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            • 1. 餐厨废水含有丰富的糖类、蛋白质等有机物,研究者将三种细菌单独或混合接种于餐厨废水培养液中,通过测定菌悬液细胞密度(结果如表)研究三者的关系,以期为利用餐厨废水制备复合菌肥的研究提供依据。下列说法错误的是(  )
              对照组 单独培养组 三种细菌混合培养组
              解磷巨大芽孢杆菌 0 8.49 8.24
              圆褐固氮菌 5.09 3.35
              解钾胶质芽孢杆菌 2.81 1.41
              注:cfu•mL-1指每毫升样品中培养出的菌落数
              A.上述细菌作为分解者将餐厨废水中的有机物分解
              B.对照组的培养液为没有经过灭菌处理的餐厨废水
              C.可用稀释涂布平板法,计算不同条件下的活菌数
              D.由结果可知,解磷巨大芽孢杆菌的竞争能力较强
            • 2. 刚果红能够与纤维素形成红色复合物,可用其鉴定纤维素分解菌。某研究小组将滤纸埋在土壤中,30天后从滤纸上取6g土壤样品加入30mL生理盐水中溶解,得到了富有纤维素分解菌的菌原液,并进行如下实验,回答下列问题:
              (1)稀释菌原液:为确定合适的稀释倍数,小组成员取1mL菌原液进行如图1所示的操作,在统计菌落时,发现平板上的平均菌落数为40个,则每毫升菌原液中的细菌数大约为______个。
              (2)培养基的准备:在对培养基进行高压蒸汽灭菌的过程中,完成加水、装锅、加热排气、保温保压适当时间后,切断热源,让灭菌锅内温度自然下降,______,打开排气阀,旋开固定螺栓,开盖,才可以取出灭菌的培养基等物品。待培养基冷却至50℃左右时倒平板,在培养基凝固之前加入灭菌的刚果红,从功能上来看,该培养基属于______培养基,培养基中碳源主要是______。
              (3)接种与观察:在无菌条件下,用______取0.1mL稀释后的菌悬液进行图2中______所示的操作,室温放置2~3分钟后倒置于恒温箱中培养,室温放置2~3分钟的目的是______。培养过程中定期观察菌落特征和透明圈的大小,图3中D/d的值越______,表示该菌对纤维素分解能力越强。
            • 3. 某研究小组利用“滤膜法”对受污染的河流水体进行了大肠杆菌活菌数目的测定。回答下列问题:
              (1)研究人员向葡萄糖蛋白胨培养液中加入适量的溴麝香草酚蓝水溶液后,装人图甲所示的试管中,再将污水样滴加进去振荡摇匀,一段时间后,若观察到溶液颜色变化情况为______,说明微生物在培养过程中产生了CO2.若要用重铬酸钾检测微生物在培养过程中是否产生了酒精,具体做法是______。
              (2)利用图乙所示的“滤膜法”测定大肠杆菌的数目时,应先制备牛肉膏蛋白胨固体培养基,该培养基的灭菌方法是______,灭菌后待培养基冷却至______℃左右时,在______附近倒平板。
              (3)图乙中滤膜的孔径应______(填“大于”“小于”或“等于”)大肠杆菌。若将滤膜转移到伊红美蓝培养基上培养一段时间,然后统计______色的菌落数目,就可估算出单位体积样品中大肠杆菌的数目,但这样得到的统计值往往要比实际值低,原因是______。
            • 4. 苹果除可直接食用外,还可将其制成饮品,如苹果汁、苹果酒、苹果酯等。回答下列问题:
              (1)在制作苹果汁时,为了提高出汁率和澄清度,常添加果胶酶,这是分解果胶的一类酶的总称,包括______、______和果胶酯酶等。
              (2)从微生物培养的角度分析,苹果汁能够为酵母菌的生长提供的成分有______。苹果汁发酵产生苹果酒的过程不需要严格的消毒处理,原因是______。
              (3)醋酸菌常用于苹果醋的制作,在分离优质醋酸菌时,若想对醋酸菌进行计数,则应用稀释涂布平板法在培养基上进行接种,平板划线法一般不用于活菌计数的原因是______。计数时,通常以菌落数在30~300的稀释度来计算细菌含量,原因是______。
            • 5. 酸奶因营养丰富和口感美味而深受大众喜爱,且含有活性乳酸菌,对身体大有益处。常见的乳酸菌主要为乳杆菌属、双歧杆菌属和嗜热链球菌属。现采用如下步骤对酸奶中的乳酸菌进行筛选、分离:
              酸奶→选择适宜稀释度→涂布MRS琼脂培养基→适宜温度培养→挑取单个菌落→接种于MRS琼脂平板或MC琼脂平板→菌种鉴定→接种MRS液体培养基→菌种保藏
              请回答下列有关问题:
              (1)制备MRS琼脂培养基时,采用______法灭菌15~20min。
              (2)倒平板操作时,应在______附近进行,待平板冷凝后将平板倒置的目的是______。
