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            • 1. H18杂交瘤细胞产生的抗人肝癌单克隆抗体HAb18对于人体肝癌的靶向治疗具有重要的意义,但H18杂交瘤细胞在培养过程中的凋亡现象制约着细胞的高密度培养以及生产能力的提高,通过基因工程以改造H18杂交瘤细胞的抗凋亡能力,相关研究步骤如下:
              ①细胞培养:将人肝癌细胞在含10%小牛血清的培养液中培养.一段时间后用胰蛋白酶处理培养液,漂洗后调整细胞悬液浓度为1×107个•mL-1
              ②细胞融合及筛选:将脾脏细胞悬液和骨髓瘤细胞悬液在50%PEC作用下进行融合,筛选出能产生抗人肝癌单克隆抗体HAb18的H18杂交瘤细胞.
              ④改造H18杂交瘤细胞:利用PCR技术获得小鼠的bel-Xi基因(抗凋亡基因),构建表达载体,通过脂质体法导入H18杂交留细胞,再筛选出抗凋亡能力明显提高的H18杂交瘤细胞.
              请分析回答:
              (1)步骤①肝癌细胞培养液中加入小牛血清的目的是______,培养液中还需加入一定量抗生素的目的是______.
              (2)步骤②中,肝癌细胞免疫小鼠需在一定时间内间隔注射3次,其目的是______.
              (3)步骤③中,除了用50%PEC促进细胞融合外,常用的生物诱导因素是______,步骤④中通过脂质体法将表达载体导入H18杂交廇细胞的原理是______.
              (4)与普通抗肝癌药物相比,用抗人肝癌单克隆抗体HAb18与相应抗癌药物结合制成的“生物导弹”治疗肝癌的主要优点是______.
              (5)乙醇有诱导细胞调亡的作用,为了建立H18杂交瘤细胞凋亡检测模型,科研人员利用不同浓度的乙醇溶液诱导H18杂交廇细胞凋亡,其结果如图所示,抗凋亡细胞株的建立与筛选应选择的诱导条件是______.
            • 2.

              某课题组为解决本地奶牛产奶量低的问题,引进了具高产奶基因但对本地适应性差的纯种公牛。

              (1)拟进行如下杂交:

              A(具高产奶基因的纯种)×♀B(具适宜本地生长基因的纯种)→C

              选择B作为母本,原因之一是胚胎能在母体内正常______。若C中的母牛表现为适宜本地生长,但产奶量并不提高,说明高产奶是______性状。为获得产奶量高且适宜本地生长的母牛,根据现有类型,最佳杂交组合是_______,后代中出现这种母牛的概率是________(假设两对基因分别位于不同对常染色体上)。

              (2)用以上最佳组合.按以下流程可加速获得优良个体。

              精子要具有受精能力,需对其进行_________处理;卵子的成熟在过程_________中完成。在过程④的培养基中含有葡萄糖,其作用是________。为筛选出具有优良性状的母牛,过程⑤前应鉴定胚胎的___________。子代母牛的优良性状与过程_________的基因重组有关。

              (3)为了提高已有胚胎的利用率,可采取______技术。

            • 3.

              某生物兴趣小组对一种抗癌新药进行实验时,以动物肝癌细胞为材料,测定抗癌药物对体外培养细胞增殖的影响。请回答下列有关动物细胞培养的问题。

              (1)在动物细胞培养时,通常在培养基中还需要加入适量____等一些天然成分。细胞培养应在含5% CO2的恒温培养箱中进行,CO2的作用是____。

              (2)若用动物的肝脏组织块制备肝细胞悬液,需要用________处理。

              (3)在细胞生长过程中,当细胞贴壁生长到一定程度时,其生长会受到抑制,这种现象称为________。

              (4)为了防止细胞培养过程中细菌的污染,可向培养液中加入适量的________。

            • 4. 某课题组为解决本地种奶牛产奶量低的问题,引进了含高产奶基因但对本地适应性差的纯种公牛。


              (1)拟进行如下杂交:

              ♂A(具高产奶基因的纯种)×♀B(具适宜本地生长基因的纯种)→C

              选择B作为母本,原因之一是胚胎能在母体内正常 。若C中的母牛表现为适宜本地生长,但产奶量并未提高,说明高产奶是 性状。为获得产奶量高且适宜本地生长的母牛,根据现有类型,最佳杂交组合是 ,后代中出现这种母牛的概率是 (假设两对基因分别位于不同对常染色体上)。

              (2)用以上最佳组合,按以下流程可加速获得优良个体。

              精子要具有受精能力,需对其进行 处理;卵子的成熟在过程 中完成。在过程④的培养基中含有葡萄糖,其作用是 。为筛选出具有优良性状的母牛,过程⑤前应鉴定胚胎的 。子代母牛的优良性状与过程 的基因重组有关。

              (3)为了提高已有胚胎的利用率,可采用 技术。

            • 5.

              神经生长因子蛋白(NGF)能给神经元提供营养和促进突起生长,能调控神经元的发育、分化、生长和再生。下图是利用奶牛乳汁生产NGF的图解,请据图回答下列问题:



              (1)要获得单个成纤维细胞,过程②需用_____处理奶牛胎儿的皮肤组织块。

              (2)为获得较多的卵细胞,可给供体母牛注射_____,以促进排卵。采集到的卵细胞最好是发育到_____期,此时才具有受精能力。

              (3)从A到B过程中所用的胚胎工程技术是_____。在过程⑥进行前,需要对代孕母牛做_____处理,以便给供体胚胎移入受体提供相同的生理环境。

              (4)若要一次获得多只相同的转基因牛,可采用_____技术。

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