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            • 1． 某同学在做微生物实验时，不小心把圆褐固氮菌和酵母菌混合在一起．请你完成分离得到纯度较高的圆褐固氮菌和酵母菌的实验步骤，并回答有关问题：
              （1）主要步骤：
              ①制备两种培养基：一种是    培养基，另一种    的培养基．分别分成两份，依次标上A、A′和B、B′，备用．
              ②分别向A、B培养基中接种    ．
              ③接种后，放在恒温箱中培养3～4天．
              ④分别从A、B培养基的菌落中挑取生长良好的菌种，接种到A′、B′培养基中．
              ⑤接种后，把A′、B′培养基放入恒温箱中培养3～4天．
              （2）回答问题：
              第④⑤两个步骤的目的是    ．
              在步骤①中，为保证无杂菌污染，实验中应采用的主要措施有    、    、    ．
              难度：中等
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            • 2． 在农业生产中发现一种广泛使用的除草剂（含氮有机化合物）在土壤中不易降解，长期使用可污染土壤．为修复被该除草剂污染的土壤，可按下面程序选育能降解该除草剂的细菌（已知该除草剂在水中溶解度低，含一定量该除草剂的培养基不透明）．

              （1）制备土壤浸出液时，为避免菌体浓度过高，需将浸出液进行稀释处理．现有1L土壤浸出液，用无菌吸管吸取1mL样液至盛有9mL无菌水的试管中，依次稀释103稀释度．各取0.1mL已稀释103倍的水样分别接种到三个培养基上培养，记录的菌落数分别为55、56、57，则每升原土壤浸出液样中菌体数为    ．
              （2）要从长期使用该除草剂的土壤中分离目的菌，从用途方面来看，上述培养皿中培养基的成分特点是    ．
              （3）接种技术的核心是    ，是研究和应用微生物的前提．在划线接种时，连续划线的目的是将聚集的菌种逐步    ，培养时，只有很少菌落出现，大部分细菌在此培养基上不能生长的主要原因是    或有氧条件抑制了这些细菌的生长．
              （4）在培养基上形成的菌落中，无透明带菌落利用的氮源主要是    ，有透明带菌落利用的氮源主要是    ，据此可筛选出目的菌．实验结果如图2显示的A～E五种菌株中，    是最理想菌株．
              （5）科研人员用放射线处理该细菌获得两个突变株A和B，然后对突变株A和B进行实验，结果如表所示：
              接种的菌种一般培养基实验处理及结果
              A不生长添加营养物质甲，能生长
              B不生长添加营养物质乙，能生长
              A+B能生长不添加营养物质甲、乙就能生长
              突变株A不能在一般培养基上生长的原因是    ．突变株A和B混合在一起接种于一般培养基中能生长的最可能原因是    ．
              难度：中等
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            • 3． （2016春•盐城校级期中）为了调查赣江的水质状况，某研究小组测定了该河流水样中的细菌含量，并进行了细菌的分离等工作．回答下列问题：
              （1）制备实验所需的培养基时，在各成分都溶化后和分装前，要进行的是    和灭菌，对培养基进行灭菌的常用方法是    ．倒平板时要待平板冷凝后，将平板倒置，其主要原因是    ．
              （2）该小组可采用如图②所示的    （方法）检测水样中的细菌含量．在接种前，随机取若干灭菌后的空平板先行培养了一段时间，这样做的目的是    ；然后，将1mL水样稀释100倍，在3个平板上用涂布法分别接入0.1mL稀释液；经适当培养后，3个平板上的菌落数分别为39、38和37．据此可得出每升水样中的活菌数．
              （3）该小组采用平板划线法分离水样中的细菌．操作时，接种环通过灼烧灭菌，在第二次及以后划线时，总是从上一次的末端开始划线．这样做的目的是    ．
              （4）在纯化过程中，在固体培养基上划线分离过程中，正确的操作是    ．
              A．每次划线时，接种环都需要蘸菌液一次
              B．划线分离时，需要把接种环深入到培养基中进行接种
              C．划线时要将最后一区的划线与第一区的划线相连
              D．在超净平台中进行接种时，不能关闭过滤风．
              难度：中等
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            • 4． （2016春•枣阳市校级期中）醋酸菌是食品工业中常用的微生物，不仅可用于生产醋酸，某些类型还可用于生产细菌纤维素．回答下列问题：
              （1）醋酸菌在缺少糖源的情况下，可将乙醇氧化为    ，进而生成醋酸．进行醋酸发酵时，为了维持醋酸发酵培养液pH的相对稳定，可向培养液中加入    ．
              （2）筛选接种时，为了避免环境中微生物的污染，实验操作应在    附近进行；某同学采用平板划线法进行接种，在适宜条件下培养一段时间后．发现一个培养皿中某部位的菌落分布呈沟槽状，与其他部位的菌落分布有明显差异，其原因最可能是划线时该部位    ．
              （3）鉴定菌种的依据通常包括菌落的形状、大小    等菌落特征．将鉴定的菌种进行临时保存时，可在低温下使用试管斜面保存，但该方法除保存时间短外，菌种还易    ；若需较长时间保存菌种，可用的方法是    ．
              （4）利用筛选出的优质菌种进行生产时．研究人员测得培养过程中的细菌纤维素产量、培养液中的残糖量和残氮量如图所示．图中代表培养液中残氮量的是    曲线．与B曲线相比，A曲绂下降更快的主要原因是    ．
              难度：中等
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            • 5． 有机农药苯磺隆是一种除草剂，长期使用会污染环境．研究发现，苯磺隆能被土壤中某些微生物降解． 分离降解苯磺隆的菌株和探索其降解机制的实验过程如图甲、乙所示．