              (3)制备稀释液时,先将酸奶样品充分摇匀,以无菌吸管吸取样品______ mL放入装有225mL无菌水锥形瓶中,充分振荡,制成1:10的样品液。
              (4)培养一段时间后,从MRS固体培养基上挑多个单菌落,使用______法接种于MC琼脂平板或MRS琼脂平板上,于36℃±1℃______(填“厌氧”或“好氧”)条件下倒置培养48h后,再挑取单个菌落进行菌种鉴定。
              (5)菌种鉴定后将其接种至MRS液体培养基的目的是______。将得到的纯菌株进行长期保藏,可采用______的方法。
            • 6. 科研人员开展相关研究,从垃圾堆埋场中筛选到能够更高效降解聚乙烯类塑料菌株。回答下列问题:
              (1)科研人员从垃圾堆埋场的土样中筛选分离该株的原因是______。
              (2)进行该菌株的分离筛选时,先将士壤溶液接种在以______为碳源的液体培养基上,进行为期5天的富集培养;稀释适宜倍数后进一步分离纯化该微生物,常采用的接种方法是______,用该方法计数结果往往偏______,原因是______。
              (3)研究发现该菌株能降解作用,可能是分泌了______酶。研究人员提纯相应的酶需用到凝胶色谱法,该方法是根据______分离蛋白质。
            • 7. 脉孢霉的许多不同的营养缺陷型能在加有精氨酸的基本培养基上生长,其中一些还可以在加有其他物质的基本培养基上生长,实验结果如表所示:(“+”表示生长、“-”表示不生长)
              突变类型 不同培养基上的生长反应
              基本培养基 谷氨半醛 鸟氨酸 瓜氨酸 精氨酸
              Arg-8、Arg-9 - + + + +
              Arg-5、Arg-6 - - + + +
              Arg-3、Arg-12 - - - + +
              Arg-1、Arg-10 - - - - +
              进一步实验证明,在基本培养基中加入精氨琥珀酸后,Arg-10能生长而Arg-1不能生长。根据上述实验结果,能够推理出的结论是(  )
              A.精氨酸的合成途径是谷氨半醛→鸟氨酸→瓜氨酸→精氨酸
              B.在Arg-3突变株培养基中,可能有瓜氨酸积累
              C.Arg-1能够合成精氨琥珀酸,而Arg-10不能
              D.精氨琥珀酸可以取代基本培养基中的瓜氨酸
            • 8. 阿特拉津(简称AT)是一种广泛使用的除草剂,因为溶解性好、迁移率高、残留期长,容易引起土壤污染,进而对人体健康造成严重危害。分离和固定化AT降解菌可有效修复AT污染的土壤。请回答下列问题:
              (1)应从______的土壤中取样,可以通过______培养增加AT降解菌的浓度,以确保从土壤样品中分离到所需要的AT降解菌。为了确定得到的是AT降解菌,还需要进行______产AT降解酶的实验。
              (2)若固定AT降解菌中的粗提取酶,不宜采用包埋法的原因是酶分子______。
              (3)若直接固定AT降解菌,与固定化酶比较,从操作角度考虑的优点是______(答出两点)。
              (4)制备具有吸附和降解功能的固定化AT降解菌制剂的方法步骤是:①制备多孔性生物碳材料并制成悬浊液。②培养AT降解菌并制成菌悬液。③悬浊液、菌悬液和包埋剂混合,再加入到某溶液中,得到凝胶珠。④清洗凝胶珠。
              若用海藻酸钠做包埋剂,溶化时最好采用______加热的方法,③中的某溶液是指______溶液。AT降解菌制剂中具有吸附功能的是______。
            • 9. (1)纤雏素分解菌经选择培养后的样品需接种在______培养基上培养,筛选到几株有透明圈的菌落,其透明圈大小与纤维素酶的量和______有关。为了将分离到的菌株纯化,挑取了菌落在3块相同平板上划线,结果其中1块平板的各划线区均未见菌落生长,最可能的原因是______。
              (2)制作固定化酵母细胞时,充分混合均匀的酵母细胞溶液可在饱和的______溶液中形成疑胶珠,若凝胶珠颜色过浅,则说明______。酵母细胞固定化技术采用包埋法,而固定化酶不宜用此法,原因是______。
              (3)榨取西瓜汁主要用到______酶,该酶包括______(三种)。
            • 10. 下列有关实验室中微生物培养和分离的叙述错误的是(  )
              A.获得纯净培养物的关键是防止外来杂菌的入侵
              B.高温灭菌的目的是杀死所有微生物
              C.划线分离可在培养基上获得均匀分布的单菌落
              D.稀释涂布平板法可用于计数活菌数目
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