玉米是重要的粮食作物，经深加工可生产酒精、玉米胚芽油和果糖等。流程如下：

（2）玉米胚芽油不易挥发，宜选用___________法或____法从玉米胚芽中提取。

（3）玉米淀粉经酶解形成的葡萄糖可在葡萄糖异构酶的作用下转化成果糖。利用________技术可使葡萄糖异构酶重复利用，从而降低生产成本。

（4）利用PCR技术扩增葡萄糖异构酶基因时，需用耐高温的__________催化。PCR技术一般要经历三十次以上的循环，每次循环包括变性、_______和_______三步。

[生物——生物技术实践]

幽门螺杆菌是栖息在胃粘膜的革兰氏阴性螺旋状杆菌，具有强的脲酶（能降解尿素）活性，其代谢类型属于异养厌氧型（氧气浓度在5％～8％左右适合，完全无氧或空气环境中无法生存），这种细菌是慢性胃炎、甚至胃癌发生的元凶。

（1）为了对胃炎患者的胃粘膜提取物稀释样液中幽门螺杆菌进行分离，应将样品稀释液接种于以________为唯一氮源的固体选择培养基上，接种后的培养皿在________条件下，倒置于37℃的恒温培养箱中培养。

（2）分离培养幽门螺杆菌时必须进行无菌操作，包括培养基和各种器皿都必须是无菌的，培养基常用的灭菌方法有________。

（3）欲检测上述培养基中是否具有幽门螺杆菌这类细菌的存在，向培养基中添加酚红指示剂，培养基中菌落周围显示红色环带，即表明这类细菌的存在，这种检测过程的机理是________。

（4）采用液体培养基培养幽门螺杆菌，为了测定菌液中的菌体数量，一般采用________法将一定量的菌液接种到固体培养基上，统计________的数量来代表菌体数，这种检测方法测得的结果一般偏________（填“大”或“小”），原因是________。

人和哺乳动物的尿中含有尿素，大量尿素的存在会对环境造成污染。土壤中有些细菌含有脲酶，可通过降解尿素作为其生长的氮源。现对土壤中的这类细菌进行分离实验，请回答下列问题：

(1)分离培养细菌时必须进行无菌操作，包括培养基和各种器皿都必须是无菌的，常用的灭菌方法有                   、                    (至少答2种)。

(2)用含有酚红指示剂的培养基筛选能分泌脲酶的细菌，从功能上划分该培养基属于     培养基。若培养基中存在有分解尿素的细菌，其菌落周围会出现红色环带，这是由于尿素被分解产生的         使pH升高，使酚红指示剂产生颜色变化，从而证明这一菌株以尿素为氮源。变色区域越大，表明该菌株利用尿素的能力              。

(3)与全营养培养基中的菌落相比，以尿素为氮源的培养基中菌落数           。

A．多        B．少      C．相等      D．几乎为零

(4)将样液进行一系列的梯度稀释，然后接种培养。在稀释土壤溶液的过程中每一步都要在              旁进行操作。接种后的培养皿            于37℃的                中培养。

某科研兴趣小组欲对土壤中分解尿素的细菌进行分离纯化和计数，请帮助完成实验。

（1）实验原理：分解尿素的细菌由于含有脲酶，可将                  而使周围环境的PH上升，在                的培养基中加入                 指示剂，对其进行分离、鉴别；通过平板上的菌落数可以推测样品中的活菌数。

（2）实验简要步骤：

①土壤取样并制备培养基：用                 法对培养基进行灭菌。

②分离纯化该细菌：用稀释涂布平板法进行接种，首先需对土壤滤液进行              ，再分别取土壤滤液0.1mL涂布在每一平板上。

③培养、观察与计数。

（3）有同学发现，稀释倍数为10⁴的5个平板上，长出的菌落数分别为9、147、150、153和360，则每升土壤样液中的细菌数量为               个。

（4）某些同学想将分离出的目的菌在-20℃长期保存，菌液中常需要加入一定量的____（填化学物质）。

【生物技术实践】苹果园广泛使用的一种除草剂（含氮有机物）在土壤中不易被降解，长期使用可污染土壤．为修复被该除草剂污染的土壤，科学工作者按甲图程序选育能降解该除草剂的细菌（已知该除草剂在水中溶解度低，含一定量该除草剂的培养基不透明）。