              （1）微生物生长繁殖所需的主要营养物质有碳源、水、    、    四类，该实验所用的培养基以    为碳源．从功能上看，该培养基属于    培养基．
              （2）制备培养基的过程中，平板冷凝后，需将培养皿倒置，其原因是    ．
              （3）纯化菌种时可采用平板划线法进行接种，接种环一般通过    灭菌，在第二次及其后的划线操作中，要注意    、    ．
              （4）为探究苯磺隆的降解机制，将该菌种的培养液过滤离心，取上清液作图乙所示实验．该实验的假设是    ．该实验设计是否合理？    ，为什么？    ．
              难度：中等
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            • 6． （2016春•泰州期中）表所示为筛选某种纤维素分解菌的培养基配方，用刚果红染色法鉴定．请据此回答下列问题：
              NaNO3Na2HPO47H2OKH2PO4MgSO47H2OKCl酵母膏水解酪素纤维素粉蒸馏水
              1g1.2g0.8g0.5g0.5g0.5g0.5g5g定容至1000mL
              （1）根据上述配方可知该培养基是     培养基（填“固体”或“液体”）．为观察菌落特征，通常在该培养基中加入    ．从功能上看，该培养基为选择培养基，因为它只允许分解纤维素的细菌生长，其他种类的细菌会因为     生长受抑制．
              （2）该培养基的配制步骤包括：计算，称量，溶化，灭菌，    ；该培养基通常采用    法进行灭菌，据图结果分析在培养基接种时采用了     法．
              （3）若某同学取稀释倍数为106的稀释液各0.1mL分别制作了三个平板，统计的菌落数分别为183、176和169，则1mL 样品中的细菌数是     个，该方法统计的菌落数往往比活菌的实际数目    ．
              难度：中等
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            • 7． 微生物与人类关系密切，请分析有关的资料并回答问题：
              表1：A培养基配方
              KH2P04Na2 HP04MgS04．7H20葡萄糖尿素琼脂H2O
              1.4g2.1g0.2g10.0g1.0g15.0g1000ml
              表2：B培养基配方
              纤维素粉NaN03Na2HP04．7H20KH2P04MgS04．7H20KCl酵母浸膏H2O
              5glg1.2g0.9g0.5g0.5g0.5g1000ml
              （1）A培养基中氮源物质是    ，B培养基中属于碳源的是    ．据B培养基的成分，所培养微生物的同化作用类型是    ．
              （2）依物理性质划分，A培养基属于    培养基．如果要分离土壤中能分解尿素的细菌，应选择上述    种培养基，该培养基能分离该菌的原因是    ．
              （3）制备培养基的基本操作步骤是    
              a．倒置培养基b．计算c．溶化d．称量e．灭菌 f．调PH值
              A．a→b→c→d→f→e B．e→b→d→f→c→aC．b→d→f→c→a→eD．b→d→c→f→e→a
              （4）通常培养基采用    法灭菌，原因是    ．在制备固体培养基的倒平板操作时，平板冷凝后，应将平板倒过来放置，这样做的目的是    ．
              （5）培养微生物时，接种方法有多种，常用的除了涂布法，还有    法、    法．将接种环在火焰上灼烧并冷却后才能接种的原因是    ．
              难度：中等
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            • 8． 如表所示为某微生物培养基的配方，请回答：
              成分含量
              NaNO33g
              K2HPO41g
              KCl0.5g
              MgSO4•7H2O0.5g
              FeSO40.01g
              （CH2O）30g
              H2O1 000ml
              青霉素0.1万单位
              （1）依物理性质，该培养基属于    培养基．依用途划分，则属于    培养基．
              （2）根据培养基原料，所培养微生物的同化作用的类型是    ，培养的微生物可能是    ．
              （3）该培养基中的碳源是    ．不论何种培养基，在各成分都溶化后分装前，要进行的是    ．
              （4）若用该培养液培养纤维素分解菌，应除去的物质是    ，应加入的物质是    ，为检测纤维素分解菌的存在与否还应加入    ．
              难度：中等
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            • 9． 在农业生产中发现一种广泛使用的除草剂（含氮有机化合物）在土壤中不易降解，长期使用可污染土壤．为修复被该除草剂污染的土壤，可按下面程序选育能降解该除草剂的细菌（已知该除草剂在水中溶解度低，含一定量该除草剂的培养基不透明）．

              （1）制备土壤浸出液时，为避免菌体浓度过高，需将浸出液进行    处理．
              （2）要从长期使用该除草剂的土壤中分离目的菌，上述培养皿中培养基为    体培养基．对培养基进行灭菌，常采用的方法是    ．实验操作者的双手用    消毒．
              （3）在第2次及其后划线总从上次划线末端开始的原因是    
              （4）培养后发现，只有很少菌落出现，大部分细菌在此培养基上不能生长的主要原因是    或有氧条件抑制了这些细菌的生长．
              （5）在固体培养基上形成的菌落中，无透明带菌落利用的氮源主要是    ，有透明带菌落利用的氮源主要是    ，据此可筛选出目的菌．
              难度：较难
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            • 10． 如图是工业上利用微生物由纤维素生产乙醇的基本工作流程，请回答下列问题：

              （1）上述工作流程中①环节需要的微生物大多分布在富含纤维素的土壤环境中，要从土壤中分离获取这种微生物，应采用具有    作用的培养基，培养基中的碳源为    ．
              （2）为了进一步鉴别该微生物是否是纤维素分解菌，在培养基中需加入    染料进行鉴定．
              （3）生产中可以满足④环节的常见菌种是    ．
              （4）制作腐乳的实验流程是：    →加盐腌制→加卤汤装瓶→密封腌制．
              难度：较难
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