(2)为了从自然界中获得能产生脂肪酶的微生物B的单菌落，可从含有油料作物种子腐烂物的土壤中取样，并应选用以________为碳源的固体培养基进行培养。

(3)若要测定培养液中微生物B的菌体数，可在显微镜下用____________直接计数；若要测定其活菌数量，可选用________法进行计数。

(4)为了确定微生物B产生的脂肪酶的最适温度，某同学测得相同时间内，在35 ℃、40 ℃、45 ℃温度下降解10 g油脂所需酶量依次为4 mg、1 mg、6 mg，则上述三个温度中，________℃条件下该酶活力最小。为了进一步确定该酶的最适温度，应围绕________℃设计后续实验。

解读下面与酶有关的曲线，回答下列问题：

(1)酶的作用机理可以用甲图中________段来表示。如果将酶催化改为无机催化剂催化该反应，则B在纵轴上将________(填“上移”或“下移”)。

(2)乙图中160 min时，生成物的量不再增加的原因是_______________________。

(3)联系所学内容，分析丙图曲线：

①对于曲线ABC，若x轴表示pH，则曲线上B点的生物学意义是____________。

②对于曲线ABD，若x轴表示反应物浓度，则y轴可表示____________。制约曲线BD增加的原因是____________。

下图1表示苹果成熟期有机物质的变化过程，图2表示小麦开花数天后测定种子中主要物质的百分比变化情况。

                        图1                                                       图2

②苹果成熟过程中，________(激素)会逐渐增多，并合成纤维素酶，作用于________，使其果肉日益松软。

③种子成熟时，淀粉的形成与一种磷酸化酶的活性有密切关系，为验证磷酸化酶是否是蛋白质，实验过程中实验组试管中加入____________，对照组试管中加入_______________，然后向两只试管加入_______________，如果出现紫色现象，则证明磷酸化酶是蛋白质。

游离在细胞质基质中的核糖体合成的蛋白质（多肽）可能成为细胞质基质的“永久居民”，也可能运送到细胞核、线粒体、内质网等结构，其“命运”取决于自身的氨基酸序列中是否包含了分选信号序列以及是哪种分选信号序列，如下图所示：

（1）蛋白质可以穿过              进入细胞核，这种运输方式          （具有、没有）选择透过性。

（2）线粒体所需的蛋白质        （全部、部分）来自细胞质基质，蛋白质进入线粒体多数需要位于其外膜上的TOM复合物和内膜上的TM23复合物的协助，据此推测TOM复合物和TM23复合物在功能上很可能相当于主动运输所需要的            。               。

（3）多肽在进入内质网之后需要继续完成翻译并进行     ，研究发现，源于内质网的蛋白质其结构中并不包含分选信号序列，据此推测内质网中可能含有切除分选信号序列的        酶。

（4）内质网可以通过“出芽”形成           ，包裹着蛋白质定向移动到高尔基体并与之融合，“出芽”和融合的基础是生物膜具有             性。

为了研究温度对某种酶活性的影响，设置三个实验组：A组（20℃）、B组（40℃）和C组（60℃），测定各组在不同反应时间内的产物浓度（其他条件相同），结果如图。回答下列问题：

（1）三个温度条件下，该酶活性最高的是           组。

（2）在时间t₁之前，如果A组温度提高10℃，那么A组酶催化反应的速度会                。

（3）如果在时间t₂时，向C组反应体系中增加2倍量的底物，其他条件保持不变，那么在t₃时，C组产物总量______________，原因是                                                             。

（4）生物体内酶的合成原料是_______________，其催化化学反应的原因是___________________________。

嗜热土壤芽胞杆菌产生的β-葡萄糖苷酶（BglB）是一种耐热纤维素酶，为使其在工业生产中更好地应用，开展了以下试验：

Ⅰ．利用大肠杆菌表达BglB酶

（1）PCR扩增BglB基因时，选用        杆菌基因组DNA作模板。

（2）右图为质粒限制酶酶切图谱。BglB基因不含图中限制酶识别序列。为使PCR扩增的BglB基因重组进该质粒，扩增的BglB基因两端需分别引入          和          不同限制酶的识别序列。