（1）制备土壤浸出液时，为避免菌体浓度过高，需将浸出液进行稀释处理。现有一升土壤浸出液，用无菌吸管吸取1mL液样至盛有9mL无菌水的试管中，再稀释10³倍．各取0.1mL已稀释10³倍的水样分别接种到三个培养基上培养，记录的菌落数分别为55、56、57，则每升原土壤浸出液样中菌体数为______。

（2）科学工作者为修复被该除草剂污染土壤的目的来选择细菌，所用培养基应该_______

_____________。

（3）接种技术的核心是_________________。在划线接种时，连续划线的目的是将聚集的菌种逐步_______________，培养时，只有很少菌落出现，大部分细菌在此培养基上不能生长的主要原因是________________或有氧条件抑制了这些细菌的生长。

（4）在培养基上形成的菌落中，无透明带菌落利用的氮源主要是__________，有透明带菌落利用的氮源主要是______________，据此可筛选出目的菌。实验结果如乙图显示的A～E五种菌株中，___________是最理想菌株。

[生物——选修1：生物技术实践]

已知硅酸盐细菌在甲（尿素为唯一氮源）、乙、丙培养基上均能生长。表1表示以尿素为唯一氮源的培养基的配方，表2是每种培养基上每个稀释度的菌落数及菌落直径。请回答下列问题：

表1

表2

（1）表1从物理性质看属于________培养基，按用途划分属于________培养基。

（2）为统计硅酸盐细菌的数目，应采用________法进行接种，该方法的所有操作都应在________环境中进行。表2中，稀释度为________时，统计的结果较为可靠。

（3）为检测培养基灭菌是否彻底，应进行的操作是________。由表2中的数据得出，用________培养基分离硅酸盐细菌的效果最好。

（4）甲培养基中加入________指示剂，可根据指示剂变红的情况初步鉴定菌种分解尿素的情况。

【生物－选修1：生物技术实践】

现在大力提倡无纸化办公，但是每年仍然不可避免的产生了大量废纸，其主要成分是木质纤维，人类正努力将其转化为一种新的资源——乙醇。下图是工业上利用微生物将纤维素

（1）上述工作流程中①环节需要的微生物大多分布在＿＿＿＿＿＿的环境中。在分离分解纤维素的微生物时，土壤取样后，通过选择培养可以＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿，在筛选①环节需要的微生物时，可采用＿＿＿＿＿＿（方法），通过＿＿＿＿＿＿直接对微生物进行筛选。

（2）可利用＿＿＿＿＿＿技术，使②中的酶能够重复利用。

（3）生产中可以满足④环节的常见菌种是＿＿＿＿＿＿，④过程要注意对接种器材进行＿＿＿＿＿＿。为了确保⑤环节成功，后期要注意发酵装置＿＿＿＿＿＿。

37．[生物－选修1：生物技术实践]
生物技术与我们的生活息息相关。请根据所学知识，回答下列有关问题：
（1）在泡菜腌制过程中，亚硝酸盐含量会发生变化，测定亚硝酸盐含量的方法是________。亚硝酸盐在特定的条件下会转变为________，进而可能引发人体细胞癌变。
（2）制作葡萄酒的菌种主要来源是________。检验是否产生酒精可在________条件下，用________试剂检测。
（3）若要提高果酒的产量，发酵过程中要控制好哪些条件？________（至少写出两项）。
（4）为获得一种能高效降解有机磷农药的细菌，应使用含有________的选择培养基；使用后的培养基丢弃前一定要进行灭菌处理，目的是________。

(1) 海藻酸钠能作为固定载体的特点是  ▲  ，在联合固定果胶酶和酵母菌之前，对海藻酸钠所作的操作是配制一定浓度的海藻酸钠溶液，用  ▲  的方法溶化海藻酸钠，然后再  ▲  。

(2)果胶酶在果汁生产中具有重要的作用，把果胶酶和酵母菌固定在一起生产红葡萄酒的重要意义在于  ▲  。

(3)果胶酶通常先与戊二醛交联，然后与活化的酵母菌一起用海藻酸钠包埋固定，这是因为  ▲  。

(4) 在初级发酵时一般温度控制在  ▲  ，在发酵过程中，尤其要随时监控和调整发酵罐中的温度和pH，使其在适宜的范围内波动，其主要目的是  ▲  。