(1) 如上图所示,菌株A和B混合培养几小时后,把大肠杆菌洗涤后涂布在基本培养基的固体平板上,发现长出了若干野生型菌落,对此实验现象可作出如下假设:

① 不同大肠杆菌间遗传物质发生重组。

② ____________。 

(2) 为了探究上述假设①,有人设计了一种U型管(如图),中间用过滤器隔开,大肠杆菌不能通过,但培养液和营养物质可通过,实验如下。请补充相关实验内容:

实验步骤:

① 在U型管中加入________; 

② U型管两端各加入菌株A、菌株B,培养几小时;

③ 将U型管两端的大肠杆菌各自取出洗涤后涂布在____上,观察有无菌落。 

实验结果:________。 

实验结论:菌株A与菌株B之间遗传物质发生重组。

(3) 现有1 L水样,用无菌吸管吸取1 mL转至盛有9 mL无菌水的试管中,依次稀释至10³倍。各取0.1 mL已稀释10³倍的水样分别接种到三个培养基上培养,记录的菌落数分别为31、34、37,则每升原水样中大肠杆菌数为____。该数据理论上比细菌实际数目____。 

(4) 该实验中需要灭菌的是_____________。(至少写3个) 

如表是某微生物固体培养基的配方。请回答下列问题：

    （1）根据培养基的成分分析，所培养微生物的同化作用类型是____________，表中的“？”应该是________________________。

    （2）如图所示在用稀释涂布平板法进行接种时，不能得到的是图____________。统计饮用水中大肠杆菌数目时，____________（填“需要”或“不需要”）设置对照，原因是___________________。

    （3）若要分离分解尿素的细菌需将培养基中的____________换成____________；若要鉴定分解尿素的细菌还需在培养基中添加____________指示剂。

下图表示微生物培养与利用的相关实验技术，请回答下列问题：

（1）在培养基的制备过程中，A表示      ，B表示灭菌，常用的方法是      。

（2）D是微生物接种最常用的方法之一，它包括         和         两步操作。

（3）在筛选土壤中分解尿素的细菌时，所用培养基以尿素作为       ；在统计菌落数目时，一般选择菌落数在       的平板进行计数。若要对分离的菌种作进一步的鉴定，可在选择培养基中加入       指示剂，若指示剂变       ，则可初步鉴定该种细菌能够合成       ，分解尿素。

下表是一种细菌培养基配方，请回答下列问题：

（1）该培养基的葡萄糖为微生物的生长繁殖主要提供               。

（2）该培养基属于              培养基（多选）。

A．液体     B．固体      C．鉴定      D．选择         E．天然

（3）如果要对培养基的菌落进行纯化，在培养基上划线操作中，操作的第一步及每次划线之前都要灼烧接种环，目的是对接种环进行            。

（4）制备培养基的操作步骤是                 。（用下列字母排序）

a．倒平板     b．计算    c．溶化   d．称量    e．灭菌

A．a→b→c→d→e                          B．e→b→d→c→a      

C．b→d→c→a→e                       D．b→d→c→e→a

（5）某同学用稀释涂布平板法测定一个土壤样品中的细菌数（取10克该土壤加90ml无菌水制成稀释液）。在对应稀释倍数为10^​6的培养基中统计3个平板上的菌落数分别为：121、212、256，则每克该土壤样品中的菌落数为            。

注：“-”表示不产气；“+”表示产气，“+”越多产气越多。 
分析回答：

（1）酵母细胞中能产生CO₂的场所是             。（2分）步骤①恒温培养箱的温度控制在 20℃左右，其主要目的是              。（2分）

（2）步骤②中，发酵液应使用       进行梯度稀释。稀释涂布平板法依据的原理是在稀释度足够高的菌液里，将聚集在一起的菌种分散成       ，从而能在培养基表面形成单个菌落。“一个菌落”在生态学中属于一个          。

（3）步骤③平板划线时，每次划线前后都要用     法对接种环进行灭菌。在做第二次以及其后的划线操作时，总是从上一次划线的末端开始划线，原因是      。（2分）

（4）根据实验结果推知，            （品种）是较理想的酿酒菌种。

(1)柚皮易焦糊，宜采用________法提取柚皮精油，新鲜的柚皮干燥去水并用________浸泡处理，该过程得到的糊状液体可通过________除去其中的固体杂质。