（3）大肠杆菌不能降解纤维素，但转入上述建构好的表达载体后则获得了降解纤维素的能力，这是因为                                                              

Ⅱ．温度对BglB酶活性的影响

（4）据图1、2可知，80℃保温30分钟后，BglB酶会        ；为高效利用BglB酶降解纤维素，反应温度最好控制在         （单选）。

A．50℃    B．60℃     C．70℃     D．80℃

Ⅲ．利用分子育种技术提高BglB酶的热稳定性

在PCR扩增BglB基因的过程中，加入诱变剂可提高bglB基因的突变率。经过筛选，可获得能表达出热稳定性高的BglB酶的基因。

（5）与用诱变剂直接处理嗜热土壤芽胞杆菌相比，上述育种技术获得热稳定性高的BglB酶基因的效率更高，其原因是在PCR过程中              （多选）。

A．仅针对BglB基因进行诱变    B．BglB基因产生了定向突变

C．BglB基因可快速累积突变     D．BglB基因突变不会导致酶的氨基酸数目改变

如图是某种真核生物的细胞亚显微结构示意图，试据图回答：

（2）图中与细胞壁的形成最相关的细胞器是[___]___________．

同工酶指生物体内催化相同反应而分子结构不同的酶。以茶树菇、双孢菇、香菇为研究对象探究温度对酶活性影响及有无同工酶的实验。取0.5ml三种食用菌的提取液，室温下测定多酚氧化酶（PPO,该酶可引起组织褐变）的活性如图1；不同温度条件下测定的相对酶活性（相对酶活=某一特定条件下PPO的活力/最适条件下PPO的活力×100%）如图2；温度对茶树菇中PPO活性影响的曲线如图3。请回答下列问题：

(1)由图1得出的结论是                                      。            菇在储藏加工过程中易发生酶促褐变而影响产品的品质。

(2)图2中两条线的交点                      (填“一定”或“不一定”)表示两种生物PPO活性相等，原因是                                                    。

(3)图3中，茶树菇的PPO活性在25℃、50℃时出现两个高峰的原因最可能是                                          。

（1） 与乳酸菌相比，酵母菌在结构上的主要区别是。培养酵母菌R时，培养基中的蔗糖和硝酸盐可分别为酵母菌R的生长提供。

（2）采用平板划线法接种酵母菌R时，需先灼烧接种环，其目的是。培养基通常采用的灭菌方法是。 

（3）为了验证萃取物是否是胡萝卜素，该同学将叶绿素b、叶绿素a、叶黄素、萃取物和色素混合液(含叶绿素b、叶绿素a、叶黄素和胡萝卜素)依次点样在滤纸的1、2、3、4、5位置（如图甲所示），并进行层析，滤纸条上各色素带的位置为（填字母）时，即可说明该萃取物最可能是胡萝卜素。

（4）酵母菌R能分泌A、B两种酶，下图是某课题组关于这两种酶的实验结果：

①图中结果显示，在40℃至60℃范围内，热稳定性较好的酶是。高温条件下酶容易失活，其原因是。

②由图可知，若要从酵母菌R种群中筛选出能产生热稳定性高的酶的菌株，应在的条件下培养。

某工厂生产了一种加酶洗衣粉，其包装袋上印有如下部分说明。

成分：含碱性蛋白酶等

用法：洗涤前先将衣物浸泡于含洗衣粉的水中数小时；使用温水效果更佳。

注意：①切勿用于洗涤丝质和毛质衣料。②用后需要彻底清洗双手。

请回答以下问题：

(1)质检局针对该洗衣粉设计了如图所示的实验进行检验，该实验的目的是___              ______。

(2)某学生为探究该洗衣粉中酶催化作用的最适温度，参考上述实验(1)的实验材料及方法进行了有关实验，并把实验结果用右图的曲线表示。

①该实验中，温度、pH分别属于__________变量、________________变量。

②由图可知，使用该加酶洗衣粉的最适宜温度约为______________。

③在0℃和75℃时，酶的催化效率基本都降为零，但温度再度回到45℃，后者的催化作用已不能恢复，这是因为                                                                          。

④该学生在实验过程中可通过直接测定_______________        __________作为指标来表示酶的催化效率。

(3)该加酶洗衣粉不能用于洗涤丝质和毛质衣物，其主要原因是_________               ________。

(4)为什么用后需要彻底清洗双手？ ___________                         ________________________。