭头表示限制酶的切割位点。下表示四种限制酶的识别序列及酶切位点，据图回答下列问题。

（1）若要获得抗病基因，可用_____________限制酶切，不能用限制酶SmaⅠ对图中对应的位点进行切割，因为若在SmaⅠ位点进行切割会_________________。切割质粒与获取目的基因用的是___________（相同、不同）的限制酶。切割好的质粒与目的基因需要在_______________酶的作用下形成含抗病基因的重组DNA分子。

（2）卡那霉素会抑制香蕉愈伤组织细胞的生长。欲利用含卡那霉素的培养基筛选已导入抗病基因的香蕉细胞，重组质粒中应同时含有__________________基因作为标记基因。

（3）图中将重组DNA分子导入香蕉受体细胞用到的方法是_____________法。

（4）为了进一步确定目的基因是否翻译成蛋白质，可用的检测方法是________。

（5）图中导入抗病基因的香蕉组织块一般需要通过________________________的方法，可培育成能表现新性状的植株。图中①到②表示______过程，②到③表示______过程。

应用生物工程技术获得人们需要的生物新品种或新产品。请据图回答下列问题。

(1)要使人的生长激素基因在牛的垂体细胞中特异性表达,完整的基因表达载体要包括目的基因、_________、__________________、标记基因等部分.在③之前要检测早期胚胎细胞是否已经导入人生长激素基因,宜采用_________________技术.③过程培养到桑椹胚或囊胚阶段,可以采用______           _____技术,培育出多头相同的转基因牛犊。

(2)prG能激发细胞不断分裂,通过基因工程导入该调控基因来制备单克隆抗体,Ⅰ最可能是___________细胞,Ⅱ代表的细胞具有____              ________的特点.

(3)在抗虫棉培育过程中，④过程中的受体细胞如果采用愈伤组织细胞，则与采用叶肉细胞相比较，其优点是_______________________________，⑤过程采用的技术是___________________________。科学家预言，此种“转基因抗虫棉”独立种植若干代以后，将出现不抗虫的植株，此现象来源于_______________。

内皮素（ET）是一种含21个氨基酸的多肽，它有强烈的血管收缩和促进平滑肌细胞增殖等作用．研究发现内皮素功能异常与高血压、糖尿病、癌症等有着密切联系．内皮素主要通过与靶细胞膜上的内皮素受体结合而发挥生物学效应．ET_A是内皮素的主要受体，科研人员试图通过构建表达载体，实现ET_A基因在细胞中高效表达，为后期ET_A的体外研究以及拮抗剂的筛选、活性评价等奠定基础．其过程如下（图中SNAP基因是一种荧光蛋白基因，限制酶ApaⅠ的识别序列为C^↓CCGGG，限制酶XhoⅠ的识别序列为C^↓TCGAG）．请分析回答：

（1）完成过程①需要的酶是　　；与过程②相比，过程①特有的碱基配对方式是　　．

（2）过程③中，限制酶XhoⅠ切割DNA，使　　键断开，形成目的基因的黏性末端是　　．用两种限制酶切割，获得不同的黏性末端，其主要目的是　　．

（3）过程⑥中，要用　　预先处理大肠杆菌，使其处于容易吸收外界DNA的感受态．

（4）利用SNAP基因与ET_A基因结合构成融合基因，目的是　　．

（5）人皮肤黑色素细胞上有内皮素的特异受体，内皮素与黑色素细胞膜上的受体结合后，会刺激黑色素细胞的分化、增殖并激活酪氨酸酶的活性，从而使黑色素急剧增加．美容时可以利用注射ET_A达到美白祛斑效果，这是因为ET_A能与内皮素结合，减少了内皮素与　　的结合，抑制了内皮素对黑色素细胞的增殖和黑色素的形成．

请回答下列与生物技术实践相关的问题。

（1）自古酒就与人类生活息息相关。在图所示两发酵瓶中装入等量的葡萄汁，其中装置__________更适用于果酒制作，果酒制作中发酵旺盛期_________产量很大，需进行定期排气。果酒发酵是否成功可用_____对发酵产物酒精进行检验确认。

（2）在生产过程中，发现葡萄酒变酸，表面观察到菌膜，造成此现象的生物是      ；腐乳外部有一层致密的“皮”，这是     的匍匐菌丝形成的；制作泡菜时，有时坛内会长一层白膜，这是      繁殖形成的。

（3）培养基配制和灭菌时，灭菌与调节pH的先后顺序是     ；一般对配制的培养基采用          法灭菌。

（4）微生物培养后期进行菌落统计时，除了________计数法，还可用________法培养细菌进行间接活菌计数。

（5）提取洋葱DNA时,要在切碎的洋葱中加入一定的      ，并进行充分地搅拌和研磨,待过滤后再收集研磨液。

（6）对于植物有效成分的提取，适用于玫瑰油、薄荷油等化学性质稳定、难溶于水、挥发性强的芳香油的提取方法为______，在提取过程中，加入_____可吸收精油中残留的水分。

下图表示生物实验中通过研磨提取有关物质的操作过程，请回答下列问题。

（1）若图示为“DNA的粗提取与鉴定”的实验操作：

①图中实验材料A可以是下面的            。（填字母）

a．花菜       b．香蕉    c．猪肝    d．猪血

②若选用植物组织，研磨前加入的B一般为洗涤剂和           ，加入洗涤剂的作用是           。

③实验中，将含有一定杂质的DNA丝状物分别放入2mL下表所示的3种溶液中，经搅拌后过滤，获得相应的3种滤液，含DNA最少的是滤液       。

（2）若图示为“检测生物组织中的还原糖”的实验操作：在检测滤液C中是否含有还原糖时，向C中加入的是            色的斐林试剂，欲得到实验结果，还需要进行的步骤是           。

（3）若图示为“叶绿体色素的提取和分离”的实验操作：

①研磨前加入的B应包括无水乙醇、                   ，将研磨液进行过滤时，需要在漏斗基部放上              。

②分离色素时用培养皿盖住小烧杯的目的是                      。