(2)培养基中的尿素可为乳酸菌A生长提供________。电泳法纯化乳酸菌素时，若分离带电荷相同的蛋白质，则其分子量越大，电泳速度________。

(3)抑菌实验时，在长满致病菌的平板上，会出现以抑菌物质为中心的透明圈。可通过测定透明圈的来比较柚皮精油和乳酸菌素的抑菌效果。

(4)柚皮油也可用萃取法来提取，原因是________。分析上图，提高萃取效果的方法是________、________。

某化工厂的污水池中含有一种有害的、难以降解的有机化合物A，研究人员用化合物A、磷酸盐、镁盐以及微量元素配制的培养基成功筛选到能高效降解化合物A的细菌。实验的主要步骤如下图所示，请分析回答：

(1)培养基中加入化合物A的目的是筛选________，这种培养基属于________培养基。不论何种培养基，在配制是要进行调整________，在接种前要用_______       

对其灭菌。倒平板时，一般需冷却至________左右，在________附近操作

(2)“目的菌”生长所需的氮源和碳源是来自培养基中的________。实验需要振荡培养，由此推测“目的菌”的代谢类型是________。

(3)培养若干天后，应选择培养瓶中化合物A含量__________的培养基，接入新的培养液中连续培养，使“目的菌”的数量________。

(4)转为固体培养时，常采用________或__________的方法接种，获得单菌落后继续筛选。

(5)实验结束时，使用过的培养基应该进行__________处理后，才能倒掉。

科学家采用“影印培养法”研究微生物的抗药性突变是自发产生的还是在环境因素的作用下产生的。具体操作步骤如下：

①首先将大量对链霉素敏感的大肠杆菌涂布在不含链霉素的培养基平板1上，待其长出密集的小菌落后，用影印法接种到不含链霉素的培养基平板2上，随即再影印到含有链霉素的培养基平板3上。经培养后，在平板3上出现了个别抗链霉素的菌落。

②对培养皿2和3进行比较，在平板2上找到与平板3上相对应的抗性菌落，挑取其中一个菌落接种至不含链霉素的培养液4中，经培养后，再涂布在平板5上。

③重复以上各步骤，最后在试管12中获得了较纯的抗性菌落。

根据以上材料回答下列问题：

（1）若要获得抗链霉素的大肠杆菌，实验设计思路是：____________________。

（2）大肠杆菌抗链霉素基因存在于________上，该结构在基因工程中是最常用的载体。

（3）3号、7号、11号培养皿中加入链霉素的作用是____________________，3号培养皿中的菌落比1号、2号中的菌落少很多，这说明_____________________。

（4）该实验结论是：_________________________________________________，依据是_______________________________________________________________。

(1)采样与培养：将采集的土样混匀后称取1g，置于经过灭菌处理的________(填“固体”或“液体”)培养基中，28℃振荡培养。

(2)接种与选择：为避免培养液中菌体浓度过高，需将培养液进行________处理。之后，将菌液涂布接种于以________为唯一碳源的固体培养基上，30℃条件下培养。为避免污染，需将培养皿呈________状态放置。此外，为排除其他因素的影响，提高实验可信度．本步骤需设计________作为空白对照。

(3)筛选与纯化：将适量的碘液滴加在平板中的菌落周围，如果菌落周围的现象是________，则说明此种菌能够________。

       临床试用抗生素前，有时需要做细菌耐药实验。实验时，首先要从病人身上获取少量样本，然后按照一定的实验步骤操作，以确定某致病菌对不同抗生素的敏感性。

       回答下列问题：

（1）为了从样本中获取致病菌菌落，可用_______法或_________法将样本借种于固体培养基表面，经过选择培养、鉴别等步骤获得。

（2）取该单菌落适当稀释，用______法接种于固体培养基表面，在 37 ℃培养箱中培养24h，使其均匀生长，布满平板。

（3）为了检测该致病菌对于抗生素的敏感性，将分别含有A，B，C，D四种抗生素的滤纸片均匀置于该平板上的不同位置，培养一段时间后，含A的滤纸片周围出现透明圈，说明该致病菌对抗生素A_______；含B的滤纸片周围没有出现透明圈，说明该致病菌对抗生素B_____；含C的滤纸片周围的透明圈比含A的小，说明________；含D的滤纸片周围的透明圈也比含A的小，且透明圈中出现了一个菌落，在排除杂菌污染的情况下，此菌落很可能是抗生素D的________。

（4）根据上述实验结果，为达到抗菌目的，最好应选择抗生素_______。